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本項目是采用種子蛋白質(zhì)基因工程手段，將富含賴氨酸的豌豆球蛋白基因（Vicilingene）轉(zhuǎn)入超大穗小麥體內(nèi)并令其表達，以期大幅度提高超大穗小麥的種子蛋白質(zhì)含量和賴氨酸含量，改良超大穗小麥的營養(yǎng)品質(zhì)和加工品質(zhì)，使超大穗小麥盡快成為大面積推廣種植的超高產(chǎn)優(yōu)質(zhì)小麥良種。其次，本項研究將豐富分子遺傳學理論并開辟一條高蛋白品質(zhì)育種的新途徑，所

Mpa六聚體除了與真核生物蛋白酶體調(diào)節(jié)顆粒Rpt1-Rpt6蛋白六聚體以及古細菌PAN蛋白六聚體具有一定的結(jié)構(gòu)同源性之外，還具有一些明顯不同的結(jié)構(gòu)特征：（1）結(jié)核桿菌Mpa具有形成雙環(huán)的兩個串聯(lián)寡核苷酸/寡糖結(jié)合（OB）結(jié)構(gòu)域，而古細菌蛋白酶體相關ATPase調(diào)控顆粒（PAN）和真核生物蛋白酶體ATPase調(diào)控顆粒復合體（Rpt1-6）每個蛋白亞基都只具有單個OB結(jié)構(gòu)域；（2）Mpa在具有蛋白酶體活化功能的C末端之前具有一個泛素樣的β-grasp結(jié)構(gòu)域，而古細菌PAN和真核生物Rpt1-6蛋白復合體并不具有這樣的一個β-grasp結(jié)構(gòu)域? 由于β-grasp結(jié)構(gòu)域的存在，Mpa六聚體中各個蛋白亞基C末端被埋在結(jié)構(gòu)核心中而沒有暴露在蛋白復合體結(jié)構(gòu)的表面，這就影響了C末端的GQYL基序與20S 蛋白酶體復合體的對接，從而阻礙了六聚化的Mpa與七次對稱的28聚體的蛋白酶體相互作用。我們通過功能研究進一步解釋了為什么單獨的Mpa六聚體在體外情況下不能有效結(jié)合蛋白酶體核心顆粒并啟動蛋白質(zhì)特異性降解，結(jié)合晶體結(jié)構(gòu)域功能研究，我們提出了結(jié)核桿菌蛋白酶體ATPase調(diào)控顆粒Mpa與20S蛋白酶體復合體這一分子量超過1100KDa蛋白質(zhì)機器的作用模型

1.痛點問題 自身免疫系統(tǒng)疾病是困擾人類的一大類疾病，醫(yī)學界對其中很多種疾病的具體發(fā)病原因還所知甚少。目前的治療手段和方法也極其有限，幾乎沒有任何真正的靶向藥物和能夠根治的療法，其治療難度和患者痛苦程度都不亞于癌癥。 IRAK4是固有免疫系統(tǒng)上IL-1家族和TLR家族這兩大信號通路交匯的最重要的節(jié)點。IRAK4和MyD88通過形成復合物來開啟下游各種與免疫反應或細胞生長相關的基因表達。IRAK4與其他激酶不同，它既是下游信號分子的激酶，又同時起到形成復合物所必需的支架蛋白的作用。雖然，現(xiàn)有技術已有眾多IRAK4小分子激酶抑制劑，但它們僅可以抑制激酶本身的活性，顯示出中等的效力，無法破壞復合物的形成來徹底阻斷炎癥反應信號的產(chǎn)生。而PROTAC技術可通過降解靶蛋白同時阻斷IRAK4激酶活性和破壞靶蛋白支架功能，相對于常規(guī)的激酶抑制劑產(chǎn)生更好的抑制炎癥反應效果。 2.解決方案 本項成果涉及一類可以降解IRAK4蛋白的小分子降解劑，可以同時消除IRAK4蛋白的激酶功能和支架蛋白功能。相較于小分子抑制劑，該類小分子降解劑有更強的抑制炎癥反應的效果。有望用于開發(fā)新型、高效、新機制的抗炎小分子藥物，同時拓展該類分子在癌癥治療中的作用。 PROTAC是一種具有雙功能的雜合小分子，通過合適的連接鏈將靶蛋白配體與E3泛素連接酶配體連接，促使目的蛋白（POI）與E3連接酶形成三元復合物，從而使靶蛋白接近泛素化系統(tǒng)，實現(xiàn)靶蛋白的泛素化，隨后被蛋白酶體的26S亞基識別，最終導致靶蛋白降解。 合作需求 項目合作開發(fā)、落地空間、研發(fā)團隊或第三方資金投入。

