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本成果建立了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的納豆芽孢桿菌及液體種子生產(chǎn)技術(shù)、菌種接種技術(shù)、納豆發(fā)酵技術(shù)、保藏技術(shù)等，同時(shí)完成了對(duì)產(chǎn)品功能、質(zhì)量測(cè)定的方法學(xué)研究，開發(fā)了高耐受胃腸道納豆芽孢桿菌菌劑、高品質(zhì)食用納豆、高活菌納豆凍干粉、高活性藥用納豆激酶等多種產(chǎn)品，納豆中益生活菌數(shù)量、納豆激酶活性及異黃酮等功能成分含量較國(guó)內(nèi)外相關(guān)產(chǎn)品有明顯優(yōu)勢(shì)，且納豆感官評(píng)價(jià)品質(zhì)高，生產(chǎn)成本較低，更加符合國(guó)人口味。

項(xiàng)目研究的背景及用途：本項(xiàng)目的出發(fā)點(diǎn)是將我國(guó)大量的生物質(zhì)及城市有機(jī)廢物資源(如農(nóng)作物廢棄物、林業(yè)廢棄物、城市垃圾中豐富的有機(jī)物、造紙?jiān)鞚{中的廢物、酒精生產(chǎn)廠的廢液廢渣、動(dòng)物糞便、食品加工中的廢棄物、家庭中有機(jī)垃圾、草類廢棄物，產(chǎn)量約每年 30 億噸)高效轉(zhuǎn)化為清潔的電力。我國(guó)當(dāng)前的生物質(zhì)及城市有機(jī)廢物資源沒有得到合理的利用。利用生物質(zhì)作為能源，不僅僅是解決了長(zhǎng)期的能源供給問題，更重要的是大大緩解了環(huán)境保護(hù)的壓力。本項(xiàng)目的技術(shù)路線所排放的其他污染物如硫化物、粉塵粒子的濃度也大大低于現(xiàn)有的燃煤發(fā)電廠。此外，高效、清潔的氣化發(fā)電技術(shù)可以克服現(xiàn)有的城市垃圾處理處置方式的缺點(diǎn)。與現(xiàn)有垃圾焚燒爐技術(shù)相比，本項(xiàng)目的技術(shù)路線具有以下優(yōu)點(diǎn): (1)發(fā)電效率高; (2)炭轉(zhuǎn)化率高、能量利用率高; (3)排放的二次污染物少; (4)初投資和遠(yuǎn)行費(fèi)用低。 本項(xiàng)目的目的是有效地利用生物質(zhì)及城市有機(jī)廢物，通過流化床氣化的方式將其轉(zhuǎn)變?yōu)殡娏Α４_保生產(chǎn)電力的成本可以與現(xiàn)有的燃煤電廠競(jìng)爭(zhēng)，同時(shí)確保生產(chǎn)過程符合環(huán)境友好性要求，沒有明顯的二次污染。成果水平及主要技術(shù)指標(biāo):本技術(shù)水平處于國(guó)內(nèi)領(lǐng)先水平,在國(guó)際上也是領(lǐng)先的。目前正在申報(bào)發(fā)明專利 2 項(xiàng)。所需廠房占地面積:需要穩(wěn)定的生物質(zhì)或生活垃圾原料供應(yīng)(年需要量為8000 噸左右);設(shè)備相對(duì)比較簡(jiǎn)單，但需要由相關(guān)的廠家定制生廠;廠房面積約為15000～20000 平方米;投資規(guī)模在 500 萬左右。 市場(chǎng)分析及效益預(yù)測(cè)：本項(xiàng)目的市場(chǎng)前景很大。以天津市為例，天津市每年約有 600 萬噸生物質(zhì)資源，可發(fā)出功率為 90～100 萬千瓦的電。若考慮大量種植能源作物，則可以發(fā)出更多的電，而且隨著發(fā)電規(guī)模的擴(kuò)大，可以顯著降低成本。如果單座發(fā)電廠的規(guī)模在 2000～4000 kW，該發(fā)電成本與燃煤電廠相當(dāng)。為天津市大量的生物質(zhì)廢物找到一條合理的利用途徑，同時(shí)解決了因城市有機(jī)垃圾堆置而帶來的環(huán)境污染問題。以 2000 千瓦的發(fā)電能力為例，投資回收期為 2.2 年，年盈利為 220 萬左右。

