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項(xiàng)目成果/簡介:長牡蠣“海大1號(hào)”是我國培育的第一個(gè)牡蠣新品種，填補(bǔ)了我國牡蠣良種培育的空白。中國海洋大學(xué)自2006年在國內(nèi)率先開始了長牡蠣快速生長系的選擇育種，以山東乳山海區(qū)自然采苗養(yǎng)殖的長牡蠣為基礎(chǔ)群體，基于群體選育、輔以分子標(biāo)記輔助育種，采用有效繁殖親本數(shù)量控制、選育群體世代遺傳參數(shù)與選擇效應(yīng)評(píng)估以及選育世代遺傳多樣性監(jiān)測(cè)等多項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，通過連續(xù)6代成功培育出長牡蠣“海大1號(hào)”新品種。該新品種具有生長速度快、殼型規(guī)則等特性，目前在山東、遼寧、江蘇等地養(yǎng)殖面積超過20萬畝，取得了顯著的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益，有力推動(dòng)了我國牡蠣養(yǎng)殖業(yè)的良種化進(jìn)程。長牡蠣“海大2號(hào)” 新品種是中國海洋大學(xué)繼培育我國第一個(gè)生長性狀優(yōu)良的長牡蠣“海大1號(hào)”新品種的基礎(chǔ)上培育的長牡蠣第二個(gè)新品種。長牡蠣“海大2號(hào)” 新品種是以金黃殼色和生長速度作為選育目標(biāo)性狀，采用家系選育和群體選育相結(jié)合的混合選育技術(shù)，輔以分子標(biāo)記輔助育種，經(jīng)過4代培育而成。該新品種體重和出肉率可分別提高38%和25%以上，左右殼和外套膜均為色澤亮麗的金黃色（養(yǎng)殖戶喜稱“金牡蠣”“金蠔”），在北方沿海進(jìn)行了示范養(yǎng)殖，深受育苗企業(yè)和廣大養(yǎng)殖戶的喜愛，大大提高了我國養(yǎng)殖牡蠣的品質(zhì)和檔次。長牡蠣“海大3號(hào)”新品種是以2010年從山東沿海長牡蠣野生群體中篩選出的左殼為黑色的個(gè)體為基礎(chǔ)群體，以殼黑色和生長速度為目標(biāo)性狀，采用家系選育和群體選育相結(jié)合的混合選育技術(shù)，經(jīng)連續(xù)6代選育而成。在相同養(yǎng)殖條件下，與未經(jīng)選育的長牡蠣相比，10月齡貝殼高平均提高9%，軟體部重平均提高64.5%，左右殼和外套膜均為黑色，黑色性狀比例達(dá)100%。適宜在山東和遼寧人工可控的海水水體中養(yǎng)殖。項(xiàng)目階段:工業(yè)化生產(chǎn)階段效益分析:牡蠣是世界上養(yǎng)殖產(chǎn)量最大的海水養(yǎng)殖種類，世界年產(chǎn)量為400多萬噸，產(chǎn)值近40億美元，也是消費(fèi)量最多的貝類產(chǎn)品。我國是牡蠣的故鄉(xiāng)，牡蠣居我國四大經(jīng)濟(jì)貝類之首，年產(chǎn)量480多萬噸，占世界牡蠣產(chǎn)量的4/5。我國牡蠣產(chǎn)量雖然很大，但產(chǎn)值僅占世界的1/4左右。在我國牡蠣價(jià)格僅為2-4元/kg，而在美國和歐盟國家的牡蠣價(jià)格卻高達(dá)1~2 美元/個(gè)。雖然國外牡蠣價(jià)格昂貴，但我國每年卻要從美國、澳大利亞等國家進(jìn)口大量的牡蠣，來滿足各大城市高檔市場(chǎng)的需求。長牡蠣“海大1號(hào)”、“海大2號(hào)”和“海大3號(hào)”新品種品質(zhì)優(yōu)良，可作為進(jìn)口牡蠣的替代產(chǎn)品，具有廣闊的市場(chǎng)前景。預(yù)期投資500萬元，養(yǎng)殖規(guī)模2000畝，產(chǎn)值2000~3000萬元。知識(shí)產(chǎn)權(quán)類型:發(fā)明專利 、 軟件著作權(quán)知識(shí)產(chǎn)權(quán)編號(hào):GS-01-005-2013 GS-01-007-2016 ZL201410120162.9 GS-01-007-2018技術(shù)成熟度:通過中試技術(shù)先進(jìn)程度:達(dá)到國內(nèi)領(lǐng)先水平成果獲得方式:獨(dú)立研究獲得政府支持情況:無

