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關(guān)于軍團(tuán)菌來源的新型O-糖基轉(zhuǎn)移酶機(jī)理
糖基化修飾是一種廣泛存在且重要的蛋白質(zhì)翻譯后修飾，由糖基轉(zhuǎn)移酶催化形成。抗體、疫苗等許多臨床治療性蛋白質(zhì)都具有特異性糖基化修飾，且對(duì)蛋白活性至關(guān)重要。基于糖基轉(zhuǎn)移酶的化學(xué)酶法合成方法，是獲得均一糖蛋白的有效手段之一。因此，找尋性質(zhì)優(yōu)良的各種糖基轉(zhuǎn)移酶十分關(guān)鍵。對(duì)比真核細(xì)胞，細(xì)菌來源的糖基轉(zhuǎn)移酶具有易表達(dá)純化和催化產(chǎn)率高等優(yōu)良性質(zhì)，常被改造為人工合成糖蛋白的工具酶。然而，蛋白O-連接糖基化修飾在原核生物與真核生物之間并不保守，這成為了利用細(xì)菌糖基化系統(tǒng)生產(chǎn)真核生物O-糖蛋白的一大瓶頸。為了解決這個(gè)問題，陳興教授課題組對(duì)病原菌-宿主相互作用中的蛋白質(zhì)糖基化進(jìn)行了探索。 某些病原菌入侵宿主細(xì)胞后，會(huì)分泌具有糖基轉(zhuǎn)移酶活性的效應(yīng)蛋白。這些效應(yīng)蛋白往往利用宿主的糖供體，并且修飾宿主的靶蛋白。因此，對(duì)這類糖基轉(zhuǎn)移酶的工程化，可為實(shí)現(xiàn)真核生物O-糖蛋白的合成提供新的有效策略。嗜肺軍團(tuán)菌效應(yīng)蛋白SetA具有O-葡萄糖轉(zhuǎn)移酶活性，然而其底物蛋白尚未被鑒定。 本研究首先開發(fā)了能夠?qū)崿F(xiàn)特異性標(biāo)記和選擇性富集的化學(xué)酶法策略。他們?cè)O(shè)計(jì)被SetA利用的生物正交基團(tuán)修飾的糖供體（尿苷二磷酸-6-疊氮-葡萄糖，UDP-6AzGlc），將疊氮葡萄糖6AzGlc轉(zhuǎn)移至底物蛋白。通過點(diǎn)擊化學(xué)反應(yīng)，與可切割生物素探針連接，實(shí)現(xiàn)對(duì)底物蛋白的選擇性富集和位點(diǎn)特異性質(zhì)譜鑒定(下圖)。質(zhì)譜分析鑒定到分布于276個(gè)蛋白的317個(gè)O-glucose修飾位點(diǎn)。天然糖供體標(biāo)記及軍團(tuán)菌侵染實(shí)驗(yàn)，驗(yàn)證了SetA可以修飾眾多的底物蛋白。
北京大學(xué)
2021-04-11
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一種通過內(nèi)源芥子酶調(diào)控芥菜產(chǎn)品風(fēng)味和貯藏性的方法
該專利技術(shù)可應(yīng)用于芥菜等蔬菜的腌制加工。通過調(diào)節(jié)芥菜機(jī)械處理程度、脫水程度以及加工溫度等，調(diào)節(jié)芥菜內(nèi)源芥子酶活性，進(jìn)而調(diào)控芥菜產(chǎn)品的風(fēng)味和貯藏性。目前芥菜等腌制蔬菜在加工中存在色澤、風(fēng)味等方面的不足，與消費(fèi)者需求有一定差距，市場(chǎng)需求改進(jìn)的加工技術(shù)。該技術(shù)已在河南一家企業(yè)成熟應(yīng)用。該技術(shù)具有較好的應(yīng)用前景，在應(yīng)用過程中也將產(chǎn)生明顯的經(jīng)濟(jì)效益和社會(huì) 效益。
專利的技術(shù)水平：
先將芥菜切成長(zhǎng)度為 4-6 厘米、寬度為 1.5-2.5 厘米的細(xì)絲，然后用 4-5%食鹽進(jìn)行腌制 1-2 個(gè)小時(shí)；將腌制后的芥菜絲在沸水中漂燙 20-40 秒，然后快速冷卻；冷卻后的芥菜絲在真空包裝后，進(jìn)行巴士殺菌。該產(chǎn)品具有芥菜特色的風(fēng)味，控制了褐變，在常溫下貯存期可達(dá)到 6 個(gè)月。該技術(shù)達(dá)到國際先進(jìn)水平。
江南大學(xué)
2021-04-11
業(yè)大學(xué).jpg){kind=logo}
一株對(duì)灰霉病菌有抑制作用的嗜麥芽假單胞菌菌株QBA-5及其應(yīng)用
