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該成果以鴨腸炎病毒弱毒疫苗株C-KCE為載體，運用基因編輯技術(shù)細(xì)菌人工染色體技術(shù)，在UL26和UL27的基因間隙，快速、穩(wěn)定、精準(zhǔn)的插入高致病性禽流感病毒H5N1的主要免疫源性基因血凝素HA。HA蛋白隨著C-KCE的復(fù)制高效的表達(dá)。從而構(gòu)建了鴨腸炎病毒載體高致病性禽流感病毒基因工程二價疫苗。該基因工程二價疫苗能不但同時抵御高致病性禽流感病毒和鴨腸炎病毒的攻擊，而且能有效阻止排毒和散毒。對高致病性禽流感的抵御更是免疫后三天達(dá)到100%保護(hù)率。有效解決了當(dāng)前肉鴨飼養(yǎng)周期短，傳統(tǒng)的高致病性禽流感病毒滅活免疫不能在飼養(yǎng)周期內(nèi)產(chǎn)生高水平的抗體，起到保護(hù)作用的缺陷。因此，該基因工程二價疫苗不但能用在蛋鴨也能用于肉鴨，減少感染鴨腸炎病毒和高致病性禽流感的風(fēng)險。 我國具有悠久的水禽養(yǎng)殖的歷史，水禽在我們國民經(jīng)濟(jì)中占據(jù)著舉足輕重的地位。水禽是禽流感病毒重要的自然宿主，嚴(yán)重危害了我國水禽養(yǎng)殖業(yè)的健康可持續(xù)發(fā)展。該研究成果能有效的解決水禽感染高致病性禽流感的難題，起到一針防二病，省時省力。還能減少反復(fù)免疫對水禽的應(yīng)激次數(shù)。因此，該基因工程二價疫苗具有廣闊的市場前景。 轉(zhuǎn)化條件:需建立該產(chǎn)品的GMP生產(chǎn)線。 成果完成時間：2017年12月