以生物基原料生產(chǎn)環(huán)境友好的化工產(chǎn)品是人類實(shí)現(xiàn)可持續(xù)發(fā)展的必由之路， 生物基涂層材料的研究已經(jīng)成為全球涂料科學(xué)技術(shù)領(lǐng)域的研究前沿。傳統(tǒng)的生物基光固化樹脂玻璃化轉(zhuǎn)變溫度偏低，力學(xué)性能較差，影響了其應(yīng)用推廣。團(tuán)隊(duì)圍繞如何制備兼顧生物基含量與綜合性能的生物基光固化樹脂開展研究，通過化學(xué)結(jié)構(gòu)的設(shè)計(jì)，在提升生物基光固化樹脂性能的同時(shí)保證了其較高的生物基含量。目前團(tuán)隊(duì)所研發(fā)的生物基光固化樹脂具有較高的生物基含量和雙鍵轉(zhuǎn)換率，其固化膜的熱穩(wěn)定性及硬度、彈性模量、抗沖擊性等性能與常用商業(yè)石油基光固化樹脂相當(dāng)，產(chǎn)業(yè)化前景廣闊。 

手性氨基酸作為最重要的原料和中間體，市場(chǎng)規(guī)模也越來越大。本項(xiàng)目研發(fā)的手性氨基酸包含 L-2-氨基丁酸、D-蘇氨酸、L-天冬酰胺、L-叔亮氨酸、L-色氨酸等。2-氨基丁酸是一種非天然的氨基酸，是一種重要的化工原料，被用作為多種手性藥物合成中的重要中間體，包括抗結(jié)核藥物乙胺丁醇、布瓦西坦和抗癲癇藥物左乙拉西坦。D-蘇氨酸是天然氨基酸 L-蘇氨酸的光學(xué)異構(gòu)體，是一種非天然氨基酸。主要應(yīng)用于手性藥物、手性添加劑和手性助劑等領(lǐng)域，在制藥行業(yè)作為手性合成的手性源，主要用于生產(chǎn)新型光譜抗生素、D-蘇氨醇和多肽合成過程的蘇氨酸保護(hù)劑。L-天冬酰胺是常見的 20 種氨基酸之一，在食品、醫(yī)藥、化工合成、微生物培養(yǎng)等領(lǐng)域廣泛應(yīng)用。L-天冬酰胺可以作為添加劑用于清涼飲料,同時(shí)在腫瘤治療及蛋白質(zhì)糖基化中扮演重要角色。L-天冬酰胺常用于氨基酸輸液，以及具有降壓、平喘、抗消化性潰瘍、胃功能障礙等功能，并可用于治療心肌梗死、心肌代謝障礙、心力衰竭、心臟傳導(dǎo)阻滯、疲勞癥等。此外，L-天冬酰胺也是微生物培養(yǎng)和動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)重要的添加劑。L-叔亮氨酸是一種非蛋白原的手性氨基酸, 由于叔丁基的空間位阻大, 叔亮氨酸的衍生物可在不對(duì)稱合成中作為誘導(dǎo)不對(duì)稱的模板。隨著不對(duì)稱合成的發(fā)展, 叔亮氨酸的應(yīng)用也非常廣泛。又由于占空間大的叔丁基鏈及其疏水性, 它在多肽的合成中能夠很好地控制分子構(gòu)象, 增加多肽的疏水性和受酶降解的穩(wěn)定性, 因此在藥物和生物應(yīng)用中正迅速地發(fā)展, 用于抗癌、抗艾滋病等藥物和生物抑制劑及肽等。

甾體激素藥物是僅次于抗生素的第二大類藥物。全球甾體類藥物總值近 500 億美元，占世界醫(yī)藥銷售額的 6%。中國(guó)是甾體藥物原料及其制劑的主要生產(chǎn)國(guó)，年產(chǎn)值近 800 億元人民幣。 本項(xiàng)目組圍繞重要甾體化合物中間體 AD、三羥基雄甾烯酮及其相關(guān)下游產(chǎn) 品，開展生物轉(zhuǎn)化關(guān)鍵技術(shù)研究與產(chǎn)業(yè)應(yīng)用研究，突破了生物催化去氫表雄酮雙 羥化制備三羥基雄甾烯酮的技術(shù)體系，創(chuàng)新了屈螺酮合成新方法。項(xiàng)目改造優(yōu)化 了微生物轉(zhuǎn)化菌種的性能，開發(fā)了新型發(fā)酵和綠色提取工藝，建立了全流程的過程工程控制技術(shù)，大幅提高了產(chǎn)品的轉(zhuǎn)化率，建成了百噸級(jí)規(guī)模的甾體化合物生產(chǎn)線。項(xiàng)目成果在 Green Chemistry、Journal of Steroid Biochemistry andMolecular Biology、Steroids 等期刊上共發(fā)表了相關(guān)文章 30 余篇，申請(qǐng)國(guó)家發(fā)明專利 28 項(xiàng)，其中授權(quán) 10 項(xiàng)。獲中國(guó)石油和化工行業(yè)協(xié)會(huì)優(yōu)秀專利獎(jiǎng) 1 項(xiàng)，全國(guó)大學(xué)生“挑戰(zhàn)杯”競(jìng)賽一等獎(jiǎng) 1 項(xiàng)。 