本發(fā)明公開了一株對(duì)灰霉病菌有抑制作用的嗜麥芽假單胞菌菌株QBA-5及其應(yīng)用，本發(fā)明通過篩選獲得的菌株QBA-5其分類命名為嗜麥芽假單胞菌Pseudomonas?maltophilia，保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心，其保藏編號(hào)為CCTCC?M?2015403。本發(fā)明具體經(jīng)過對(duì)灰霉病菌孢子、芽管伸長(zhǎng)和離體葉片的實(shí)驗(yàn)，證明本發(fā)明獲得的菌株QBA-5具有對(duì)灰霉病菌的強(qiáng)抑制作用，可以將其制備成防治灰霉病菌的生防制劑，具有良好的市場(chǎng)應(yīng)用前景。
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-13
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酶法拆分生產(chǎn)（S）-萘普生
萘普生是一種傳統(tǒng)的非處方消炎、鎮(zhèn)痛藥物。作為一種手性藥物，其（S）-構(gòu)型化合物的消炎活性是（R）-構(gòu)型的28倍。對(duì)化學(xué)法合成的消旋萘普生進(jìn)行拆分，得到光學(xué)純的（S）-萘普生，可以有效地提高藥效，減少毒副作用。 我們采用自行開發(fā)的重組酯酶催化消旋萘普生甲酯的立體選擇性水解，（S）-萘普生甲酯水解生成相應(yīng)的（S）-萘普生，未反應(yīng)的（R）-萘普生甲酯在強(qiáng)堿環(huán)境下進(jìn)行消旋，得到消旋萘普生甲酯，回收后與新鮮底物混合，重新用于拆分反應(yīng)。 由于萘普生甲酯在水中溶解性差，與酶接觸面積小，反應(yīng)時(shí)底物濃度通常比較低，本項(xiàng)目中，我們采用簡(jiǎn)單的機(jī)械破碎的方法，對(duì)底物進(jìn)行粉碎，獲得細(xì)微的底物顆粒，極大地增加了萘普生甲酯顆粒的表面積，從而有效地提高了純水相反應(yīng)介質(zhì)中萘普生甲酯的酶促反應(yīng)速率，底物濃度可達(dá)到5%，并且反應(yīng)結(jié)束后通過簡(jiǎn)單過濾即可實(shí)現(xiàn)底物與產(chǎn)物的分離，工藝簡(jiǎn)單。
華東理工大學(xué)
2021-02-01
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超氧化物歧化酶含片
超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase, SOD)，是一種源于生命體的活性物 質(zhì)，能消除生物體在新陳代謝過程中產(chǎn)生的超氧陰離子自由基，從而能夠?qū)τ?超氧陰離子自由基引起的各種疾病和功能異常有預(yù)防和治療作用，如各種非特 異性炎癥、輻射損傷、自身免疫性疾病、缺血再灌注損傷等，因此在醫(yī)療、保 健品、化妝品領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用。
山東大學(xué)
2021-04-13
酶法拆分生產(chǎn)D-泛酸技術(shù)
D-泛解酸內(nèi)酯是D-泛酸鈣與D-泛醇的重要手性中間體。D-泛酸作為一種重要的藥物、食品添加劑和飼料添加劑，用途廣，市場(chǎng)大，目前全球D-泛酸鈣消費(fèi)量大約17000t/a，歐美各國是D-泛酸鈣的主要消費(fèi)市場(chǎng)，其中美國約3200t/a、歐洲約2800t/a、亞洲約2500t/a、拉美等地區(qū)約500t/a。D-泛酸鈣在全球市場(chǎng)呈現(xiàn)平穩(wěn)增長(zhǎng)態(tài)勢(shì)，自然年增長(zhǎng)率約5%。市場(chǎng)分析，泛酸鈣作為飼料添加劑其銷量將穩(wěn)步增長(zhǎng)，而它作為抑郁癥的輔助治療劑以及風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎的輔助治療藥物前景十分光明。D-泛醇又稱為維生素原B5，在體內(nèi)能轉(zhuǎn)化為泛酸，進(jìn)而合成輔酶A，具有促進(jìn)蛋白質(zhì)、脂肪、糖類的代謝，保護(hù)皮膚表面和毛發(fā)光澤、防止疾病發(fā)生的作用，廣泛應(yīng)用于化妝品和個(gè)人洗護(hù)用品。隨著D-泛酸鈣和D-泛醇新用途的不斷被發(fā)掘，預(yù)計(jì)其國際市場(chǎng)銷售有望迅猛增長(zhǎng)。該反應(yīng)中DL-泛內(nèi)酯濃度20~25%，單次拆解率>30%；單批次反應(yīng)周期<24 h；固定化酶重復(fù)使用不少于50次。