產(chǎn)品詳細(xì)介紹 QZX-500A啄木鳥消毒液發(fā)生器生產(chǎn)的次氯酸鈉消毒液，是 國際上公認(rèn)的廣譜、高效、無毒無害品質(zhì)純凈的消毒液， 可預(yù)防非典、禽流感、A型流感、手足口病、性病、肝炎 等傳染疾病。（所有致病菌和致病毒當(dāng)中，最頑固的是乙肝病毒表面抗 原，用稀釋3-5倍的“啄木鳥”消毒液對乙肝病毒表面抗原作用3-5分鐘，對 乙肝病毒表面抗原的破壞率是99.9%;用稀釋300倍的“啄木鳥”消毒液對大腸桿菌作用3-5分鐘，對大腸桿菌的殺滅率是100%。） QZX500A消毒液發(fā)生器產(chǎn)生的次氯酸鈉消毒液的有效氯含量為1200PPM，不同的稀釋比例可用于人體保?。?1.體表小傷口、創(chuàng)傷、劃傷、淤傷的消毒、止血、消炎、防感染　　　消毒液的濃度：100ppm～1500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液或稀釋1到10倍　　　使用方法：噴灑、涂抹、或浸泡　　　使用次數(shù)：每日三次或多次（視具體情況而定）。首次使用時，用較低濃度的消毒液將受傷處清洗干凈?！　　「弊饔茫簩﹂_放性小傷口，開始消毒時有刺痛感，但過一會即好?！　　⌒Ч嚎捎行?、消腫、能迅速促進(jìn)傷口愈合。愈合傷口基本無疤痕。　　　其它說明：在此應(yīng)用中，可完全取代碘酒、酒精、紫藥水、紅藥水等其它外用消毒劑。 2.皮膚騷癢的預(yù)防及輔助治療　　　消毒液的濃度：250ppm～1500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液或稀釋1到4倍（用溫水稀釋）　　　使用方法：噴灑、擦拭、或浸泡騷癢皮膚　　　使用次數(shù)：每日一次或多次（視具體情況而定），堅持使用一周。　　　副作用：無　　　效果：可有效地解決皮膚騷癢問題?！　　∑渌f明：(1) 同時用消毒液浸泡與騷癢皮膚接觸的衣物；　　　　　　　　(2)部分情況下，可完全治愈，部分情況下，可大大緩解皮膚騷癢。此時，需定期或不定期地使用啄木鳥消毒液進(jìn)行擦拭或浸泡。 3.外陰騷癢的預(yù)防及輔助治療　　　消毒液的濃度：250ppm～1500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液或稀釋1到4倍（用溫水稀釋）　　　使用方法：噴灑、涂抹、或浸泡。（每次浸泡2～5分鐘效果最好）　　　使用次數(shù)：每日一次或多次（視具體情況而定）　　　副作用：無　　　效果：可有效地解決外陰騷癢問題?？捎行У仡A(yù)防外陰騷癢、陰道炎、外陰炎癥及性病?！　　∑渌f明：同時堅持用稀釋后的消毒液浸泡內(nèi)褲。 4.灰指甲及甲溝炎的治療　　　消毒液的濃度：250ppm～500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液稀釋1到4倍（用溫水稀釋）　　　使用方法：浸泡5～10分鐘（最好溫水稀釋，水溫在不燙手的情況下，盡可能高一點）　　　使用次數(shù)：每日一次或兩次，堅持兩周以上?！　　「弊饔茫簾o　　　效果：效果顯著，多數(shù)能徹底治愈?！　　∑渌f明：無。 5.腳氣病的治療　　　消毒液的濃度：250ppm～500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液稀釋1到4倍（用溫水稀釋）　　　使用方法：浸泡5～10分鐘（最好溫水稀釋，水溫在不燙腳的情況下，盡可能高一點）　　　使用次數(shù)：每日一次或兩次，堅持兩周以上?！　　「弊饔茫簾o　　　效果：效果顯著。對于因外部感染而引起的腳氣病多數(shù)能徹底治愈?！　　∑渌f明：同時使用同比例稀釋的消毒液浸泡拖鞋和襪子。用消毒液噴灑鞋內(nèi)，晾干。 6.頭皮屑的治療　　　消毒液的濃度：250ppm～500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液稀釋1到4倍（用溫水稀釋）　　　使用方法：浸泡輕揉2～5分鐘（最好溫水稀釋，水溫在不燙手的情況下，盡可能高一點）。浸洗后不要立即用水沖洗頭部，而應(yīng)用毛巾包住頭發(fā)，使消毒液在頭部停留5分鐘左右，然后再將頭部沖洗干凈。　　　使用次數(shù)：每日一次或兩日一次。　　　副作用：無　　　效果：效果特別顯著。　　　其它說明：無。 7.牙齦炎、牙周炎、口腔潰瘍的預(yù)防與輔助治療　　　消毒液的濃度：5ppm以上。以個人可接受的濃度為準(zhǔn)。　　　消毒液的配制：在漱口水中加入幾滴或若干消毒液。習(xí)慣后可慢慢加大濃度?！　　∈褂梅椒ǎ河孟♂尯蟮南疽菏诨蛩⒀?。如有口腔潰瘍或牙疼時，可以口含稀釋后的消毒液數(shù)分鐘。　　　使用次數(shù)：每日一次或多次?！　　「弊饔茫簾o　　　效果：效果顯著?！　　∑渌f明：無。 8.爛襠的預(yù)防與輔助治療　　　消毒液的濃度：100ppm～500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液稀釋1到4倍（用溫水稀釋）　　　使用方法：噴灑、涂抹、或浸泡　　　使用次數(shù)：每日一次或多次?！　　「弊饔茫簾o　　　效果：效果顯著。　　　其它說明：無。 9.人體表面消毒　　　消毒液的濃度：50ppm～250ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液稀釋4到20倍（用溫水稀釋）　　　使用方法：擦拭或沖洗　　　使用次數(shù)：每日一次　　　副作用：無　　　效果：效果顯著。夏日多汗，油膩，易引發(fā)皮膚癢或生小瘡。用稀釋后的消毒液擦拭或沖洗，可有效地止癢、消炎，浴后特別干爽?！　　∑渌f明： 10.止蚊叮后的癢　　　消毒液的濃度：500ppm～1500ppm　　　消毒液的配制：QZX500A工作一次制取的原液或稀釋2倍　　　使用方法：擦拭　　　使用次數(shù)：多次　　　副作用：無　　　效果：可有效止癢?！　　∑渌f明：對于因貼膏藥、膠布包扎而引起的皮膚過敏、騷癢及局部體癬等癥?？砂创朔椒ㄊ褂?。 效果特別顯著。 客戶用后感： 原“啄木鳥”系列產(chǎn)品南京經(jīng)銷商，她太太是南京某大學(xué)的老師對先生經(jīng)銷的產(chǎn)品一點都不感冒，商場里大把消毒類的產(chǎn)品為什么要買個機(jī)子來自己生產(chǎn)，沒事找事。他太太患了婦科病去了很多家醫(yī)院，吃的消炎藥和洗的藥沒少用，就是不見治愈。在先生的一再勸說下，用了“啄木鳥”消毒液盥洗，而且內(nèi)褲也用“啄木鳥”消毒液進(jìn)行浸泡消毒，兩周后婦科病徹底根治。這回他太太對這個貌不驚人的東西刮目相看了。 廣州省軍區(qū)干休所的羅阿姨，她患過敏性鼻炎十幾年，醫(yī)生看了不知多少個，藥也用了很多種就是無法根治。她買了“啄木鳥”消毒液發(fā)生器后，自己琢磨用消毒液試試，她堅持用1：10稀釋后的“啄木鳥”消毒液每天擦洗患處，1個月 后過敏性鼻炎好了，羅阿姨告訴我這簡直是意料之外的驚喜。她覺得她家里任何一樣電器都比不上“啄木鳥”消毒液發(fā)生器實用。  湖南婁底的聶先生在銀行工作，每年的秋季都會口腔潰瘍，折騰的他什么東西都吃不下，每年的秋季總要往醫(yī)院里跑，卻每年都患，有了“啄木鳥”消毒液發(fā)生器后，只需每天刷牙時在杯子里滴上幾滴“啄木鳥”消毒液，還有經(jīng)常用稀釋后的消毒液漱口，就再也不用去醫(yī)院了。聶先生出差也不忘帶上一瓶做好的“啄木鳥”消毒液。他說用它省錢又安全。 廣州交通醫(yī)院的萬阿姨使用“啄木鳥”消毒液發(fā)生器至今已10年了，萬阿姨自己本身在醫(yī)院工作，自己的腸胃非常脆弱，沒有“啄木鳥”消毒液發(fā)生器之前，每次要吃水果先用洗潔精洗，再用PP粉洗，再用清水沖洗，最后再用溫開水沖洗，這樣有時吃后還會拉肚子，自從用了“啄木鳥”消毒液發(fā)生器，從此不用如此繁瑣。只用稀釋后的“啄木鳥”消毒液浸泡一次，清水沖洗一次，從未拉過肚子，她覺得“啄木鳥”消毒液發(fā)生器在家里使用太超值了。

