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1、成果簡介： 本發(fā)明屬于材料領(lǐng)域，具體涉及一種具有交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的無皂含氟聚丙烯酸酯核殼乳液的制備方法。具體說，是在沒有游離的乳化劑存在的條件下，采用種子（核殼）乳液聚合的方法，使含氟丙烯酸酯單體與交聯(lián)劑在無皂交聯(lián)聚丙烯酸酯乳膠粒子表面聚合并交聯(lián)，形成具有交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的無皂含氟核殼聚丙烯酸酯乳液。本專利制備的具有交聯(lián)網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的無皂含氟核殼聚丙烯酸酯乳液在建筑涂料加工或汽車電泳漆加工中具有廣泛的應(yīng)用。由于在殼部分引入了含氟丙烯酸酯單體，提高了聚丙烯酸酯乳膠膜的耐水性和自潔性。具有制作工藝

該材料具有雙功能基團(tuán)，能同時富集糖肽和磷酸化肽，同時具有體積排阻的作用，該方法合成簡便，重復(fù)性好，具有較好的富集效果。

本發(fā)明公開了抗邊緣無漿體MSP5蛋白的單克隆抗體及其應(yīng)用.本發(fā)明采用大腸桿菌表達(dá)的邊緣無漿體MSP5蛋白純化后作為免疫原,免疫小鼠,經(jīng)細(xì)胞融合,篩選得到一株穩(wěn)定分泌抗MSP5蛋白單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株,其微生物保藏號為:CGMCCNo.3205.由該雜交瘤細(xì)胞株所分泌的單克隆抗體能與邊緣無漿體MSP5發(fā)生反應(yīng),同時能與牛邊緣無漿體和羊邊緣無漿體發(fā)生特異性反應(yīng),而與霉形體,新孢子蟲及附紅細(xì)胞體等不發(fā)生反應(yīng).本發(fā)明單克隆抗體可用于鑒別邊緣無漿體和其它相關(guān)的病原,為建立一種快速,簡易,準(zhǔn)確的診斷方法以及在免疫機(jī)制研究,免疫功能檢測,檢測方法的建立等方面的研究提供物質(zhì)基礎(chǔ).

圍繞蠶繭絲廢棄物的循環(huán)利用、蠶絲蛋白增值關(guān)鍵技術(shù)、蠶絲蛋白醫(yī)用功能化等重要科學(xué)問題開展研究并取得了重要突破：1）闡明了蠶絲蛋白結(jié)構(gòu)特點(diǎn)及其分子質(zhì)量調(diào)控關(guān)鍵要素，實(shí)現(xiàn)了不同分子質(zhì)量絲素蛋白和絲膠蛋白的規(guī)模化生產(chǎn)；2）解決了絲素蛋白生物材料表面活化與醫(yī)用功能化關(guān)鍵技術(shù)，研發(fā)了蠶絲11蛋白人工皮膚、多孔支架、骨組織修復(fù)材料；3）實(shí)現(xiàn)了蠶絲蛋白多元化利用，研發(fā)了蠶絲蛋白吸水保水材料、涂覆化纖新功能材料、護(hù)膚產(chǎn)品等。

本發(fā)明公開了一類蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)智能預(yù)測模型構(gòu)造方法，利用多層遞階、逐步求精的結(jié)構(gòu)模型集成。此模型CPM融合了原創(chuàng)型KAAPRO方法、新型同源性分析方法、改進(jìn)型SVM方法等;CPM打破了傳統(tǒng)的單一物化屬性分析或單一結(jié)構(gòu)序列分析的技術(shù)線路，而是采取了結(jié)構(gòu)序列分析與物化屬性分析相結(jié)合的優(yōu)選線路，確保了模型整體的優(yōu)化與預(yù)測精度的同時具有更好的普適性; CPM 采用高起點(diǎn)的alpha/beta庫挖掘;并以領(lǐng)域知識與背景知識貫穿;CPM能夠很好地對偏alpha/beta型蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)進(jìn)行預(yù)測，取得86%的最高精度(同類最高達(dá)81%)。