本發(fā)明涉及一種消除發(fā)酵豆粕中β?伴大豆球蛋白的方法。該方法包括如下步驟：(1)調(diào)節(jié)豆粕的含水量在20％～25％(重量比)；(2)用110℃～125℃的蒸汽處理步驟(1)得到的豆粕，出料、冷卻；(3)對步驟(2)得到的豆粕接種酵母菌和屎腸球菌，調(diào)節(jié)接種物料的含水量在38％～42％(重量比)；(4)對步驟(3)得到的豆粕進行厭氧發(fā)酵。本發(fā)明能夠顯著地降低

本發(fā)明成功將 EAMM 蛋白和抗原 HspX 在基因水平進行融合構(gòu) 建了新的融合蛋白 EAMMH，并將該不帶標簽的融合蛋白成功進行表 達和純化。EAMMH 融合蛋白以可溶形式表達，明顯改善了 EAMM 以包涵體進行表達的狀況。此外，EAMMH 蛋白融合了結(jié)核分枝桿菌 主要的生長期抗原和休眠期抗原，并可誘導較強的針對各期抗原的特 異性細胞免疫和體液免疫應答。小鼠結(jié)核分枝桿菌氣霧攻擊模型證 明，該新的融合蛋白疫苗具

現(xiàn)有伴隨診斷主要是基因檢測，而基因突變并不等于蛋白質(zhì)表達，更不意味著靶點激活。本項目基于蛋白組學，特異性捕獲磷酸化酪氨酸激酶（最主要靶點），直接檢測靶點激活狀態(tài)，極低成本為腫瘤用藥提供最精準指導。

本發(fā)明涉及一種新型的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細胞水平篩選系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應用。所述篩選系統(tǒng)由HEK293細胞或CHO細胞構(gòu)建，含有來自以下序列中不同組間基因序列構(gòu)建的2種融合表達載體：第1組：(1)DnaE基因的C端與報告基因的C端的拼接序列：DnaE-C-Report-C，(2)DnaE基因的N端與報告基因的N端的拼接序列：Report-N-DnaE-N；第2組：①GPCR基因，②β-arrestin基因。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：應用本發(fā)明篩選系統(tǒng)進行G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細胞水平篩選，靈敏度高、特異性強，操作簡單、快速，檢測范圍廣，對任何靶細胞型中任何GPCR或GPCR信號轉(zhuǎn)導途徑的激動劑、拮抗劑都可以篩選。

本發(fā)明成功將EAMM蛋白和抗原HspX在基因水平進行融合構(gòu)建了新的融合蛋白EAMMH，并將該不帶標簽的融合蛋白成功進行表達和純化。EAMMH融合蛋白以可溶形式表達，明顯改善了EAMM以包涵體進行表達的狀況。此外，EAMMH蛋白融合了結(jié)核分枝桿菌主要的生長期抗原和休眠期抗原，并可誘導較強的針對各期抗原的特異性細胞免疫和體液免疫應答。