本項(xiàng)目旨在發(fā)掘天然植物中具有美白、抗皺、保濕、殺菌及防腐等天然活性成分，開發(fā)其提取、純化技術(shù)。 另一方面，本項(xiàng)目組與江南大學(xué)生物工程學(xué) 院合作，利用發(fā)酵法制備具有美白、抗衰老、抗皺、保濕等功效的發(fā)酵產(chǎn)物，產(chǎn)品分為直接發(fā)酵產(chǎn)物和植物發(fā)酵后的提取物。在活性成分先進(jìn)制備基礎(chǔ)上，根據(jù)美白、抗衰老、抗皺、防曬、抗污染等理論，對(duì)天然活性原料進(jìn)行協(xié)同復(fù)配，形成多靶點(diǎn)、多動(dòng)能集成功效原料組合，并建立化學(xué)方法、生物化學(xué)方法（細(xì)胞水平、動(dòng)物實(shí)驗(yàn)）到人體實(shí)驗(yàn)的完整功效評(píng)價(jià)技術(shù)平臺(tái)，打通從天然原料到實(shí)際配方應(yīng)用的通路。

精氨酸脫亞胺酶（Arginine deiminase）簡(jiǎn)稱 ADI，它能將精氨酸水解，生產(chǎn)瓜氨酸和氨，是生物體中參與尿素循環(huán)而起作用的酶。基于這個(gè)反應(yīng)機(jī)理，目前精氨酸脫亞氨酶一方面可用于功能性氨基酸 L-瓜氨酸的生物制備；另一方面可作為藥物用于癌癥諸如肝細(xì)胞癌、黑色素細(xì)胞癌、腎癌等以及一些病毒感染的 治療。 瓜氨酸是一種非蛋白質(zhì)氨基酸，具有抗衰老、增強(qiáng)免疫力、提高運(yùn)動(dòng)員力量與耐力、增加創(chuàng)傷愈合和改善微循環(huán)等功能。本項(xiàng)目通過菌種篩選獲得一株高產(chǎn)精氨酸脫亞酶的糞腸球菌菌株，通過分子改造，獲得適合人體生理?xiàng)l件的精氨酶脫亞酶，可用于醫(yī)藥；利用糞腸球菌來源的精氨酸脫亞氨酶可用于瓜氨酸的生物制備，瓜氨酸產(chǎn)量可達(dá)到 250g/L 以上，底物精氨酸的摩爾轉(zhuǎn)化率 100%。 創(chuàng)新要點(diǎn) 成功開發(fā)了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的精氨酸脫亞胺酶生產(chǎn)菌株及瓜氨酸制備工藝，達(dá)到或超過國(guó)際先進(jìn)水平。

傳統(tǒng)發(fā)酵食品加工過程中生成的胺(氨)類物質(zhì)，如氨基甲酸乙酯（EC）、生物胺類等是影響發(fā)酵食品安全的重要因素。本成果在國(guó)內(nèi)外率先進(jìn)行了微生物干預(yù)減少發(fā)酵食品中 EC 及其前體的系統(tǒng)研發(fā)。主要技術(shù)內(nèi)容包括： (1) 揭示了醬油發(fā)酵過程 EC 前體形成的微生物物質(zhì)代謝機(jī)制； (2) 采用高通量篩選方法獲得可在醬油發(fā)酵過程中顯著減少 EC 前體積累的菌株； (3) 采用非基因工程手段在工業(yè)規(guī)模將醬油中 EC 含量降至低于 20 ppb，且對(duì)醬油主要理化指標(biāo)和風(fēng)味物質(zhì)未產(chǎn)生影響。 本成果已獲授權(quán)核心發(fā)明專利 11 項(xiàng)，形成了包括利用 EC 或其前體菌株的篩 選與選育、微生物干預(yù)控制醬油中氨(胺)類有害物的專利群，發(fā)表論文 29 篇。 本技術(shù)對(duì)于解決基于混菌發(fā)酵過程的傳統(tǒng)發(fā)酵食品安全性的提升，具有普適性意 義和推廣前景；對(duì)于引領(lǐng)生物技術(shù)在傳統(tǒng)發(fā)酵食品中的應(yīng)用、提升傳統(tǒng)發(fā)酵食品生產(chǎn)企業(yè)的技術(shù)水平、實(shí)現(xiàn)傳統(tǒng)發(fā)酵食品工業(yè)產(chǎn)業(yè)升級(jí)和可持續(xù)發(fā)展，具有重大 的科學(xué)意義和工業(yè)應(yīng)用價(jià)值。 