一種磁性殼聚糖復(fù)合微球制備固定化葡萄糖異構(gòu)酶的方法,其特征在于：這種磁性殼聚糖復(fù)合微球制備固定化葡萄糖異構(gòu)酶的方法為：一、向0.4～0.6mol/L的FeCl230～100ml和FeCl350～100ml中,加入分子量為4000的聚乙二醇6.0～10.0g,在磁力攪拌器下充分溶解,再用氨水調(diào)節(jié)溶液至pH8～10,繼續(xù)攪拌30min～50min,用重蒸水洗滌抽濾后真空冷凍干燥即得Fe3O4磁核；二、將殼聚糖粉末在3％～6％乙酸中超聲分散10min,制0.02～0.08g/ml殼聚糖溶液,通過乳化劑與Fe3O4磁核超聲分散并電動攪拌10min進(jìn)行混合,使之形成微乳體系,并與1％～5％戊二醛交聯(lián)在2000r/min下繼續(xù)攪拌2～4h,然后用石油醚、丙酮和重蒸水洗滌,抽濾真空冷凍干燥后即得磁性殼聚糖復(fù)合微球；三、將制備好的磁性殼聚糖復(fù)合微球先用磷酸緩沖液pH7.0～7.8浸泡,抽濾后加入用緩沖液稀釋后的濃度為4mg/ml～16mg/ml的葡萄糖異構(gòu)酶15～20ml,在室溫?fù)u床上振蕩4～10h,取出放入4℃靜置過夜,傾出上清液,沉淀用蒸餾水洗滌再用上述磷酸緩沖液洗滌,直至洗滌液檢測不到戊二醛和游離酶,無紫外吸收,抽濾得固定化葡萄糖異構(gòu)酶

