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一、技術(shù)(項(xiàng)目)內(nèi)容簡(jiǎn)介 德國(guó)拜爾醫(yī)藥公司自1998年起生產(chǎn)和銷售“一次施用一年有效”的草坪花卉專用控釋肥(WUXAL)的消息在肥料界引起了不小的轟動(dòng)。其產(chǎn)品的市場(chǎng)零售價(jià)高達(dá)260元/kg(估計(jì)原材料成本4元/kg)，產(chǎn)品的各種養(yǎng)分成分和含量均在產(chǎn)品包裝盒上顯著標(biāo)識(shí)。值得深思的問題是，該肥料應(yīng)用了什么技術(shù)才使得它的利潤(rùn)空間如此巨大呢？ 針對(duì)草坪草和花卉植物對(duì)養(yǎng)分需求的特殊性，運(yùn)用土壤中氮素轉(zhuǎn)化和植物體內(nèi)氮素營(yíng)養(yǎng)的理論，通過生物化學(xué)技術(shù)—

第二代促血小板生成素是采用重組技術(shù)將促血小板生成素模擬肽和長(zhǎng)效載體蛋白人血清白蛋白連接形成融合蛋白，使它們互不影響各自的結(jié)構(gòu)，而促血小板生成素模擬肽部分可維持正常的生物學(xué)活性，且腎臟對(duì)它的清除率降低，體內(nèi)的半衰期延長(zhǎng)。具有有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)，已獲得國(guó)家發(fā)明專利授權(quán) 2 項(xiàng)，并成功進(jìn)行 PCT 申請(qǐng)，已獲歐盟專利授權(quán) 1 項(xiàng)，可申報(bào)治療用生物制品注冊(cè)分類 1 類新藥。化療、骨髓移植、白血病及惡性淋巴瘤等多種疾病均可誘導(dǎo)血小板減少癥，嚴(yán)重者危及生命。盡管已上市多種藥物可用于這一疾病的治療，但是，目前臨床上仍

植物紅細(xì)胞凝集素，學(xué)名Phytohemagglutinin-E （PHA-E)，參考產(chǎn)品為Sigma公司產(chǎn)品，貨號(hào)為L(zhǎng)8629。 凝集素是從豆科植物種子中提取的一種含糖蛋白質(zhì)，植物凝集素具有刺激外周血淋巴細(xì)胞RNA合成和有絲分裂，促進(jìn)免疫反應(yīng)，使細(xì)胞凝聚，腫瘤細(xì)胞失活，以及誘發(fā)人外周血淋巴細(xì)胞產(chǎn)生抗癌淋巴因子等生物學(xué)活性。PHA是由E、L兩種亞基組成的四聚體蛋白質(zhì)的混合物，按其亞基組成可分為L(zhǎng)4、L3E、L2E2、LE3、E4具有相同物化性質(zhì)和不同生物學(xué)活性的同工凝集素。其中紅細(xì)胞凝集素（Erythrohemagglutinin ，PHA-E）含有4個(gè)相同的E亞基，具有最強(qiáng)的紅血球凝集功能，沒有白細(xì)胞凝集能力。 產(chǎn)品-紅細(xì)胞凝集素是由英國(guó)紅蕓豆（俗稱紅腰豆，屬于常見雜糧）為原料，采用親和純化技術(shù)制備得到，屬于植物提取蛋白質(zhì)，產(chǎn)品為白色粉末，安全無(wú)毒。目前，紅細(xì)胞凝集素主要作為體外診斷試劑的重要組成部分，應(yīng)用于去除臨床血液樣本中的紅細(xì)胞。使得最終檢驗(yàn)結(jié)果快速準(zhǔn)確，有效避免了傳統(tǒng)采用離心方法分離血漿和紅血球中出現(xiàn)的細(xì)胞破裂等問題，因此近年來(lái)廣泛用于臨床和科研上凝集去除血液中的紅細(xì)胞。 我們建立了一套低成本快速的分離純化工藝，能特異性純化得到PHA-E，同時(shí)生產(chǎn)成本能下降至進(jìn)口同類商品售價(jià)的5%以下。該工藝不需要太多設(shè)備，普通實(shí)驗(yàn)室即可完成200mg-1000mg規(guī)模生產(chǎn)。產(chǎn)品質(zhì)量已經(jīng)得到國(guó)外公司的肯定。目前國(guó)內(nèi)尚無(wú)該產(chǎn)品銷售。

成果創(chuàng)新點(diǎn) 本項(xiàng)目開發(fā)了 5 種不同結(jié)構(gòu)的 IL-15/IL-15RαSu 融合 蛋白，包括 IL-15/IL-15RαSu-Fc 單體，IL-15/IL-15RαSu 雙體（類似 ATL803），IL-15/IL-15RSu 異源二聚體（類似 hetIL-15 ）， 以 及 IL-15-Linker-IL-15RSu ， IL-15RSu-Linker-IL-15。主要功能是促進(jìn) T 細(xì)胞和 NK 細(xì)