本發(fā)明涉及TNFSF15蛋白在制備治療黑色素瘤藥物中的用途，本發(fā)明發(fā)現(xiàn)TNFSF15不但可以抑制內(nèi)皮細(xì)胞生長，誘導(dǎo)其凋亡，還可以抑制小鼠黑色素瘤細(xì)胞B16的生長和遷移，誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。本發(fā)明發(fā)現(xiàn)應(yīng)用TNFSF15聯(lián)合化療藥物治療黑色素瘤時，TNFSF15不但可以通過抑制腫瘤血管的生成來抑制腫瘤的生成，而且可以通過誘導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)化療藥物對于黑色素瘤細(xì)胞的殺傷作用。最后，我們發(fā)現(xiàn)TNFSF15在與常用于治療黑色素瘤的化療藥物順鉑的聯(lián)合應(yīng)用時，可以增強(qiáng)順鉑治療黑色素瘤的效果。

本發(fā)明公開了一種納米花生蛋白高分子復(fù)合膜及其制備方法，包括以下步驟：(1)配制濃度為4mg/mL～12mg/mL的花生分離蛋白水溶液，調(diào)節(jié)溶液的pH為8?9靜置1?2h；向花生分離蛋白水溶液中逐滴加入無水乙醇，至混合溶液中無水乙醇的體積分?jǐn)?shù)為40?80％，靜置15?30min，再加入交聯(lián)劑，靜置交聯(lián)反應(yīng)14?20h，濃縮、干燥，得到納米花生蛋白顆粒；(2)將基質(zhì)、甘油用蒸餾水溶解，70?90℃水浴15?30min，冷卻，得到基質(zhì)溶液；(3)將納米花生蛋白顆粒用蒸餾水溶解，得到納米花生蛋白顆粒溶液，將其移入基質(zhì)溶液中，調(diào)節(jié)溶液的pH為10?12，真空脫氣5?10min，制膜，干燥，即得。本發(fā)明制備的納米花生蛋白高分子復(fù)合膜的機(jī)械性能和阻水性能得到了顯著的改善，可廣泛應(yīng)用于包裝工業(yè)。

本發(fā)明公開了一種核定位蛋白 1(Nulp1)在治療心肌肥厚中的功能及應(yīng)用，屬于基因的功能與應(yīng)用 領(lǐng)域。本發(fā)明確定了 Nulp1 的表達(dá)與心肌肥厚之間的相互關(guān)系，研究結(jié)果表明在發(fā)生心肌肥厚的模型中， Nulp1 的表達(dá)和正常組相比顯著降低;抑制 Nulp1 表達(dá)顯著促進(jìn)了心肌肥厚、纖維化，惡化心功能，促 進(jìn) Nulp1 過表達(dá)則顯著抑制了心肌肥厚、纖維化，保護(hù)心功能。因此，Nulp1 可作為靶基因，用于篩選 保護(hù)心臟功能、抗心臟纖維化和/或預(yù)防、緩解和/或治療心肌肥厚的藥物，用于制備保護(hù)心臟功能、抗 心肌肥厚和/或預(yù)防、緩解和/或治療心肌肥厚的藥物，為心肌肥厚的治療提供了一條有效的新途徑。

本發(fā)明涉及一種絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的快速成型方法，目前還沒有一種制備條件溫和，生產(chǎn)過程綠色環(huán)保的絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜的成型方法。本發(fā)明將絲膠蛋白溶液干燥得絲膠蛋白膜；該膜浸入體積濃度35-45%乙醇溶液中，7-15min后取出得乙醇處理絲膠蛋白膜；將乙醇處理絲膠蛋白膜置于濃度為100mmol/L的CaCl2溶液中浸漬處理5-20s得浸漬處理絲膠蛋白膜，再置于濃度為60mmol/L的Na2HPO4溶液中浸漬處理5-20s得一次交互浸漬處理絲膠/羥基磷灰石復(fù)合膜，再重復(fù)用CaCl2溶液和Na2HPO4溶液浸漬處理得絲膠蛋白/羥基磷灰石復(fù)合膜。本發(fā)明制備條件溫和，生產(chǎn)周期短和綠色環(huán)保。

