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大連民族大學生命科學學院曹際娟研發團隊成功研發了針對新型冠狀病毒的新型檢測方法——恒溫熒光快速檢測法，檢測靈敏度可穩定達到1fg/μL（100copies/μL）。該方法較現行通用的RT-PCR法具有快速靈敏、操作簡便、成本低廉、易于推廣的特點，已順利通過天津、廣州的三家實驗室驗證測試。此外，還同步研發了安全且無傳染性的新型冠狀病毒體外轉錄RNA質控樣品，已上報全國標準樣品技術委員會申請國家標準樣品。研發團隊將這些科研成果已無償提供給具有醫療器械資質的企業用于申報試劑盒生產。 曹際娟研發團隊利用技術專長，密切分析國際上公布的新型冠狀病毒全基因組序列，開展種內保守性比對、種外同源性比對以及差異位點分析，設計并篩選確定了2 條內引物、2 條外引物及2 條環引物為核心技術，增強了恒溫熒光擴增技術的特異性和靈敏度保證。克服試劑緊缺、物流不暢等各種困難，聯合多家實驗室的資源，成功完成了方法的驗證測試。

產品名稱：法羅培南鈉 分子式：C12H14NNaO5S.2.5H2O 分子量：307.3 外觀：類白色結晶性粉末

一步酶法從頭孢菌素 c（CPC） 生產 7－氨基頭孢烷酸（ 7-ACA） 是繼我們研發的兩步酶法工藝成功應用于工1 成果簡介一步酶法從頭孢菌素 c（CPC） 生產 7－氨基頭孢烷酸（ 7-ACA） 是繼我們研發的兩步酶法工藝成功應用于工業生產以后，在生產頭孢菌素類抗生素醫藥中間體技術的又一個突破。與化學法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環保和轉化率高、產品質量好等優點。該技術采用基因工程技術對 CPC 酰化酶（一步酶法用酶）的基因進行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構建的高效啟動子 HP 以及優化組合的調控表達元件，構建并篩選出了能夠高效、高活性表達一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細胞株。這是國內第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達到工業應用水平的技術。由于采用了高效的表達系統和穩定的質粒，以及組成型表達結構，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩定，在發酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導劑就可以實現高效、高活性表達。在高效表達 CPC 酰化酶的基礎上，我們通過在表達基因上同時引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進行。通過自己開發研制的可重復使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達到 60U/g 以上。固定化酶可以重復使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復使用。2 技術指標菌 種：基因工程大腸桿菌，卡那抗性，組成型表達。 發酵溫度： 37℃ 培 養 基：普通的大腸桿菌培養基，主要成分有玉米漿等廉價的營養源。 發酵周期： 20 小時 發酵酶活： 3U/ml 以上（ 5 升發酵罐） 特 點：遺傳特性穩定，不需要添加誘導劑和抗生素，工藝簡單。3 合作方式小試技術轉讓或合作進行中試。4 所屬行業領域醫療衛生。業生產以后，在生產頭孢菌素類抗生素醫藥中間體技術的又一個突破。與化學法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環保和轉化率高、產品質量好等優點。該技術采用基因工程技術對 CPC 酰化酶（一步酶法用酶）的基因進行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構建的高效啟動子 HP 以及優化組合的調控表達元件，構建并篩選出了能夠高效、高活性表達一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細胞株。這是國內第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達到工業應用水平的技術。由于采用了高效的表達系統和穩定的質粒，以及組成型表達結構，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩定，在發酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導劑就可以實現高效、高活性表達。在高效表達 CPC 酰化酶的基礎上，我們通過在表達基因上同時引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進行。通過自己開發研制的可重復使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達到 60U/g 以上。固定化酶可以重復使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復使用。

