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本發(fā)明成功將 EAMM 蛋白和抗原 HspX 在基因水平進行融合構(gòu) 建了新的融合蛋白 EAMMH，并將該不帶標簽的融合蛋白成功進行表 達和純化。EAMMH 融合蛋白以可溶形式表達，明顯改善了 EAMM 以包涵體進行表達的狀況。此外，EAMMH 蛋白融合了結(jié)核分枝桿菌 主要的生長期抗原和休眠期抗原，并可誘導較強的針對各期抗原的特 異性細胞免疫和體液免疫應答。小鼠結(jié)核分枝桿菌氣霧攻擊模型證 明，該新的融合蛋白疫苗具

現(xiàn)有伴隨診斷主要是基因檢測，而基因突變并不等于蛋白質(zhì)表達，更不意味著靶點激活。本項目基于蛋白組學，特異性捕獲磷酸化酪氨酸激酶（最主要靶點），直接檢測靶點激活狀態(tài)，極低成本為腫瘤用藥提供最精準指導。

本發(fā)明涉及一種新型的G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細胞水平篩選系統(tǒng)及其構(gòu)建方法與應用。所述篩選系統(tǒng)由HEK293細胞或CHO細胞構(gòu)建，含有來自以下序列中不同組間基因序列構(gòu)建的2種融合表達載體：第1組：(1)DnaE基因的C端與報告基因的C端的拼接序列：DnaE-C-Report-C，(2)DnaE基因的N端與報告基因的N端的拼接序列：Report-N-DnaE-N；第2組：①GPCR基因，②β-arrestin基因。本發(fā)明的有益效果主要體現(xiàn)在：應用本發(fā)明篩選系統(tǒng)進行G蛋白偶聯(lián)受體(GPCR)細胞水平篩選，靈敏度高、特異性強，操作簡單、快速，檢測范圍廣，對任何靶細胞型中任何GPCR或GPCR信號轉(zhuǎn)導途徑的激動劑、拮抗劑都可以篩選。

本發(fā)明成功將EAMM蛋白和抗原HspX在基因水平進行融合構(gòu)建了新的融合蛋白EAMMH，并將該不帶標簽的融合蛋白成功進行表達和純化。EAMMH融合蛋白以可溶形式表達，明顯改善了EAMM以包涵體進行表達的狀況。此外，EAMMH蛋白融合了結(jié)核分枝桿菌主要的生長期抗原和休眠期抗原，并可誘導較強的針對各期抗原的特異性細胞免疫和體液免疫應答。

真菌疏水蛋白具有自我裝配成膜的性質(zhì)，因此 （1）疏水蛋白可作為蛋白和細胞固定化的媒介，可用于生物傳感器和生物芯片，作為引發(fā)層，交聯(lián)上配體或形成融合蛋白，能使特定分子固定化到特定表面。 （2）它能改變表面的屬性，保護表面。可用于提高醫(yī)學器官移植物生物相容性和防止微生物細胞粘附；可應用于醫(yī)藥行業(yè)中燒傷、創(chuàng)傷的創(chuàng)面保護，為臨床病人創(chuàng)面保護和恢復提供一種安全無毒、操作簡便、高效低耗的新手段。 （3）作為一種生物表面活性劑，疏水蛋白還可以用于促進土壤中的污染物的降解和應用在石油泄漏后回收石油的過程中。 （4）疏水蛋白具有表面活性，可用于食品對抗相變能力并形成穩(wěn)定泡沫，使其在密封食品生產(chǎn)上發(fā)揮重要作用； （5）也可用于日用化妝品生產(chǎn)中，因疏水蛋白可以作為洗潔產(chǎn)品的成分，根據(jù)其疏水、親水兩相間的轉(zhuǎn)變，可通過自我裝配而將面部的油脂等疏水的成分包裹起來，再用水清洗將其除去，也可以作為保護秀發(fā)的天然膜，使發(fā)部維持清潔并保持一定水分；將它運用到面部的美容護理，由于它的特性，能使皮膚表面形成一層天然生物活性保護膜，起到皮膚保濕、免受外界空氣中污濁物的侵害，從而達到護膚美容之功效。 （6）疏水蛋白直接包裹藥物以改變藥物溶解性并實現(xiàn)控、緩釋。通過真菌疏水蛋白與難溶于水的藥物混合，可以達到良好的分散效果，并延長了兩種藥物的藥效持續(xù)時間。 （7）真菌疏水蛋白與其他的功能性蛋白或小肽組成融合蛋白，同時發(fā)揮疏水蛋白的穩(wěn)定吸附材料表面的特性和功能性蛋白或小肽的特異性功能，如在組織工程、抗炎抗菌材料等。 項目特色： 純天然生物制品，無毒害，無污染。耐酸堿，抗相變能力強。自我裝配形成有活性的蛋白膜。具有良好的熱穩(wěn)定性和透氣不透水性。由于它的特性，使得它具有：（1）自動成膜，無需貼敷，使用便利；（2）透氣性優(yōu)良；(3)純天然無化學添加成分，瑞氏木霉已被證明是安全的菌種；（4）組織相容性好，避免了嚴重的排異反應；（5）耐高溫（100 攝氏度仍保持活性），易于消毒；（6）穩(wěn)定不降解，便于產(chǎn)品的長期保存；（7）用表面活性劑就可以很容易地清洗（8）延展性好，1 毫克的疏水蛋白在液面就可以展開 1 平方米的薄膜（9）透明，可直接透過成膜觀察（10）性價比高。 市場應用前景： 目前國際上尚未實現(xiàn)疏水蛋白的工業(yè)化生產(chǎn)，其相關(guān)應用產(chǎn)品的開發(fā)更為滯后。我們在已實現(xiàn)疏水蛋白中試研發(fā)的基礎上，擴大發(fā)酵規(guī)模，進行后續(xù)產(chǎn)品的開發(fā)，我們的技術(shù)和工藝現(xiàn)居國際領(lǐng)先地位，無疑會占有寶貴的先機。 疏水蛋白產(chǎn)品將作為新一代膜生物活性材料進入市場，它的出現(xiàn)將會革命性地取代現(xiàn)有化學產(chǎn)品，這無疑給人類的健康帶來了很大的益處，消除人類在預防和治療疾病、食品加工、以及醫(yī)學檢測、食物保鮮方面為健康做出努力的同時給自身帶來的潛在危害，而且價格更為低廉。因此，本項目大規(guī)模生產(chǎn)疏水蛋白及其應用開發(fā)是有非常廣闊的市場前景的，并且我們的技術(shù)在國際和國內(nèi)市場處于領(lǐng)先地位。這些產(chǎn)品都將在國際市場上處于最優(yōu)競爭狀態(tài)。

