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本發(fā)明公開了一種天然有機(jī)酸根昆布氨酸酯在功能奶制品中的應(yīng)用，其可作為牛奶安全添加劑，每種組合的天然有機(jī)酸根昆布氨酸酯經(jīng)過(guò)毒理實(shí)驗(yàn)分析，可使小白鼠半致死量在5300?7600mg/kg之間，屬于實(shí)際無(wú)毒物質(zhì)；昆布氨酸酯添加百分重量比為0.1?1％，牛奶制品保質(zhì)期延長(zhǎng)，并具有預(yù)防高血壓的保健功能。與現(xiàn)有技術(shù)中常采用的消毒法，即巴氏消毒法相比，本發(fā)明昆布氨酸酯彌補(bǔ)了巴氏消毒技術(shù)的缺陷，對(duì)耐熱性絲衣霉屬等微生物有抑制作用，起到延長(zhǎng)保鮮保質(zhì)作用，如保鮮期比單獨(dú)巴氏消毒法保鮮保質(zhì)期延長(zhǎng)5?83天。本發(fā)明有機(jī)酸根昆布氨酸酯在功能奶制品中的新應(yīng)用，其一劑多效，既有保鮮作用，又有預(yù)防高血壓保健作用，增加了牛奶制品的花色品種，并且，有機(jī)酸根昆布氨酸酯是天然海洋非蛋白氨基酸衍生物，與傳統(tǒng)氧化型消毒劑、含苯結(jié)構(gòu)功能分子相比，生態(tài)環(huán)保，有更好的生物相容性，滿足食品的安全要求，有良好的經(jīng)濟(jì)效益與社會(huì)效益前景。

ε-聚賴氨酸是由 25-35 個(gè) L-賴氨酸通過(guò)其 α-羧基與 ε-氨基縮合形成的一種同型氨基酸聚合物，分子量在 2500-4500 Da。目前，ε-聚賴氨酸主要作為一種食品防腐劑被廣泛應(yīng)用于日本、韓國(guó)、美國(guó)和歐盟。2014 年 4 月，我國(guó)衛(wèi)計(jì)委也正式批準(zhǔn)其在我國(guó)食品加工業(yè)中的使用。本項(xiàng)目通過(guò) 10 多年的技術(shù)攻關(guān)，聚焦于產(chǎn)生菌篩選、高產(chǎn)菌選育、發(fā)酵過(guò)程優(yōu)化與調(diào)控、產(chǎn)物的分離提取與精制等研究?jī)?nèi)容，獲得了具有完全自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的系列高產(chǎn)菌，實(shí)現(xiàn)了實(shí)驗(yàn)室（5 L）-中試（1 m3）-試生產(chǎn)（10 m3）不同規(guī)模的 ε-聚賴氨酸發(fā)酵生產(chǎn)，并建立了與發(fā)酵規(guī)模相匹配的 ε-聚賴氨酸高效提取和精制工藝。

本研究構(gòu)建一種谷氨酸棒桿菌基因工程菌，使其同時(shí)發(fā)酵生產(chǎn)兩種產(chǎn)品：聚羥基脂肪酸酯和異亮氨酸；前者是胞內(nèi)產(chǎn)品，后者是胞外產(chǎn)品。該基因工程菌可以降低生產(chǎn)成本，具有工業(yè)應(yīng)用前景。研究結(jié)果顯示：將 phaCAB 基因簇導(dǎo)入 WM001后，WM001/pDXW-8-phaCAB 96h 產(chǎn)量為 9.58 g/L，而 WM001/pDXW-8 96h 產(chǎn)量為6.65 g/L，產(chǎn)率提高 65%達(dá)到 0.15g 異亮氨酸/g 葡萄糖。PHA 產(chǎn)量達(dá)到 28.7%(w/w)。 關(guān)鍵技術(shù) 聚羥基脂肪酸酯（PHAs）是部分微生物生存在具有較高碳源與氮源的條件下，生成的一類微生物自身碳源、能源儲(chǔ)備物的胞內(nèi)聚酯。根據(jù)相關(guān)報(bào)道，將 PHB 合成代謝基因簇導(dǎo)入細(xì)胞內(nèi)，可實(shí)現(xiàn) PHB 與某些代謝產(chǎn)物的聯(lián)產(chǎn)和增產(chǎn)，提高底物的利用率。L-異亮氨酸是一種人體必需氨基酸，因其在醫(yī)藥、食品和健康保健領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用，而使其近幾年的生產(chǎn)能力發(fā)展迅速，目前國(guó)際上比較先進(jìn)的主流生產(chǎn)方式為發(fā)酵法生產(chǎn) L-異亮氨酸。谷氨酸棒桿菌(Corynebacteriumglutamicum)是一種小棒狀、革蘭氏陽(yáng)性的食品安全生產(chǎn)菌，目前已經(jīng)用于工業(yè)生產(chǎn) L-異亮氨酸，本成果構(gòu)建能高產(chǎn) PHAs 的 C. glutamicum 菌株，具有工業(yè)化應(yīng)用潛力。 