一步酶法從頭孢菌素c（ CPC） 生產7－氨基頭孢烷酸（7-ACA） 是繼我們研發的兩步酶法工藝成功應用于工業生產以后，在生產頭孢菌素類抗生素醫藥中間體技術的又一個突破。與化學法和兩步酶法相比，一步酶法有工藝簡單、環保和轉化率高、產品質量好等優點。該技術采用基因工程技術對 CPC 酰化酶（一步酶法用酶）的基因進行了改造，獲得了能夠高效催化 CPC 到 7-ACA 的突變基因。通過我們自己構建的高效啟動子 HP 以及優化組合的調控表達元件，構建并篩選出了能夠高效、高活性表達一步酶法用酶——CPC 酰化酶的基因工程細胞株。這是國內第一個使得 CPC 酰化酶活性能夠達到工業應用水平的技術。由于采用了高效的表達系統和穩定的質粒，以及組成型表達結構，使得該基因工程菌遺傳特性非常穩定，在發酵制酶的過程中不需要添加任何抗生素和誘導劑就可以實現高效、高活性表達。在高效表達 CPC 酰化酶的基礎上，我們通過在表達基因上同時引入的特殊基因序列，使得蛋白的純化和固定化工藝一步進行。通過自己開發研制的可重復使用的固定化載體，可以使得固定化酶活性達到 60U/g 以上。 采用我們研制的特異性純化介質，可以從菌體破碎液中一步純化和固定化 CPC 酰化酶，酶收率在 90 ％以上，固定化酶活達到 60U/g 以上。固定化酶可以重復使用 20 批以上，純化和固定化用載體可以重復使用。

成果描述：酶脫毛是一種公認的制革脫毛清潔工藝，在中國的豬皮制革中獲得了成功的應用，但一直沒有成功用于牛皮制造。已經報道的牛皮的酶脫毛工藝通常是在35℃至42℃的較高溫度下進行，由于組織及纖維結構的差異，較高溫度下牛皮膠原纖維容易受到破壞，容易發生松面、毛孔擴大等質量缺陷，甚至導致爛面等嚴重質量事故，并且在該溫度條件下實施牛皮酶脫毛，工藝操作和控制難度極大。本技術提供了一種針對牛皮的低溫酶脫毛工藝，并且完全不使用硫化物。該工藝技術使用與之配套的脫毛酶制劑，能夠在較低溫度下對牛皮進行脫毛處理，解決了長久以來本領域技術人員一直渴望解決但始終未獲得成功的牛皮酶脫毛制革的技術難題，并且產生的含蛋白廢水可以替代部分氮肥直接用于農業或城市綠化的灌溉，低溫脫毛同時也節約了能源的消耗，降低了生產成本，提高了綜合效益。市場前景分析：牛皮制革廠。與同類成果相比的優勢分析：國際先進。

可以量產/n針對當前工業發展對脂肪酶的大量需求與脂肪酶實際表達水平較低 的技術瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達技術關鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達技術平臺，構建的米根霉脂肪酶基因工程菌 10L 發酵酶活力可達 40,000U/ml 以上，為當前報道的最高水平，具有極強的國際競爭力。產 品可用于油脂水解、轉酯，食品加工、烘焙，生物柴油制備，飼料添加 劑，再生紙脫墨等廣泛用途。建設其發酵生產線預計需要 800-1000 萬元，經濟效益可觀。米根霉脂肪酶可用于油脂水解、轉酯，食品加工、烘焙，生物柴油

糖化酶是糖化工業的重要酶制劑，但生產上的主要問題是：酶活力低、沒有常溫條件下的酶產品（使得糖化工藝中需要消耗大量能源）。利用定向進化技術獲取較低溫度下活力提高數倍~數十倍的新的酶分子、并確定新基因序列，轉化受體菌。 我們的技術優勢：基因分離技術是我們的優勢，已報道全長基因序列15條，在天津基金資助下最近已克隆了糖化酶基因。定向進化是我們目前的主要研究方向之一，在留學回國科研啟動基金資助下對谷胱苷肽-S-轉移酶脫氯活性進行提高，已有研究進展。

