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本發(fā)明成功將 EAMM 蛋白和抗原 HspX 在基因水平進(jìn)行融合構(gòu) 建了新的融合蛋白 EAMMH，并將該不帶標(biāo)簽的融合蛋白成功進(jìn)行表 達(dá)和純化。EAMMH 融合蛋白以可溶形式表達(dá)，明顯改善了 EAMM 以包涵體進(jìn)行表達(dá)的狀況。此外，EAMMH 蛋白融合了結(jié)核分枝桿菌 主要的生長(zhǎng)期抗原和休眠期抗原，并可誘導(dǎo)較強(qiáng)的針對(duì)各期抗原的特 異性細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答。小鼠結(jié)核分枝桿菌氣霧攻擊模型證 明，該新的融合蛋白疫苗具

現(xiàn)有伴隨診斷主要是基因檢測(cè)，而基因突變并不等于蛋白質(zhì)表達(dá)，更不意味著靶點(diǎn)激活。本項(xiàng)目基于蛋白組學(xué)，特異性捕獲磷酸化酪氨酸激酶（最主要靶點(diǎn)），直接檢測(cè)靶點(diǎn)激活狀態(tài)，極低成本為腫瘤用藥提供最精準(zhǔn)指導(dǎo)。

本發(fā)明涉及一種新型的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細(xì)胞水平篩選系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應(yīng)用。所述篩選系統(tǒng)由HEK293細(xì)胞或CHO細(xì)胞構(gòu)建，含有來(lái)自以下序列中不同組間基因序列構(gòu)建的2種融合表達(dá)載體：第1組：(1)DnaE基因的C端與報(bào)告基因的C端的拼接序列：DnaE-C-Report-C，(2)DnaE基因的N端與報(bào)告基因的N端的拼接序列：Report-N-DnaE-N；第2組：①GPCR基因，②β-arrestin基因。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：應(yīng)用本發(fā)明篩選系統(tǒng)進(jìn)行G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細(xì)胞水平篩選，靈敏度高、特異性強(qiáng)，操作簡(jiǎn)單、快速，檢測(cè)范圍廣，對(duì)任何靶細(xì)胞型中任何GPCR或GPCR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑的激動(dòng)劑、拮抗劑都可以篩選。

本發(fā)明成功將EAMM蛋白和抗原HspX在基因水平進(jìn)行融合構(gòu)建了新的融合蛋白EAMMH，并將該不帶標(biāo)簽的融合蛋白成功進(jìn)行表達(dá)和純化。EAMMH融合蛋白以可溶形式表達(dá)，明顯改善了EAMM以包涵體進(jìn)行表達(dá)的狀況。此外，EAMMH蛋白融合了結(jié)核分枝桿菌主要的生長(zhǎng)期抗原和休眠期抗原，并可誘導(dǎo)較強(qiáng)的針對(duì)各期抗原的特異性細(xì)胞免疫和體液免疫應(yīng)答。