長牡蠣“海大1號(hào)”是我國培育的第一個(gè)牡蠣新品種，填補(bǔ)了我國牡蠣良種培育的空白。中國海洋大學(xué)自2006年在國內(nèi)率先開始了長牡蠣快速生長系的選擇育種，以山東乳山海區(qū)自然采苗養(yǎng)殖的長牡蠣為基礎(chǔ)群體，基于群體選育、輔以分子標(biāo)記輔助育種，采用有效繁殖親本數(shù)量控制、選育群體世代遺傳參數(shù)與選擇效應(yīng)評(píng)估以及選育世代遺傳多樣性監(jiān)測(cè)等多項(xiàng)關(guān)鍵技術(shù)，通過連續(xù)6代成功培育出長牡蠣“海大1號(hào)”新品種。該新品種具有生長速度快、殼型規(guī)則等特性，目前在山東、遼寧、江蘇等地養(yǎng)殖面積超過20萬畝，取得了顯著的經(jīng)濟(jì)和社會(huì)效益，有力推動(dòng)了我國牡蠣養(yǎng)殖業(yè)的良種化進(jìn)程。 長牡蠣“海大2號(hào)” 新品種是中國海洋大學(xué)繼培育我國第一個(gè)生長性狀優(yōu)良的長牡蠣“海大1號(hào)”新品種的基礎(chǔ)上培育的長牡蠣第二個(gè)新品種。長牡蠣“海大2號(hào)” 新品種是以金黃殼色和生長速度作為選育目標(biāo)性狀，采用家系選育和群體選育相結(jié)合的混合選育技術(shù)，輔以分子標(biāo)記輔助育種，經(jīng)過4代培育而成。該新品種體重和出肉率可分別提高38%和25%以上，左右殼和外套膜均為色澤亮麗的金黃色（養(yǎng)殖戶喜稱“金牡蠣”“金蠔”），在北方沿海進(jìn)行了示范養(yǎng)殖，深受育苗企業(yè)和廣大養(yǎng)殖戶的喜愛，大大提高了我國養(yǎng)殖牡蠣的品質(zhì)和檔次。 長牡蠣“海大3號(hào)”新品種是以2010年從山東沿海長牡蠣野生群體中篩選出的左殼為黑色的個(gè)體為基礎(chǔ)群體，以殼黑色和生長速度為目標(biāo)性狀，采用家系選育和群體選育相結(jié)合的混合選育技術(shù)，經(jīng)連續(xù)6代選育而成。在相同養(yǎng)殖條件下，與未經(jīng)選育的長牡蠣相比，10月齡貝殼高平均提高9%，軟體部重平均提高64.5%，左右殼和外套膜均為黑色，黑色性狀比例達(dá)100%。適宜在山東和遼寧人工可控的海水水體中養(yǎng)殖。

癌癥已成為公眾健康的重大殺手，每年因癌癥死亡的人數(shù)接近1000萬，傳統(tǒng)的放療、化療由于過高的毒副作用，外科手術(shù)部位有限而難以有效治療，靶向藥物的發(fā)展極大推動(dòng)了腫瘤治療，然而也存在易產(chǎn)生耐藥性等問題。免疫療法作為新興的腫瘤治療策略，具有精準(zhǔn)打擊、低毒副作用、不易產(chǎn)生耐藥等優(yōu)點(diǎn)逐步受到關(guān)注，其中溶瘤病毒能夠選擇性在腫瘤細(xì)胞中復(fù)制而不破壞正常細(xì)胞，因而具有很大的應(yīng)用前景（詳細(xì)內(nèi)容見前期推送科普系列——溶瘤病毒腫瘤治療）。目前許多溶瘤病毒以實(shí)體瘤為治療靶標(biāo)，而應(yīng)用于血液腫瘤的成功案例卻很少。近日，吉林大學(xué)生命科學(xué)學(xué)院于湘暉課題組在國內(nèi)主辦的SCI雜志Signal Transduction and Targeted Therapy上在線發(fā)文，題為“Enhancing the antitumor activity of an engineered TRAIL-coated oncolytic adenovirus for treating acute myeloid leukemia”，該研究構(gòu)建了表達(dá)TRAIL融合蛋白的溶瘤腺病毒，與人參皂苷Rh2聯(lián)用，實(shí)現(xiàn)選擇性殺傷血液腫瘤，為白血病的治療提供了新思路。