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本課題研發用于海洋環境（海水及水產品）中病毒、致病菌等病 原微生物、重點針對可能引起人類疾病的細菌和病毒（如總桿菌數、 大腸桿菌、糞鏈球菌、產氣莢膜梭菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球 菌、腺病毒、腸道病毒、甲肝病毒、副溶血弧菌、創傷弧菌、沙門氏 菌及李斯特菌）快速檢測的分子生物技術，為研制用于這些微生物的 現場監測手段和設備奠定理論和技術基礎。檢測方法采用基因芯片檢 測、蛋白質檢測和聚合酶鏈式反應（PCR）檢測三種

本課題研發用于海洋環境（海水及水產品）中病毒、致病菌等病原微生物、重點針對可能引起人類疾病的細菌和病毒（如總桿菌數、大腸桿菌、糞鏈球菌、產氣莢膜梭菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌、腺病毒、腸道病毒、甲肝病毒、副溶血弧菌、創傷弧菌、沙門氏菌及李斯特菌）快速檢測的分子生物技術，為研制用于這些微生物的現場監測手段和設備奠定理論和技術基礎。檢測方法采用基因芯片檢測、蛋白質檢測和聚合酶鏈式反應（PCR）檢測三種。

本發明提出一種秸稈還田纖維分解性生防真菌及菌劑和應用，其中該菌株F7JX993849的分類命名為綠木霉Trichoderma?virens，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，其保藏編號為CGMCC?No.3.17613。本發明的綠木霉Trichoderma?virens?F7JX993849對農作物秸稈中的纖維素、半纖維素和果膠組分同時具有較強的分解能力。其次，本發明的綠木霉Trichoderma?virens?F7JX993849可以拮抗植物病源菌入侵，具有生物防治功能。再次，本發明的秸稈還田纖維分解性生防真菌所制成的菌劑，可以解決一般秸稈腐熟劑在應用過程中效果不理想、不穩定的問題，具有良好的應用價值。

該成果獲 2013 年度教育部科學技術進步獎一等獎， 2017 年國家科技進步二等獎。成果探明了我國食源性彎曲菌、沙門菌、單核細胞增生李斯特菌和副溶血性弧菌在全產業鏈的定量流行病學新特征，創建了其快速定性、定量檢測新技術，菌種庫和分子溯源數據庫以及定量風險評估體系，建立了風險預測模型和軟件，定量評估了雞肉彎曲菌污染對我國人群的健康風險；創制了新型消毒制劑、有機酸和低溫控制技術和新型系列防控疫苗等病原菌干預技術，形成了覆蓋產業鏈全程的食源性病原菌集成防控技術體系，實現了傳播和風險的有效防控。

本發明涉及一種海帶內生真菌及其在制備生物活性提取物方面的應用，所述海帶內生真菌的菌種保藏信息為：保藏單位名稱：中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏單位地址：北京市朝陽區北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所；保藏日期：2018年1月2日；保藏編號：CGMCC No.15181；分類命名：鏈格孢Alternaria sp.W-1。

本發明涉及一種海洋真菌發酵提取物及其作為抗老年癡呆藥物的應用，所述提取物由如下步驟制備：(1)在無菌條件下，將海洋真菌Alternaria sp.W?1接種到PD液體培養基中，恒溫搖床振蕩培養，溫度為25?30℃，搖床轉速為150?180r/min，培養時間為2?4d，得種子液；(2)將步驟(1)得到的種子液接種到察氏培養基中，培養基pH為4.0?8.0，接種量為5?20％，培養溫度為22?34℃，培養時間為6?14d，得發酵物；(3)將步驟(2)得到的發酵物用3?5層無菌紗布過濾，得濾液，經旋轉蒸發儀濃縮后，用乙酸乙酯萃取2?4次，合并有機相，經旋轉蒸發儀濃縮即得所述提取物。

機制研究發現高濃度優選化合物MW5破壞真菌細胞膜并誘導細胞產生ROS進而導致細胞死亡，低濃度MW5能破壞藥物外排泵MDR1功能，進而增加氟康唑胞內濃度進而逆轉其耐藥性。