真菌疏水蛋白具有自我裝配成膜的性質(zhì)，因此 （1）疏水蛋白可作為蛋白和細(xì)胞固定化的媒介，可用于生物傳感器和生物芯片，作為引發(fā)層，交聯(lián)上配體或形成融合蛋白，能使特定分子固定化到特定表面。 （2）它能改變表面的屬性，保護(hù)表面。可用于提高醫(yī)學(xué)器官移植物生物相容性和防止微生物細(xì)胞粘附；可應(yīng)用于醫(yī)藥行業(yè)中燒傷、創(chuàng)傷的創(chuàng)面保護(hù)，為臨床病人創(chuàng)面保護(hù)和恢復(fù)提供一種安全無(wú)毒、操作簡(jiǎn)便、高效低耗的新手段。 （3）作為一種生物表面活性劑，疏水蛋白還可以用于促進(jìn)土壤中的污染物的降解和應(yīng)用在石油泄漏后回收石油的過(guò)程中。 （4）疏水蛋白具有表面活性，可用于食品對(duì)抗相變能力并形成穩(wěn)定泡沫，使其在密封食品生產(chǎn)上發(fā)揮重要作用； （5）也可用于日用化妝品生產(chǎn)中，因疏水蛋白可以作為洗潔產(chǎn)品的成分，根據(jù)其疏水、親水兩相間的轉(zhuǎn)變，可通過(guò)自我裝配而將面部的油脂等疏水的成分包裹起來(lái)，再用水清洗將其除去，也可以作為保護(hù)秀發(fā)的天然膜，使發(fā)部維持清潔并保持一定水分；將它運(yùn)用到面部的美容護(hù)理，由于它的特性，能使皮膚表面形成一層天然生物活性保護(hù)膜，起到皮膚保濕、免受外界空氣中污濁物的侵害，從而達(dá)到護(hù)膚美容之功效。 （6）疏水蛋白直接包裹藥物以改變藥物溶解性并實(shí)現(xiàn)控、緩釋。通過(guò)真菌疏水蛋白與難溶于水的藥物混合，可以達(dá)到良好的分散效果，并延長(zhǎng)了兩種藥物的藥效持續(xù)時(shí)間。 （7）真菌疏水蛋白與其他的功能性蛋白或小肽組成融合蛋白，同時(shí)發(fā)揮疏水蛋白的穩(wěn)定吸附材料表面的特性和功能性蛋白或小肽的特異性功能，如在組織工程、抗炎抗菌材料等。 項(xiàng)目特色： 純天然生物制品，無(wú)毒害，無(wú)污染。耐酸堿，抗相變能力強(qiáng)。自我裝配形成有活性的蛋白膜。具有良好的熱穩(wěn)定性和透氣不透水性。由于它的特性，使得它具有：（1）自動(dòng)成膜，無(wú)需貼敷，使用便利；（2）透氣性?xún)?yōu)良；(3)純天然無(wú)化學(xué)添加成分，瑞氏木霉已被證明是安全的菌種；（4）組織相容性好，避免了嚴(yán)重的排異反應(yīng)；（5）耐高溫（100 攝氏度仍保持活性），易于消毒；（6）穩(wěn)定不降解，便于產(chǎn)品的長(zhǎng)期保存；（7）用表面活性劑就可以很容易地清洗（8）延展性好，1 毫克的疏水蛋白在液面就可以展開(kāi) 1 平方米的薄膜（9）透明，可直接透過(guò)成膜觀察（10）性?xún)r(jià)比高。 市場(chǎng)應(yīng)用前景： 目前國(guó)際上尚未實(shí)現(xiàn)疏水蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)，其相關(guān)應(yīng)用產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)更為滯后。我們?cè)谝褜?shí)現(xiàn)疏水蛋白中試研發(fā)的基礎(chǔ)上，擴(kuò)大發(fā)酵規(guī)模，進(jìn)行后續(xù)產(chǎn)品的開(kāi)發(fā)，我們的技術(shù)和工藝現(xiàn)居國(guó)際領(lǐng)先地位，無(wú)疑會(huì)占有寶貴的先機(jī)。 疏水蛋白產(chǎn)品將作為新一代膜生物活性材料進(jìn)入市場(chǎng)，它的出現(xiàn)將會(huì)革命性地取代現(xiàn)有化學(xué)產(chǎn)品，這無(wú)疑給人類(lèi)的健康帶來(lái)了很大的益處，消除人類(lèi)在預(yù)防和治療疾病、食品加工、以及醫(yī)學(xué)檢測(cè)、食物保鮮方面為健康做出努力的同時(shí)給自身帶來(lái)的潛在危害，而且價(jià)格更為低廉。因此，本項(xiàng)目大規(guī)模生產(chǎn)疏水蛋白及其應(yīng)用開(kāi)發(fā)是有非常廣闊的市場(chǎng)前景的，并且我們的技術(shù)在國(guó)際和國(guó)內(nèi)市場(chǎng)處于領(lǐng)先地位。這些產(chǎn)品都將在國(guó)際市場(chǎng)上處于最優(yōu)競(jìng)爭(zhēng)狀態(tài)。