本項(xiàng)目開發(fā)了 5 種不同結(jié)構(gòu)的 IL-15/IL-15RαSu 融合 蛋白，包括 IL-15/IL-15RαSu-Fc 單體，IL-15/IL-15RαSu 雙體（類似 ATL803），IL-15/IL-15RSu 異源二聚體（類似 hetIL-15 ）， 以 及 IL-15-Linker-IL-15RSu ， IL-15RSu-Linker-IL-15。主要功能是促進(jìn) T 細(xì)胞和 NK 細(xì) 胞的增殖、活化和維持。 目 前 ， 為了提高 IL-15 的活性，主要是開發(fā) IL-15/IL-15Rα 復(fù)合物。其中， IL-15/IL-15RαSu-Fc 單 體具有較強(qiáng)誘導(dǎo) NK 和 CTL 細(xì)胞增生和活化作用，同時(shí)具有 較長(zhǎng)半衰期，達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平。IL-15/IL-15RαSu-Fc （ALT-803）已進(jìn)入臨床Ⅱ期實(shí)驗(yàn)，且在 2017 年獲得了 FDA 的 Fast Track Designation 。 Novartis 開發(fā)的 Heterodimeric IL-15/sIL-15Rα（hetIL-15）也已進(jìn)入臨 床 I 期實(shí)驗(yàn) 

本發(fā)明涉及辣椒疫霉病菌(Phytophthora capsici)中的幾丁質(zhì)合酶。其氨基酸序列為與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列在相似性在90％以上，優(yōu)選在95％以上，更優(yōu)選在98％以上且具有與如SEQ ID No.4所示的氨基酸序列相同功能的氨基酸序列。所述辣椒疫霉病菌的幾丁質(zhì)合酶的活性水平能夠調(diào)節(jié)活性孢子囊和活性游動(dòng)孢子的產(chǎn)量從而影響辣椒疫霉病菌的致病力或寄主的發(fā)病程度。

亞氨基二乙酸(IDA)是生產(chǎn)除草劑草甘膦的重要中間體。它也被用于生產(chǎn)新型兩性鉻絡(luò)合 品紅染料、漂白活化劑、順鉑類抗癌藥物等。目前生產(chǎn)亞氨基二乙酸主要有化學(xué)合成法和生物 合成法。利用高效、高酶活、穩(wěn)定的產(chǎn)腈水解酶生產(chǎn)亞氨基二乙酸，符合綠色化學(xué)的發(fā)展方 向，有著化學(xué)方法無(wú)可比擬的優(yōu)越性。本項(xiàng)目篩選到一株高效、高酶活、穩(wěn)定的產(chǎn)腈水解酶的 菌株，一步水解得到所需的亞氨基二乙酸。 本項(xiàng)目通過篩選適合的菌株、對(duì)菌株發(fā)酵優(yōu)化以及整個(gè)催化過程的優(yōu)化，最后分離純化得 到亞氨基二乙酸。整個(gè)反應(yīng)過程條件溫和、操作簡(jiǎn)單、無(wú)副產(chǎn)物產(chǎn)生。

成果描述：本項(xiàng)目來(lái)源于國(guó)家863計(jì)劃項(xiàng)目成果，核心技術(shù)已獲得國(guó)家發(fā)明專利。復(fù)合酶皮膠原處理劑系列產(chǎn)品有A-G7個(gè)系列、12個(gè)品種，這些酶制劑可以分別用于以下不同的用途：（1）豬皮的臀部處理（復(fù)合酶皮膠原處理劑A和復(fù)合酶皮膠原處理劑B）；（2）牛皮、山羊皮的頸紋處理（復(fù)合酶皮膠原處理劑C）；（3）豬皮、山羊皮全皮脫毛處理（復(fù)合酶皮膠原處理劑D），這種脫毛完全不同于文件1的有溫有浴酶脫毛，它是通過涂刷在皮的肉面進(jìn)行脫毛的；（4）水解動(dòng)物皮提取膠原（復(fù)合酶皮膠原處理劑E）；（5）豬皮、牛皮以及羊皮的浸酸軟化和藍(lán)坯革處理（復(fù)合酶皮膠原處理劑F）；（6）豬、牛、羊皮的軟化處理（復(fù)合酶皮膠原處理劑G）。經(jīng)批量生產(chǎn)并應(yīng)用結(jié)果表明，本項(xiàng)目系列產(chǎn)品，綜合性能優(yōu)于或接近國(guó)內(nèi)外同類產(chǎn)品，技術(shù)成熟。市場(chǎng)前景分析：1.應(yīng)用領(lǐng)域：制革、制裘、生物醫(yī)藥、生物材料等。 2.市場(chǎng)需求分析：國(guó)內(nèi)外同類產(chǎn)品屈指可數(shù)，故本產(chǎn)品極具市場(chǎng)優(yōu)勢(shì)。調(diào)查表明，本項(xiàng)目產(chǎn)品在國(guó)內(nèi)市場(chǎng)具有較強(qiáng)的競(jìng)爭(zhēng)優(yōu)勢(shì)，據(jù)統(tǒng)計(jì)國(guó)內(nèi)市場(chǎng)的年需求量為30萬(wàn)噸，潛在市場(chǎng)年需求量12萬(wàn)噸。目前，國(guó)內(nèi)80%以上的市場(chǎng)被國(guó)外同類產(chǎn)品所占領(lǐng)，而國(guó)外同類產(chǎn)品價(jià)格在50-200元/kg不等，國(guó)內(nèi)同類產(chǎn)品雖少，價(jià)格亦不菲。本項(xiàng)目產(chǎn)品與國(guó)外相比，平均價(jià)格僅為國(guó)外的1/3至1/4，而性能不相上下。與同類成果相比的優(yōu)勢(shì)分析：1.外觀：白色、微黃色或黃色粉末狀顆粒； 2.pH值：2.0-11.0（1%水溶液）； 3.活力單位：1000-3000u/mL。 國(guó)際先進(jìn)。