全自動酶標儀318C+廣泛用于各大高校科研機構、技術質量監督局、動植物檢疫及食品飼料行業等，除開展血液學、免疫學、腫瘤免疫學、傳染病免疫學、TORCH感染免疫學、基因檢驗項目外、還可以對食品安全三聚氰胺、黃曲霉素、農藥殘留、獸藥殘留等所有采用酶聯免疫吸附試驗（Elisa）進行項目檢驗，并且有相應版本的軟件支持。   產品特點： 1、內置嵌入式系統，無需外接電腦即可操作、存儲、打印; 2、測量模式：單波長檢測，雙波長檢測，兩點法，動力學法，酶抑制率，終點法、速率法。 3、*可選擇吸光度、Cut-Off定性計算、單點定標、折線回歸、線性回歸、指數回歸、對數回歸、雙對數回歸、log-logit、冪回歸、四參數回歸、酶抑制率等計算方法；  4、在同一板上可進行多至12個不同項目的測試，并可同一板檢測定性和定量項目。 5、*全面完善的質控功能，包含westguard多規則質控，即刻法質控等多種質控圖及質控參數計算，具有質控報警功能。   技術參數： 1、*波長范圍： 400-800nm 2、*濾光片配置：10個濾光片位置，標配405nm、450nm、492nm、630nm,選配6定制波長 3、吸光度范圍：0.000―4.000A 4、*光通道數：8通道光路檢測，另設一個獨立參比通道（選配） 5、示值穩定性：≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 6、示值誤差（準確性）：≤±0.005A或±0.2%T。 7、重復性：≤0.2%或≤0.2%T。 8、靈敏度：≥0.01（L/mg）。 9、通道差異：≤0.01A。 10、波長示值誤差：±1nm 11、半寬度：≤8nm 12、分辨率：0.001A（顯示），0.0001A（內部計算） 13、*讀板速度：單波長≤3秒/96孔，雙波長≤6秒/96孔 14、振板功能：速度和時間可調 15、光源類型：進口鹵鎢燈 16、板條類型：標準96孔或其他型酶標板、條 17、適用孔型：平底、U型和V型 18、顯示方式：7寸彩色液晶顯示屏顯示 19、輸入方式：觸摸屏輸入，可選配鼠標和鍵盤 20、打印：內置熱敏打印機，可外接打印機 21、數據儲存：200,000個測試數據，500個以上測試項目（可擴展） 22、接    口： USB(A)口、USB(B)口、串口、并口 23、使用環境：溫度5-40℃；濕度15%-80% 24、電源電壓：220V±10%，50/60Hz 25、體積：475mm×350mm×210mm（長×寬×高） 27、重量：11.5Kg

本項目針對上述問題，從分子、細胞和個體水平三個層面上研究人端粒酶逆轉錄酶(hTERT)生物學行為及相關技術的臨床應用，旨在提高兒童腫瘤療效。 1、主要科技內容和技術特點： 1） 率先在國內外建立RT-PCR和實時定量RT-PCR檢測hTERT法，該法簡便、快速、經濟、安全，適用于臨床推廣應用。該項技術已經應用于兒童惡性腫瘤診斷、監測和指導個體化治療，提高了兒童腫瘤的診療水平。 2）首次在國內外研究體內造血干細胞hTERT的生物學行為，證明了hTERT與促紅細胞生成素的關系，并系統研究了惡性腫瘤細胞hTERT的生物學行為， 探討腫瘤細胞中Aurora A與hTERT及端粒酶表達的相關性，提出hTERT與細胞因子網絡紊亂相互作用促進腫瘤發生和發展的新觀點，為惡性腫瘤在分子水平上的監測和以hTERT為靶點的生物工程治療提供了依據。 3） 在國內外首次闡明端粒酶重建對成纖維細胞遷移能力和生物節律的調控，把端粒酶、hTERT生物學行為和生物節律與腫瘤擇時治療有機結合，為腫瘤治療提供了一條新路徑。實踐證明，在該理論指導下進行化療，可明顯提高腫瘤化療效果，且毒副作用明顯減少。