成果描述：項目針對豬雞病原菌耐藥性導致細菌病難防控、用藥量大、產品藥殘的關鍵技術難題，取得了重大理論和方法創新成果。 項目揭示了我國近12年豬雞病原細菌耐藥性變化規律，建立菌種庫和耐藥數據庫，創立了5種細菌耐藥基因分子檢測新方法；改進了7種動物專用抗生素及其制劑的生產工藝和質量；創制了非生素免疫增強劑4種。獲國家2類新獸證書6個，3類2個。獲國家發明專利12項，實用新型專利1項。主編參編專著6部，發表論文123篇，包括本專業權威SCI論文AAC(IF:4.672)，JAC(IF:4.659)等35篇。成果應用使豬雞抗生素用量減少30%-70%，細菌病降低50%，節省用藥成本30%，為有效控制豬雞細菌感染及耐藥，減少抗生素使用，保障公共衛生和食品安全提供了新的理論和技術。市場前景分析：應用領域：本項目的應用領域主要為獸藥、疫苗生產企業以及大中型豬雞養殖生產企業。可共同企業合作開發新型獸藥、生物制品等，同時也可為大中型豬雞養殖生產企業提供技術支撐，有效降低抗生素的使用，保障產品安全，打造高品質放心品牌。市場需求：豬雞細菌性疾病嚴重危害公共衛生和食品安全，如豬鏈球菌、豬雞沙門氏菌引起人感染發病的公共衛生事件。在規模化養殖條件下，細菌性疾病呈多發趨勢如大腸桿菌等，畜禽因細菌性疾病致死或生產性能下降等造成全國年直接經濟損失400億元（畜牧業年鑒2010）。病原細菌產生耐藥性是致細菌疾病難控治、用藥量大（每年畜禽抗生素原料藥用量多達10萬噸）、產品藥殘高的關鍵技術難題，如近年來出現耐多種抗生素的結核桿菌、金黃葡萄球菌、大腸桿菌等“超級耐藥菌”，引起了極大關注。本項目通過產學研結合12年聯合攻關，創立了細菌耐藥基因的分子檢測新方法，揭示了細菌耐藥性變化規律，創新了耐藥性控制理論和應用技術，并在安全高效新獸藥研發中得到廣泛應用（圖1），可為保障我國豬雞養殖健康、公共衛生和產品安全提供了有力的科技支撐，其市場需求極大。與同類成果相比的優勢分析：“該項目已在國內多個省市規模化豬場，雞場、示范區、飼料廠、獸藥廠等進行了推廣應用，成果應用效益顯著。研究成果豐富了病原菌耐藥基因的基礎理論研究，為病原菌的耐藥性分子檢測和監測提供了新的技術手段，項目選題技術路線合理，研究手段先進，數據可靠，結果可信，具有先進性、創新性和實用性的特點。其成果總體水平居國內領先、國際先進，部分成果處于國際領先水平”。

水是生命得以存在的必要條件，它使我們人類得以繁衍生息，人 類的生活、生產、娛樂都離不開水。它同時也是許多病原微生物滋生、 傳播的場所和載體，這些病原微生物一旦進入人體則將可能使人患病、 甚至導致死亡，嚴重威脅著人類健康。隨著社會的發展和生活水平的 提高，人們越來越關心自身的健康問題，而各種水體（包括生活飲用水，江河湖泊，游泳場館等）的安全問題也日益成為人們關注的熱點。 因此，為了保護人們的身體健康，對各種水體尤其是飲用水中病原微 生物的檢測是十分必要和亟需的。本項目旨在建立水體中主要病原微 生物特異分子標識庫，并以此為基礎建立快速檢測技術，以實現對包 括生活飲用水在內的各種水體中主要病原微生物（致病性細菌和原生 動物等）的迅速、準確的檢測，為人們的用水安全和水質狀況的評估 提供依據。 應用價值： 根據我國現行飲用水水質標準及 WHO、USEPA 和歐盟的相關規 定，確定芯片的檢測范圍為 12 種細菌、1 種鉤端螺旋體和 2 種原生 蟲：金黃色葡萄球菌，嗜肺軍團菌，糞腸球菌，屎腸球菌，肺炎克雷 伯氏菌，銅綠假單胞菌，親水氣單胞，大腸桿菌/志賀氏菌，小腸結腸 炎耶爾森氏菌，霍亂弧菌，副溶血弧菌，沙門氏菌，鉤端螺旋體，賈 第鞭毛蟲，隱孢子蟲。

課題進展按計劃進行，完成了240株檢測范圍內和檢測范圍外近緣菌株的收集；對29株軍團菌、17株鉤端螺旋體和32株克雷伯的靶基因序列破譯和序列分析；完成了探針篩選及終型芯片點制；進行了105份模擬樣品的檢測實驗；進行了芯片判讀系統Bactarray軟件的初步開發；初步建立了芯片生產質量控制體系；課題組額外進行了嗜肺軍團菌3，6，13型的O抗原破譯，并完成了其序列分析；申請發明專利2項，發表SCI 論文2篇。