本發(fā)明涉及重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應(yīng)用。獲得重組野生型 cC 的方法是：利用 pGAPZ α A 載體構(gòu)建野生型 cC 的表達(dá)系統(tǒng)；重組野生型 cC 在畢赤酵母 X-33 中表達(dá)；重組野生型 cC 的分離純化。對重組野生型 cC 對鰱魚魚糜凝膠劣化抑制作用的檢測方法是：魚糜樣品的制作；對所取魚糜樣品進(jìn)行溫浴處理，加重組野生型 cC 和未加 cC 成為對照組；處理樣品進(jìn)行 SDS-PAGE ，觀察結(jié)果。本發(fā)明驗證了重組野生型 cC 可以直接加入魚糜制品中，能明顯抑制魚糜制品的凝膠劣化，在加工過程中能較好的保持其彈性，且其安全、無毒，有著良好的應(yīng)用前景

該材料具有良好的加工性，能制備成可注射溶液、薄膜、多孔支架、以及靜電紡絲纖維膜等多種產(chǎn)品。由于一氧化氮能夠可控按需釋放，CS-NO及其復(fù)合材料可用于治療糖尿病下肢缺血、皮膚損傷和心梗疾病。

該專利首次利用畢赤酵母細(xì)胞展示技術(shù)，通過酵母細(xì)胞壁蛋白融合表達(dá)的方法，實現(xiàn)了脂肪酶分子的細(xì)胞自固定化，有效地解決了脂肪酶進(jìn)一步加工與應(yīng)用過程的穩(wěn)定性；利用酵母細(xì)胞展示的一步酶固定化技術(shù)，減少了傳統(tǒng)固定化酶方法的酶分離純化的步驟和損失，解決了酶在使用過程的回收及反復(fù)使用的問題；將細(xì)胞展示脂肪酶的產(chǎn)酶水平進(jìn)一步提高達(dá)到國際先進(jìn)水平，為脂肪酶的在食品、飼料等領(lǐng)域的高效應(yīng)用提供了保證；參評專利在芳香酯生產(chǎn)、白酒釀造及脂酶復(fù)合飼料酶制劑生產(chǎn)等領(lǐng)域?qū)嵤?yīng)用，有效推動了行業(yè)技術(shù)進(jìn)步和應(yīng)用企業(yè)產(chǎn)品在國內(nèi)外的競爭力，近3年相關(guān)產(chǎn)品新增總銷售額7.29億元，實現(xiàn)利稅1.34億元。獲得了第十九屆中國專利獎。

本發(fā)明公開了一種無酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器及其檢測方法，該無酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器包括由參比電極、對電極和工作電極組成的三電極體系，所述工作電極由對葡萄糖具有電催化氧化性能的材料制成；使用該無酶的葡萄糖電化學(xué)傳感器檢測葡萄糖的方法，包括如下步驟：(1)電化學(xué)預(yù)處理工作電極：施加高負(fù)電位；(2)電化學(xué)氧化葡萄糖：施加葡萄糖氧化所需電位；(3)電化學(xué)清洗工作電極：施加正電位。本發(fā)明可去除樣品pH對檢測結(jié)果的影響，使原本需要在堿性條件下進(jìn)行無酶的葡萄糖檢測，可在中性及酸性樣品中的進(jìn)行，并且具有電極穩(wěn)定性好、靈敏度高、重復(fù)性好等優(yōu)點，具有非常廣闊的應(yīng)用前景。