本發(fā)明目的是提供一種產(chǎn)低溫堿性蛋白酶的菌株，為芽孢桿菌(Bacillus sp.)WFWBac?1，于2015年4月9日保藏在位于北京市朝陽(yáng)區(qū)北辰西路1號(hào)院3號(hào)的中國(guó)科學(xué)院微生物研究所的中國(guó)微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，保藏編號(hào)為CGMCC NO.10703。本發(fā)明篩選的菌株用于發(fā)酵生產(chǎn)堿性蛋白酶。本發(fā)明篩選的菌株性狀優(yōu)良、產(chǎn)蛋白酶活力高；該菌株在以蔗糖為碳源，蛋白胨為氮源，培養(yǎng)基初始pH 9.0，培養(yǎng)溫度25℃，接種量為10％的條件下150rpm振蕩培養(yǎng)48h時(shí)，所產(chǎn)蛋白酶活性最高能達(dá)到995U/mL。所制備的酶用于制備洗衣液或洗潔精。

活性物質(zhì)緩釋膠囊是近年來(lái)研究最多的藥物活性物質(zhì)制劑技術(shù), 它具有延長(zhǎng)藥物作用時(shí)間、定向靶位給藥、減少藥物毒副作用等優(yōu)點(diǎn)，在現(xiàn)代 藥物制劑中受到了廣泛的應(yīng)用。納米壁材的研制是在微膠囊的基礎(chǔ)上，將壁材 的尺寸進(jìn)一步減小，增大比表面積，進(jìn)一步提高包埋率和運(yùn)載效果。但國(guó)內(nèi)外 對(duì)于納米包埋技術(shù)的研究多集中在以殼聚糖、海藻酸鈉、合成樹脂等材料作為 壁材的開發(fā)上，這類壁材價(jià)格相對(duì)較貴，不利于商業(yè)化推廣。國(guó)內(nèi)外未發(fā)現(xiàn)有 利用生物酶法制備活性物質(zhì)緩釋膠囊的相關(guān)報(bào)道。 該技術(shù)以淀粉納米顆粒為壁材對(duì)包埋活性物質(zhì)進(jìn)行包埋，制備納米緩釋膠 囊。淀粉納米顆粒利用生物酶法制備，生產(chǎn)成本低、周期短、不易造成環(huán)境污 染，并且納米顆粒集中在 50-120nm 左右，粒徑小、比表面積大，有利于活性物 質(zhì)的包埋，包封效果好。經(jīng)過中試研究，該技術(shù)制備的淀粉納米顆粒活性物質(zhì) 緩釋膠囊在胃部的降解率極低，大部分活性物質(zhì)在腸道內(nèi)消化吸收，有效的提 高了活性物質(zhì)的生物利用率。 生產(chǎn)條件及經(jīng)濟(jì)效益預(yù)測(cè)：納米顆粒緩釋膠囊的初步市場(chǎng)估價(jià)為 10-100 萬(wàn) 元/噸。項(xiàng)目投產(chǎn)后，年加工量 100 噸的生產(chǎn)線，估算投資額為 3000 萬(wàn)，可產(chǎn) 生經(jīng)濟(jì)效益 4250 萬(wàn)元，實(shí)現(xiàn)利稅 2000 萬(wàn)元。年加工量 200 噸的納米顆粒緩釋 膠囊生產(chǎn)線，估算投資額為 5000 萬(wàn)，可產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益 8500 萬(wàn)元，實(shí)現(xiàn)利稅 4000 萬(wàn)元。年加工量 400 噸的納米顆粒緩釋膠囊生產(chǎn)線，估算投資額為 7000 萬(wàn)，可青島農(nóng)業(yè)大學(xué)科技成果介紹 2017 －54－ 產(chǎn)生經(jīng)濟(jì)效益 1.5 億元，實(shí)現(xiàn)利稅 8000 萬(wàn)元。因此，該項(xiàng)目盈利性強(qiáng)、投資回 報(bào)率高、貸款償還期短，經(jīng)濟(jì)效益上可行。