精氨酸脫亞胺酶（Arginine deiminase）簡(jiǎn)稱 ADI，它能將精氨酸水解，生產(chǎn)瓜氨酸和氨，是生物體中參與尿素循環(huán)而起作用的酶。基于這個(gè)反應(yīng)機(jī)理，目前精氨酸脫亞氨酶一方面可用于功能性氨基酸 L-瓜氨酸的生物制備；另一方面可作為藥物用于癌癥諸如肝細(xì)胞癌、黑色素細(xì)胞癌、腎癌等以及一些病毒感染的治療。 瓜氨酸是一種非蛋白質(zhì)氨基酸，具有抗衰老、增強(qiáng)免疫力、提高運(yùn)動(dòng)員力量與耐力、增加創(chuàng)傷愈合和改善微循環(huán)等功能。 本項(xiàng)目通過菌種篩選獲得一株高產(chǎn)精氨酸脫亞酶的糞腸球菌菌株，通過分子 改造，獲得適合人體生理?xiàng)l件的精氨酶脫亞酶，可用于醫(yī)藥；利用糞腸球菌來源的精氨酸脫亞氨酶可用于瓜氨酸的生物制備，瓜氨酸產(chǎn)量可達(dá)到 250g/L 以上，底物精氨酸的摩爾轉(zhuǎn)化率 100%。 

1、項(xiàng)目簡(jiǎn)介： 本項(xiàng)目是江南大學(xué)孫秀蘭教授主持的完成的，成功扭轉(zhuǎn)了我國(guó)長(zhǎng)期以來食品 企業(yè)規(guī)模化脫毒技術(shù)和設(shè)備不足的局面，獲 2018 年度江蘇省科技進(jìn)步獎(jiǎng)一等獎(jiǎng)。 2、主要?jiǎng)?chuàng)新內(nèi)容及技術(shù)突破： 構(gòu)建了高效抑制產(chǎn)毒真菌生長(zhǎng)并降解毒素的食品級(jí)發(fā)酵菌株：針對(duì)傳統(tǒng)發(fā)酵 工藝，構(gòu)建了基于自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的降解菌株稻殼固定化技術(shù)和生物酶定向脫毒技術(shù)，實(shí)現(xiàn)毒素形成的源頭控制； 建立了毒素降解中間產(chǎn)物潛在毒性傳感評(píng)價(jià)新體系：針對(duì)消減過程中毒素毒 性效應(yīng)變化，構(gòu)建基于毒性靶點(diǎn)基因、特異性生物蛋白、代謝標(biāo)志物的細(xì)胞微流控和熒光傳感技術(shù)，實(shí)現(xiàn)毒素降解過程中產(chǎn)物潛在毒性及聯(lián)合毒性效應(yīng)的高效評(píng)價(jià)；創(chuàng)制了毒素高效去除與降解一體化技術(shù)：針對(duì)單一化學(xué)降解對(duì)組分本身的破壞，構(gòu)建高頻超聲、磁分離協(xié)同納米催化降解一體化技術(shù)，實(shí)現(xiàn)降解過程中毒素產(chǎn)物有效控制。 系統(tǒng)集成工業(yè)化生產(chǎn)脫除設(shè)備及現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè)裝置：集成產(chǎn)毒基因莖環(huán)探針、離 子液體介導(dǎo)及端面場(chǎng)效應(yīng)增強(qiáng)材料，建成工業(yè)化“超聲+臭氧”毒素穩(wěn)定去除裝置，形成主動(dòng)干預(yù)調(diào)控技術(shù)策略，實(shí)現(xiàn)了產(chǎn)業(yè)化推廣應(yīng)用。