急性髓系白血病（AML）是髓系造血干細(xì)胞或祖細(xì)胞的惡性病變，原始細(xì)胞異常增生、分化。盡管一線治療、鞏固化療的方案能夠完全緩解許多患者病癥，但是仍有部分患者無明顯療效，還有一些患者存在復(fù)發(fā)情況，亟需新的治療方式。之前的研究中，研究者曾構(gòu)建了表面展示腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體（TRAIL）的腺病毒，能夠結(jié)合腫瘤表面死亡受體DR4和DR5，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，減弱病毒肝臟趨向性。為了更好評(píng)估病毒載體的感染與復(fù)制造成的影響，研究者通過流式細(xì)胞儀分析了病灶內(nèi)分離的AML細(xì)胞上的TRAIL受體（死亡受體DR4/5、誘餌受體DcR1/2）和腺病毒受體（CAR、整合素 αvβ3 和整合素αvβ5），發(fā)現(xiàn)多數(shù)表達(dá)中等水平TRAIL受體，培養(yǎng)細(xì)胞系也有類似現(xiàn)象，而正常粒細(xì)胞、T細(xì)胞這兩類受體表達(dá)很低，因此選擇TRAIL表面展示腺病毒能夠較好進(jìn)行靶向治療。研究者為構(gòu)建溶瘤腺病毒，通過將腺病毒A3衣殼蛋白IX插入“拉鏈結(jié)構(gòu)”，使得TRAIL能夠與“拉鏈結(jié)構(gòu)”偶聯(lián)展示在衣殼蛋白表面。由于只有約17%的衣殼蛋白連接上了TRAIL，研究者試圖采用新的策略：在大腸桿菌中表達(dá)可溶性TRAIL-“拉鏈結(jié)構(gòu)”融合蛋白，再將可溶性的蛋白與病毒粒子孵育，離心后分離表面覆蓋可溶性TRAIL的腺病毒粒子。通過變性凝膠電泳、高效液相色譜、斑點(diǎn)雜交等證實(shí)了改造的腺病毒zA4載有活性更高的TRAIL。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)也證明zA4相較于原來的版本A3、A4侵染能力、特異性顯著提高。細(xì)胞結(jié)合試驗(yàn)用于評(píng)估侵染活性，證明了攜帶TRAIL顯著促進(jìn)了腺病毒的內(nèi)吞；定量PCR試驗(yàn)用于評(píng)估病毒復(fù)制能力，zA4在癌細(xì)胞中復(fù)制顯著強(qiáng)于其他載體。為有效評(píng)估zA4載體抗白血病活性，在不同感染復(fù)數(shù)下以不同載體侵染培養(yǎng)AML細(xì)胞系，結(jié)果發(fā)現(xiàn)zA4顯著誘導(dǎo)培養(yǎng)細(xì)胞的凋亡。對(duì)臨床分離原代AML細(xì)胞深入探究，zA4顯著抑制了大部分AML細(xì)胞的增殖，然而值得注意的是，少部分不表達(dá)死亡受體的細(xì)胞無明顯變化。溶瘤病毒能否在體內(nèi)發(fā)揮作用直接決定了其是否具有臨床價(jià)值，基于之前的細(xì)胞實(shí)驗(yàn)，研究者對(duì)皮下移植造模小鼠注射了腺病毒載體，發(fā)光成像和病毒基因組分析均證實(shí)了載體腫瘤組織靶向性。zA4處理小鼠顯著抑制腫瘤生長，正常器官組織形態(tài)學(xué)、生化特征均未變化，因此未產(chǎn)生肝損傷。同時(shí)還觀察到凋亡重要因子caspase-3水平顯著上調(diào)。在更加真實(shí)的小鼠白血病模型中，也觀察到相似的結(jié)果，病毒在腫瘤消失后也并不會(huì)長時(shí)間存在。然而總有一些原代AML細(xì)胞TRAIL表達(dá)量很低，影響zA4的效果。聯(lián)系之前的研究，人參皂苷Rh2能夠誘導(dǎo)白血病細(xì)胞死亡受體表達(dá)和細(xì)胞毒性，研究者就試圖通過Rh2增強(qiáng)TRAIL誘導(dǎo)的細(xì)胞死亡。通過IC50測(cè)定、信號(hào)通路分析證實(shí)了存在協(xié)同效應(yīng)，在細(xì)胞、小鼠水平上都得到了證實(shí)，兩者聯(lián)合使用促進(jìn)白血病腫瘤的凋亡。該研究通過優(yōu)化載體結(jié)構(gòu)、聯(lián)合用藥等方式增強(qiáng)了溶瘤腺病毒的活性，拓寬了溶瘤病毒的潛在適應(yīng)癥范圍，后續(xù)深入的分子機(jī)制探究以及療效的評(píng)估將有助于為白血病治療開辟新的道路。