華東理工大學(xué)
2021-04-13
酶法拆分生產(chǎn)（S）-萘普生
萘普生是一種傳統(tǒng)的非處方消炎、鎮(zhèn)痛藥物。作為一種手性藥物，其（S）-構(gòu)型化合物的消炎活性是（R）-構(gòu)型的28倍。對(duì)化學(xué)法合成的消旋萘普生進(jìn)行拆分，得到光學(xué)純的（S）-萘普生，可以有效地提高藥效，減少毒副作用。
我們采用自行開發(fā)的重組酯酶催化消旋萘普生甲酯的立體選擇性水解，（S）-萘普生甲酯水解生成相應(yīng)的（S）-萘普生，未反應(yīng)的（R）-萘普生甲酯在強(qiáng)堿環(huán)境下進(jìn)行消旋，得到消旋萘普生甲酯，回收后與新鮮底物混合，重新用于拆分反應(yīng)。
由于萘普生甲酯在水中溶解性差，與酶接觸面積小，反應(yīng)時(shí)底物濃度通常比較低，本項(xiàng)目中，我們采用簡(jiǎn)單的機(jī)械破碎的方法，對(duì)底物進(jìn)行粉碎，獲得細(xì)微的底物顆粒，極大地增加了萘普生甲酯顆粒的表面積，從而有效地提高了純水相反應(yīng)介質(zhì)中萘普生甲酯的酶促反應(yīng)速率，底物濃度可達(dá)到5%，并且反應(yīng)結(jié)束后通過簡(jiǎn)單過濾即可實(shí)現(xiàn)底物與產(chǎn)物的分離，工藝簡(jiǎn)單。
相關(guān)技術(shù)已申請(qǐng)中國發(fā)明專利，申請(qǐng)?zhí)?01010114462.8
華東理工大學(xué)
2021-04-13
高濃度淀粉酶法液化、糖化技術(shù)
在傳統(tǒng)淀粉糖的生產(chǎn)過程中，淀粉乳投料濃度通常在 25%~35%之間，淀粉乳經(jīng)液化、糖化后的酶解液需經(jīng)過蒸發(fā)濃縮等工序，以提高產(chǎn)物濃度，這消耗了大量的水資源與能源，增加了生產(chǎn)成本。本技術(shù)針對(duì)淀粉在液化、糖化過程中的粘度過大所導(dǎo)致的投料濃度較低等行業(yè)難題，通過生物酶法和物理場(chǎng)預(yù)處理，可將淀粉乳的初始濃度提高至 40%以上，減少淀粉乳的初始水分含量，制備高濃度淀粉糖產(chǎn)品。該項(xiàng)技術(shù)應(yīng)用于玉米淀粉液化、糖化過程中，具有降低能耗、節(jié)約用水、提高產(chǎn)量、提高單位設(shè)備利用率、縮短生產(chǎn)周期、降低生產(chǎn)成本等特點(diǎn)，有著巨大的應(yīng)用價(jià)值。
江南大學(xué)
2021-04-11
春大學(xué).jpg){kind=logo}
脲酶陰性,無豆腥味,可直接食用的大豆分離蛋白生產(chǎn)方法
本發(fā)明在大豆分離蛋白生產(chǎn)過程,增加了在加堿溶出蛋白浸出液后,蛋白濃度<3%的條件下,通過滅酶裝置,高溫(130°-145℃),瞬時(shí)(2-15秒),增加高溫滅酶工藝環(huán)節(jié)后,所產(chǎn)大豆分離蛋白脲酶反應(yīng)陰性,無豆腥味,可直接食用,對(duì)人體無害.本發(fā)明所產(chǎn)的新型分離蛋白,用于面制品或肉制品添加,均可保證取得產(chǎn)品無豆腥味的良好效果.
長(zhǎng)春大學(xué)
2021-04-30
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負(fù)載蛋白、多肽類藥物微球立體形態(tài)及分布的測(cè)定方法
本發(fā)明公開了一種負(fù)載蛋白、多肽類藥物微球立體形態(tài)及分布的測(cè)定方法，屬于微球測(cè)定技術(shù)領(lǐng)域。
中山大學(xué)
2021-04-10