本發(fā)明提供一類具有酪氨酸酶抑制活性的化合物，包括六種從桑葉中提取的具有酪氨酸酶抑制活性的多酚類化合物。將藥材經(jīng)乙醇水溶液加熱提取，濃縮，硅膠柱分離，洗脫，洗脫液濃縮干燥，再用制備液相色譜繼續(xù)分離，收集溶液，溶液濃縮干燥后得到樣品并進(jìn)行結(jié)構(gòu)鑒定。本發(fā)明還提供了從桑葉中分離上述多酚類化合物的方法。本發(fā)明提供的六種多酚類化合物具有較強(qiáng)的酪氨酸酶抑制活性，能夠有效預(yù)防和治療黑色素合成異常導(dǎo)致的人體色素沉著性疾病、黑色素瘤以及其它需要抑制酪氨酸酶活性的病癥，可用于制備治療此類疾病的藥物。

L-瓜氨酸能夠清除羥基，可有效保護(hù) DNA 及 PMN 免受氧化反應(yīng)的侵害。瓜氨酸對(duì)防治前列腺疾病作用明顯。近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)瓜氨酸在體內(nèi)可轉(zhuǎn)化為人體必需氨基酸 L-精氨酸，在維持心血管正常功能的一氧化氮代謝中也發(fā)揮著重要作用。此外，服用瓜氨酸能有效的改善人體的抗疲勞能力，維護(hù)健康的心肺功能，增強(qiáng)人體的肌肉強(qiáng)度，提高體能，在運(yùn)動(dòng)保健方面具有良好的作用。目前廣瓜氨酸在抗氧化，醫(yī)用檢測(cè)，保健食品，化妝品和食品添加劑等方面有著廣泛的應(yīng)用前景，國(guó)內(nèi)外需求巨大，市場(chǎng)前景廣闊。酶法轉(zhuǎn)化精氨酸生產(chǎn)瓜氨酸具有工藝簡(jiǎn)單、周期短、耗能低、專一性強(qiáng)、收率高、提取方便等優(yōu)點(diǎn)，因而受到越來(lái)越多的關(guān)注。本研究通過(guò)構(gòu)建工程菌，高通量篩選獲得一株高轉(zhuǎn)化率的菌株。 

L-鳥氨酸是細(xì)胞內(nèi)重要代謝化合物，近來(lái)研究發(fā)現(xiàn) L-鳥氨酸可刺激腦垂體分泌生長(zhǎng)激素，促進(jìn)蛋白質(zhì)合成及糖與脂肪的分解代謝。此外，以鳥氨酸為原料制備的依氟鳥氨酸，能抑制多胺合成，延緩腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，是頗具前景的新型抗癌藥物。L-鳥氨酸除了在醫(yī)藥上作為試劑與注射液外，通常還用于配制保肝、強(qiáng)身、解毒的營(yíng)養(yǎng)劑以及生產(chǎn)消除疲勞的發(fā)泡飲料。而酶法轉(zhuǎn)化精氨酸生產(chǎn)鳥氨酸具有工藝簡(jiǎn)單、周期短、耗能低、專一性強(qiáng)、收率高、提取方便等優(yōu)點(diǎn)，因而受到越來(lái)越多的關(guān)注。技術(shù)指標(biāo)：工程菌經(jīng)過(guò)培養(yǎng) 6 h 后，ARG 酶活可達(dá)到 177.3 U/mL；在 4 h 的催化周期內(nèi)，L-鳥氨酸產(chǎn)量為 112.3 g/L，對(duì)精氨酸摩爾轉(zhuǎn)化率為 87 %。產(chǎn)品性能：無(wú)副產(chǎn)物，純度高。 

磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine，PS），又稱二酰甘油酰磷酸絲氨酸，是一類普遍存在的磷脂，通常位于細(xì)胞膜的內(nèi)層，尤其是大腦細(xì)胞膜的重要組成成分之一。它能調(diào)控大腦的各項(xiàng)功能正常運(yùn)作，起到調(diào)節(jié)血脂、改善記憶、健腦益智、以及延緩衰老等作用。但天然存在的磷脂酰絲氨酸很少，提取工藝繁雜， 并且安全性受到人們的質(zhì)疑。生物酶法制備磷脂酰絲氨酸具有反應(yīng)條件溫和、環(huán)境友好、產(chǎn)品質(zhì)量好等優(yōu)點(diǎn)，近年來(lái)受到越來(lái)越多的關(guān)注。本研究室通過(guò)基因工程手段，大腸桿菌中異源表達(dá)了磷脂酶 D 基因，以粗話生產(chǎn)磷脂酰絲氨酸。目前，該研究正在進(jìn)行蛋白質(zhì)工程改造及各項(xiàng)優(yōu)化，以提高底物轉(zhuǎn)化率。 

本發(fā)明涉及重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應(yīng)用。獲得重組野生型 cC 的方法是：利用 pGAPZ α A 載體構(gòu)建野生型 cC 的表達(dá)系統(tǒng)；重組野生型 cC 在畢赤酵母 X-33 中表達(dá)；重組野生型 cC 的分離純化。對(duì)重組野生型 cC 對(duì)鰱魚魚糜凝膠劣化抑制作用的檢測(cè)方法是：魚糜樣品的制作；對(duì)所取魚糜樣品進(jìn)行溫浴處理，加重組野生型 cC 和未加 cC 成為對(duì)照組；處理樣品進(jìn)行 SDS-PAGE ，觀察結(jié)果。本發(fā)明驗(yàn)證了重組野生型 cC 可以直接加入魚糜制品中，能明顯抑制魚糜制品的凝膠劣化，在加工過(guò)程中能較好的保持其彈性，且其安全、無(wú)毒，有著良好的應(yīng)用前景

● 項(xiàng)目簡(jiǎn)介：細(xì)菌生物膜是細(xì)菌互相粘連形成的模樣物，對(duì)大多數(shù)抗生素耐藥，其耐藥性比浮游菌可高達(dá)100倍。近年來(lái)細(xì)菌生物膜疾病日益嚴(yán)重、治療難度極大，目前尚無(wú)抗細(xì)菌生物膜藥物上市。YycG/YycF雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)對(duì)細(xì)菌的生長(zhǎng)和生物膜形成具有重要的調(diào)控作用，可以作為理想的藥物靶標(biāo)篩選抗生物膜先導(dǎo)化合物。對(duì)先導(dǎo)化合物優(yōu)化改造，評(píng)價(jià)其藥效，研究候選藥物的藥代動(dòng)力學(xué)特征并對(duì)其安全性進(jìn)行初步評(píng)價(jià)，探討其成藥性，可能產(chǎn)生創(chuàng)新性強(qiáng)、具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的候選新藥。● 應(yīng)用前景：通過(guò)生物信息學(xué)分析，在表皮葡萄球菌全基因組中共發(fā)現(xiàn)了16對(duì)雙組分信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng)。選擇其中一組YycG/YycF 系統(tǒng)中的組氨酸激酶YycG的保守功能域HATPase_c作為候選抗菌藥物靶點(diǎn)，通過(guò)高通量虛擬篩選獲得了具有抑制生物膜作用的小分子化合物，能夠可特異性地作用于葡萄球菌屬等革蘭陽(yáng)性球菌，對(duì)革蘭陰性菌無(wú)抑菌作用，且對(duì)哺乳類細(xì)胞毒性作用低。對(duì)表皮葡萄球菌已形成生物膜中的細(xì)菌具有殺傷作用，同時(shí)也可使細(xì)菌生物膜的結(jié)構(gòu)發(fā)生改變，很好的抑制了生物膜的形成。以其中兩個(gè)小分子化合物作為先導(dǎo)化合物，進(jìn)行結(jié)構(gòu)優(yōu)化改造，已經(jīng)獲得30個(gè)結(jié)構(gòu)新穎的衍生物。通過(guò)表皮葡萄球菌生物膜殺傷實(shí)驗(yàn)證明，其中5個(gè)化合物的MIC，MBC和抑制生物膜濃度均不同程度的優(yōu)于先導(dǎo)化合物。化合物H5-10的MIC，MBC和抑制生物膜濃度分別達(dá)到1.5，3.1，25μM。目前該項(xiàng)目的技術(shù)水平居于國(guó)內(nèi)領(lǐng)先、國(guó)際先進(jìn)水平。本項(xiàng)目已申請(qǐng)并獲得授權(quán)2項(xiàng)國(guó)家發(fā)明專利。

本研究利用腸道organoids 3D培養(yǎng)技術(shù)，發(fā)現(xiàn)精氨酸具有減緩炎性刺激引起的腸道類器官損傷，主要通過(guò)維持腸道干細(xì)胞增殖和潘氏細(xì)胞數(shù)量。