項(xiàng)目背景：老年癡呆癥（AD）患者海馬和新皮質(zhì)的乙酰膽堿 (acetylcholine，Ach)和膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)顯著減少，Ach 由 ChAT 合成，皮質(zhì)膽堿能神經(jīng)元遞質(zhì)功能紊亂被認(rèn)為是記憶障 礙及其他認(rèn)知功能障礙的原因之一。Meynert 基底核是新皮質(zhì)膽 堿能纖維的主要來源，AD 早期此區(qū)膽堿能神經(jīng)元減少，是 AD 早 期損害的主要部位，出現(xiàn)明顯持續(xù)的 Ach 合成不足;ChAT 減少也 與癡呆的嚴(yán)重性、老年斑數(shù)量增多及杏仁核和腦皮質(zhì)神經(jīng)原纖維 纏結(jié)的數(shù)量有關(guān)。但對(duì)此觀點(diǎn)尚有爭議。AD 患者腦內(nèi)毒蕈堿 M2 受體和煙堿受體顯著減少，M1 受體數(shù)相對(duì)保留，但功能不全， 與 G 蛋白第二信使系統(tǒng)結(jié)合減少;此外，也累及非膽堿能遞質(zhì)， 如 5-羥色胺(serotonin，5-HT)、γ-氨基丁酸(GABA)減少 50%， 生長抑素(somatostatin)、去甲腎上腺素(norepinephrine)及 5-HT 受體、谷氨酸受體、生長抑素受體均減少，但這些改變?yōu)?原發(fā)或繼發(fā)于神經(jīng)元減少尚未確定。給予乙酰膽堿前體如膽堿或 卵磷脂和降解抑制劑毒扁豆堿，或毒蕈堿拮抗藥直接作用于突觸 后受體，并未見改善。 所需技術(shù)需求簡要描述：1.研發(fā)一種能補(bǔ)充后改善神經(jīng)遞質(zhì) 代謝的藥物，延緩老年癡呆病。2.開展動(dòng)物實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證以上 理論和藥物。  對(duì)技術(shù)提供方的要求:團(tuán)隊(duì)在老年癡呆癥領(lǐng)域有較強(qiáng)研究基 礎(chǔ)，能協(xié)助企業(yè)確認(rèn)發(fā)病原理，并聯(lián)合研發(fā)改善神經(jīng)遞質(zhì)代謝藥 物。 

血吸蟲病至今仍是嚴(yán)重危害人類身體健康的一種重要人獸共患寄生蟲病。由218 于缺乏有效的預(yù)防血吸蟲感染的疫苗，治療手段局限于德國的怡黙克與拜耳藥廠 在 20 世紀(jì) 70 年代合作研發(fā)的廣譜抗蠕蟲藥吡喹酮。由于大規(guī)模使用，已經(jīng)出現(xiàn) 吡喹酮耐藥株流行的情況，給全世界的血吸蟲病防治帶來嚴(yán)重的困難與挑戰(zhàn)。 癸氧喹酯由英國 May—Baker 公司在 20 世紀(jì) 60 年代研制成功，主要作用是 阻礙球蟲子孢子的發(fā)育,預(yù)防雞的變位、柔嫩、巨型、堆型、毒害和布氏艾耳美 球蟲等引起的球蟲病。該藥物存在毒性低、治療效果好等顯著特點(diǎn)，是全球唯一 被日本、歐盟、美國、中國等國家和地區(qū)批準(zhǔn)使用的化學(xué)合成抗球蟲藥。 本項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)研究發(fā)現(xiàn)一個(gè)癸氧喹酯衍生物 DQ1 具有較好的體外抗日本血吸 蟲活性，在 10 μM 下，72 小時(shí)后，100%的血吸蟲死亡，顯示出較好的血吸蟲病 治療前景，可以作為新型的抗血吸蟲病獸藥，獲得國家專利授權(quán)一項(xiàng) （ZL201510889423.8），發(fā)表研究論文一篇（Chinese Chemical Letters.2017,28, 1547–1552）。