本發(fā)明提供了一種重組抗菌黏附纖維蛋白及其制備方法和應用。本發(fā)明根據(jù)芽孢桿菌密碼子偏好性優(yōu)化合成重組抗菌黏附纖維蛋白的基因，采用多片段重組方法實現(xiàn)抗菌黏附消炎纖維蛋白的功效；本發(fā)明生產(chǎn)的重組抗菌黏附纖維蛋白可廣泛應用于醫(yī)療領(lǐng)域的創(chuàng)傷敷料、手術(shù)止血材料、組織工程材料、醫(yī)療器械涂層，醫(yī)美領(lǐng)域的皮膚修復產(chǎn)品、注射填充材料，生物材料領(lǐng)域的細胞培養(yǎng)基、抗菌涂層，以及慢性炎癥治療、藥物載體等。本發(fā)明所述的重組抗菌黏附纖維蛋白具有可高效生產(chǎn)、低成本、產(chǎn)品純度高、生物活性好等優(yōu)點，滿足了醫(yī)療、醫(yī)美、生物材料等領(lǐng)域?qū)咕坠δ懿牧系钠惹行枨螅哂袕V闊的應用前景和市場價值。

以主要的植物源性蛋白飼料原料為研究對象，針對原料的營養(yǎng)價值特性，系統(tǒng)建立抗營養(yǎng)因子高效降解菌株的篩選方法，借鑒現(xiàn)代發(fā)酵工程的優(yōu)化理論，建立有益代謝產(chǎn)物的檢測與控制和發(fā)酵參數(shù)相關(guān)的優(yōu)化研究方法，確立規(guī)模化生產(chǎn)工藝并進行關(guān)鍵設備的選型，制造品質(zhì)穩(wěn)定可靠的發(fā)酵蛋白飼料，并建立相關(guān)產(chǎn)品的質(zhì)量指標體系，為緩解我國蛋白飼料資源緊張?zhí)峁┈F(xiàn)實可行的方法，實現(xiàn)我國飼料及養(yǎng)殖工業(yè)的健康持續(xù)發(fā)展。 

華南理工大學任嬌艷教授團隊研發(fā)的小分子肽類營養(yǎng)支持品，來源于純天然優(yōu)質(zhì)食物蛋白。與注射營養(yǎng)制劑不同，該產(chǎn)品可通過口服途徑，安全性高且可長期使用。 本項目旨在： 1）用于低蛋白血癥人群（如營養(yǎng)不良、慢性感染、晚期惡性腫瘤、肝膽系統(tǒng)疾病等）迅速提升機體白蛋白含量； 2）滿足新冠感染患者對蛋白營養(yǎng)制品的需求； 3）為一線醫(yī)護人員提供中長期營養(yǎng)干預，調(diào)節(jié)機體免疫力； 4）緩解臨床對血液類制品需求供應緊張的局面。目前該產(chǎn)品已完成量產(chǎn)下線，且于疫情期間投放多家國內(nèi)外定點醫(yī)院。

本發(fā)明公開了一種快速提取OSM數(shù)據(jù)中用戶自定義多邊形區(qū)域內(nèi)路網(wǎng)的方法，該方法能夠快速地將用戶自定義的需要研究的范圍外的節(jié)點和路段刪除，最終得到用戶自定義多邊形區(qū)域內(nèi)的OSM路網(wǎng)數(shù)據(jù)。目前從OSM數(shù)據(jù)導出的路網(wǎng)區(qū)域只能是矩形，本發(fā)明可以讓用戶自定義多邊形研究區(qū)域，并快速地自動刪除自定義多邊形區(qū)域外的節(jié)點和路網(wǎng)，節(jié)省了用戶先解析矩形范圍的OSM數(shù)據(jù)再手工刪除區(qū)域外的節(jié)點和路段產(chǎn)生的額外的時間和工作量，同時也避免該過程中人工操作可能產(chǎn)生的錯誤。