01.成果簡介   “相”是指物質(zhì)系統(tǒng)中物理、化學(xué)性質(zhì)完全相同，與其他部分具有明顯分界面的均勻部分。“相變”是指物質(zhì)從一種相轉(zhuǎn)變?yōu)榱硪环N相的過程。與固、液、氣三態(tài)對應(yīng)，物質(zhì)有固相、液相、氣相。有研究表明，相變機(jī)制也廣泛存在于生物細(xì)胞中，且在細(xì)胞生命周期的時空調(diào)控等方面發(fā)揮著重要的生物學(xué)功能。當(dāng)溶液中的多價大分子與其多價配體互作時，容易產(chǎn)生更大的復(fù)合物，后者的溶解度一般會降低，從而從普通溶液相分離出來，形成一個復(fù)合物富集的獨(dú)立的液態(tài)相，這個轉(zhuǎn)變過程被稱為“液-液分離相變”（即，“相變”）。 蛋白質(zhì)翻譯后修飾是指蛋白質(zhì)翻譯完成后，發(fā)生在蛋白質(zhì)的特定氨基酸殘基上的共價修飾過程，是蛋白質(zhì)生物合成的步驟之一。目前，已知存在300多種翻譯后修飾，常見的有甲基化、乙酰化、磷酸化、泛素化、糖基化修飾等，與蛋白質(zhì)翻譯后修飾相反的修飾過程為蛋白質(zhì)去修飾，如去甲基化、去乙酰化、去磷酸化、去泛素化、去糖基化等。 本項(xiàng)成果是一種檢測翻譯后/復(fù)制后/轉(zhuǎn)錄后修飾的蛋白質(zhì)/DNA/RNA與其修飾閱讀器間相互作用的成套試劑，由A、B、C和D四種試劑組成；（1）A由名稱為R的生物分子和名稱為X的蛋白質(zhì)連接而成；（2）B含有名稱為L的生物分子；R與L相同或不同且二者間具有相互作用，R與L相互作用后發(fā)生相變；（3）C為由C單體形成的多聚體，C單體由名稱為mc的單體、名稱為甲的報告基團(tuán)和名稱為YC的生物分子連接得到的分子，大于等于兩個的mc能形成多聚體；（4）D由名稱為XL的帶有修飾的蛋白質(zhì)和名稱為YD的生物分子連接而成；YC與YD間具有相互作用。通過該成套試劑及基于該成套試劑創(chuàng)建的多價招募系統(tǒng)，利用相變機(jī)制實(shí)現(xiàn)了互作蛋白和配體在相變液滴中的高度富集，將原本較弱的互作信號強(qiáng)烈放大，使其易于檢測。02.應(yīng)用前景 本項(xiàng)成果可以為檢測經(jīng)翻譯后/復(fù)制后/轉(zhuǎn)錄后修飾的蛋白質(zhì)/DNA/RNA與其修飾閱讀器間的相互作用提供一種全新的技術(shù)手段。該技術(shù)尤其適合高通量篩選修飾酶或去修飾酶的抑制劑或促進(jìn)劑。03.知識產(chǎn)權(quán) 本項(xiàng)成果已申請1項(xiàng)發(fā)明專利。04. 團(tuán)隊(duì)介紹 本項(xiàng)成果負(fù)責(zé)人為清華大學(xué)研究員、博士生導(dǎo)師、清華大學(xué)結(jié)構(gòu)生物學(xué)高精尖創(chuàng)新中心成員、清華-北大生命科學(xué)聯(lián)合中心成員、中組部“青千”基金獲得者，主要從事“相變”相關(guān)領(lǐng)域的研究，并探索能夠廣泛應(yīng)用于鑒定生物大分子互作及互作調(diào)控物篩選的新技術(shù)。研究成果發(fā)表于多個國際頂級權(quán)威期刊，申請專利多項(xiàng)。05.合作方式 專利許可、合作開發(fā)。06.聯(lián)系方式 zhangxinrui@tsinghua.edu.cn