糖基化修飾是一種廣泛存在且重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，由糖基轉(zhuǎn)移酶催化形成?？贵w、疫苗等許多臨床治療性蛋白質(zhì)都具有特異性糖基化修飾，且對蛋白活性至關(guān)重要?；谔腔D(zhuǎn)移酶的化學(xué)酶法合成方法，是獲得均一糖蛋白的有效手段之一。因此，找尋性質(zhì)優(yōu)良的各種糖基轉(zhuǎn)移酶十分關(guān)鍵。對比真核細(xì)胞，細(xì)菌來源的糖基轉(zhuǎn)移酶具有易表達(dá)純化和催化產(chǎn)率高等優(yōu)良性質(zhì)，常被改造為人工合成糖蛋白的工具酶。然而，蛋白O-連接糖基化修飾在原核生物與真核生物之間并不保守，這成為了利用細(xì)菌糖基化系統(tǒng)生產(chǎn)真核生物O-糖蛋白的一大瓶頸。為了解決這個問題，陳興教授課題組對病原菌-宿主相互作用中的蛋白質(zhì)糖基化進(jìn)行了探索。   某些病原菌入侵宿主細(xì)胞后，會分泌具有糖基轉(zhuǎn)移酶活性的效應(yīng)蛋白。這些效應(yīng)蛋白往往利用宿主的糖供體，并且修飾宿主的靶蛋白。因此，對這類糖基轉(zhuǎn)移酶的工程化，可為實現(xiàn)真核生物O-糖蛋白的合成提供新的有效策略。嗜肺軍團(tuán)菌效應(yīng)蛋白SetA具有O-葡萄糖轉(zhuǎn)移酶活性，然而其底物蛋白尚未被鑒定。 本研究首先開發(fā)了能夠?qū)崿F(xiàn)特異性標(biāo)記和選擇性富集的化學(xué)酶法策略。他們設(shè)計被SetA利用的生物正交基團(tuán)修飾的糖供體（尿苷二磷酸-6-疊氮-葡萄糖，UDP-6AzGlc），將疊氮葡萄糖6AzGlc轉(zhuǎn)移至底物蛋白。通過點擊化學(xué)反應(yīng)，與可切割生物素探針連接，實現(xiàn)對底物蛋白的選擇性富集和位點特異性質(zhì)譜鑒定(下圖)。質(zhì)譜分析鑒定到分布于276個蛋白的317個O-glucose修飾位點。天然糖供體標(biāo)記及軍團(tuán)菌侵染實驗，驗證了SetA可以修飾眾多的底物蛋白。

本發(fā)明公開了一種產(chǎn)角蛋白酶的粘金黃桿菌及其分離方法。所述粘金黃桿菌拉丁名為Chryseobac？terium？L99，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC？No.2295。本發(fā)明公開了該菌的形態(tài)學(xué)特征為：菌體桿狀，不產(chǎn)孢子，無運動性，革蘭氏染色呈陰性。本發(fā)明公開了該菌的全細(xì)胞脂肪酸主要成份為：十三甲基十四酸47.59％，二羥基-13-甲基十四酸和(或)Ω-7-順式-13甲基-十五酸15.72％，三羥基-15-甲基十六酸13.91％，Ω-9-順式-14甲基棕櫚酸9.48％。本發(fā)明還公開了該菌的16S核糖體DNA(16S？rDNA)全序列。本發(fā)明公開的分離方法包括三個步驟：普通營養(yǎng)培養(yǎng)基富集培養(yǎng)，以角蛋白為唯一碳氮源固體培養(yǎng)基初篩，以角蛋白為唯一碳氮源液體培養(yǎng)基的復(fù)篩。該方法快捷有效，所得菌種產(chǎn)酶能力強(qiáng)。

本項目的特點是尿綜合利用聯(lián)產(chǎn)工藝，可將尿激酶、激肽釋放酶，抑肽酶和高純度尿多酸肽四種成分分別提取分離出來，能大大降低成本。高純度高分子尿激酶新工藝曾與中國藥品檢定所共同舉辦了學(xué)習(xí)班，轉(zhuǎn)讓給了四家藥廠還承擔(dān)制作了國家標(biāo)準(zhǔn)品和亞太地區(qū)國際標(biāo)準(zhǔn)品，MW54，000達(dá)100%，而英國制作的樣品只有60%。尿多酸肽是國際上唯一的尿制劑抗癌藥物，但含75%尿素、銨鹽、類黑精、雜醇油等大量雜質(zhì)，副作用大，穩(wěn)定性差。本工藝排雜徹底，提取分離純化手段先進(jìn)，成本低，收率高，純度高，活性高，無副作用。