本發(fā)明提供了一種重組抗菌黏附纖維蛋白及其制備方法和應(yīng)用。本發(fā)明根據(jù)芽孢桿菌密碼子偏好性?xún)?yōu)化合成重組抗菌黏附纖維蛋白的基因，采用多片段重組方法實(shí)現(xiàn)抗菌黏附消炎纖維蛋白的功效；本發(fā)明生產(chǎn)的重組抗菌黏附纖維蛋白可廣泛應(yīng)用于醫(yī)療領(lǐng)域的創(chuàng)傷敷料、手術(shù)止血材料、組織工程材料、醫(yī)療器械涂層，醫(yī)美領(lǐng)域的皮膚修復(fù)產(chǎn)品、注射填充材料，生物材料領(lǐng)域的細(xì)胞培養(yǎng)基、抗菌涂層，以及慢性炎癥治療、藥物載體等。本發(fā)明所述的重組抗菌黏附纖維蛋白具有可高效生產(chǎn)、低成本、產(chǎn)品純度高、生物活性好等優(yōu)點(diǎn)，滿(mǎn)足了醫(yī)療、醫(yī)美、生物材料等領(lǐng)域?qū)咕坠δ懿牧系钠惹行枨螅哂袕V闊的應(yīng)用前景和市場(chǎng)價(jià)值。

以主要的植物源性蛋白飼料原料為研究對(duì)象，針對(duì)原料的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值特性，系統(tǒng)建立抗?fàn)I養(yǎng)因子高效降解菌株的篩選方法，借鑒現(xiàn)代發(fā)酵工程的優(yōu)化理論，建立有益代謝產(chǎn)物的檢測(cè)與控制和發(fā)酵參數(shù)相關(guān)的優(yōu)化研究方法，確立規(guī)模化生產(chǎn)工藝并進(jìn)行關(guān)鍵設(shè)備的選型，制造品質(zhì)穩(wěn)定可靠的發(fā)酵蛋白飼料，并建立相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量指標(biāo)體系，為緩解我國(guó)蛋白飼料資源緊張?zhí)峁┈F(xiàn)實(shí)可行的方法，實(shí)現(xiàn)我國(guó)飼料及養(yǎng)殖工業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。 

華南理工大學(xué)任嬌艷教授團(tuán)隊(duì)研發(fā)的小分子肽類(lèi)營(yíng)養(yǎng)支持品，來(lái)源于純天然優(yōu)質(zhì)食物蛋白。與注射營(yíng)養(yǎng)制劑不同，該產(chǎn)品可通過(guò)口服途徑，安全性高且可長(zhǎng)期使用。 本項(xiàng)目旨在： 1）用于低蛋白血癥人群（如營(yíng)養(yǎng)不良、慢性感染、晚期惡性腫瘤、肝膽系統(tǒng)疾病等）迅速提升機(jī)體白蛋白含量； 2）滿(mǎn)足新冠感染患者對(duì)蛋白營(yíng)養(yǎng)制品的需求； 3）為一線(xiàn)醫(yī)護(hù)人員提供中長(zhǎng)期營(yíng)養(yǎng)干預(yù)，調(diào)節(jié)機(jī)體免疫力； 4）緩解臨床對(duì)血液類(lèi)制品需求供應(yīng)緊張的局面。目前該產(chǎn)品已完成量產(chǎn)下線(xiàn)，且于疫情期間投放多家國(guó)內(nèi)外定點(diǎn)醫(yī)院。

藍(lán)晶微生物致力于打造基于微生物的分子和材料創(chuàng)新平臺(tái)。團(tuán)隊(duì)由清華、北大青年科學(xué)家組成，顧問(wèn)團(tuán)隊(duì)包括中科院院士，中科院微生物所工業(yè)微生物研究室主任等。致力于利用合成生物學(xué)技術(shù)，提供生物活性分子。業(yè)務(wù)包括合同付費(fèi)業(yè)務(wù)（iGEM科學(xué)教育，Holog平臺(tái)），大客戶(hù)定制開(kāi)發(fā)（PHA業(yè)務(wù)線(xiàn)等）及自產(chǎn)經(jīng)營(yíng)（CBD開(kāi)發(fā)）。點(diǎn)擊上方按鈕聯(lián)系科轉(zhuǎn)云平臺(tái)進(jìn)行溝通對(duì)接！