真菌疏水蛋白具有自我裝配成膜的性質(zhì)，因此 （1）疏水蛋白可作為蛋白和細胞固定化的媒介，可用于生物傳感器和生物芯片，作為引發(fā)層，交聯(lián)上配體或形成融合蛋白，能使特定分子固定化到特定表面。 （2）它能改變表面的屬性，保護表面。可用于提高醫(yī)學器官移植物生物相容性和防止微生物細胞粘附；可應用于醫(yī)藥行業(yè)中燒傷、創(chuàng)傷的創(chuàng)面保護，為臨床病人創(chuàng)面保護和恢復提供一種安全無毒、操作簡便、高效低耗的新手段。 （3）作為一種生物表面活性劑，疏水蛋白還可以用于促進土壤中的污染物的降解和應用在石油泄漏后回收石油的過程中。 （4）疏水蛋白具有表面活性，可用于食品對抗相變能力并形成穩(wěn)定泡沫，使其在密封食品生產(chǎn)上發(fā)揮重要作用； （5）也可用于日用化妝品生產(chǎn)中，因疏水蛋白可以作為洗潔產(chǎn)品的成分，根據(jù)其疏水、親水兩相間的轉(zhuǎn)變，可通過自我裝配而將面部的油脂等疏水的成分包裹起來，再用水清洗將其除去，也可以作為保護秀發(fā)的天然膜，使發(fā)部維持清潔并保持一定水分；將它運用到面部的美容護理，由于它的特性，能使皮膚表面形成一層天然生物活性保護膜，起到皮膚保濕、免受外界空氣中污濁物的侵害，從而達到護膚美容之功效。 （6）疏水蛋白直接包裹藥物以改變藥物溶解性并實現(xiàn)控、緩釋。通過真菌疏水蛋白與難溶于水的藥物混合，可以達到良好的分散效果，并延長了兩種藥物的藥效持續(xù)時間。 （7）真菌疏水蛋白與其他的功能性蛋白或小肽組成融合蛋白，同時發(fā)揮疏水蛋白的穩(wěn)定吸附材料表面的特性和功能性蛋白或小肽的特異性功能，如在組織工程、抗炎抗菌材料等。 項目特色： 純天然生物制品，無毒害，無污染。耐酸堿，抗相變能力強。自我裝配形成有活性的蛋白膜。具有良好的熱穩(wěn)定性和透氣不透水性。由于它的特性，使得它具有：（1）自動成膜，無需貼敷，使用便利；（2）透氣性優(yōu)良；(3)純天然無化學添加成分，瑞氏木霉已被證明是安全的菌種；（4）組織相容性好，避免了嚴重的排異反應；（5）耐高溫（100 攝氏度仍保持活性），易于消毒；（6）穩(wěn)定不降解，便于產(chǎn)品的長期保存；（7）用表面活性劑就可以很容易地清洗（8）延展性好，1 毫克的疏水蛋白在液面就可以展開 1 平方米的薄膜（9）透明，可直接透過成膜觀察（10）性價比高。 市場應用前景： 目前國際上尚未實現(xiàn)疏水蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)，其相關應用產(chǎn)品的開發(fā)更為滯后。我們在已實現(xiàn)疏水蛋白中試研發(fā)的基礎上，擴大發(fā)酵規(guī)模，進行后續(xù)產(chǎn)品的開發(fā)，我們的技術和工藝現(xiàn)居國際領先地位，無疑會占有寶貴的先機。 疏水蛋白產(chǎn)品將作為新一代膜生物活性材料進入市場，它的出現(xiàn)將會革命性地取代現(xiàn)有化學產(chǎn)品，這無疑給人類的健康帶來了很大的益處，消除人類在預防和治療疾病、食品加工、以及醫(yī)學檢測、食物保鮮方面為健康做出努力的同時給自身帶來的潛在危害，而且價格更為低廉。因此，本項目大規(guī)模生產(chǎn)疏水蛋白及其應用開發(fā)是有非常廣闊的市場前景的，并且我們的技術在國際和國內(nèi)市場處于領先地位。這些產(chǎn)品都將在國際市場上處于最優(yōu)競爭狀態(tài)。

本發(fā)明提供了一種重組抗菌黏附纖維蛋白及其制備方法和應用。本發(fā)明根據(jù)芽孢桿菌密碼子偏好性優(yōu)化合成重組抗菌黏附纖維蛋白的基因，采用多片段重組方法實現(xiàn)抗菌黏附消炎纖維蛋白的功效；本發(fā)明生產(chǎn)的重組抗菌黏附纖維蛋白可廣泛應用于醫(yī)療領域的創(chuàng)傷敷料、手術止血材料、組織工程材料、醫(yī)療器械涂層，醫(yī)美領域的皮膚修復產(chǎn)品、注射填充材料，生物材料領域的細胞培養(yǎng)基、抗菌涂層，以及慢性炎癥治療、藥物載體等。本發(fā)明所述的重組抗菌黏附纖維蛋白具有可高效生產(chǎn)、低成本、產(chǎn)品純度高、生物活性好等優(yōu)點，滿足了醫(yī)療、醫(yī)美、生物材料等領域?qū)咕坠δ懿牧系钠惹行枨螅哂袕V闊的應用前景和市場價值。