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本課題發(fā)明一種針對(duì)臨床液相標(biāo)本中的微生物進(jìn)行快速濃縮富集的方法和試劑，可以明顯地提高臨床標(biāo)本中微生物檢測(cè)的陽(yáng)性率。 本方法首先通過(guò)磁珠吸附的方式，將臨床液體樣本（尿液、胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等）中細(xì)菌、真菌或病毒特異性結(jié)合于磁珠上，無(wú)需高速離心，從而實(shí)現(xiàn)病原體的富集；再通過(guò)對(duì)細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)、染色、分子生物學(xué)或質(zhì)譜檢測(cè)，或者對(duì)病毒進(jìn)行免疫熒光或分子生物檢測(cè)，最終對(duì)細(xì)菌、真菌或病毒進(jìn)行鑒定。對(duì)臨床標(biāo)本中的細(xì)菌、真菌或病毒進(jìn)行富集，提高了后續(xù)鑒定時(shí)病原體的初始量，從而極大地提高了鑒定的陽(yáng)性率。 本產(chǎn)品可以迅速將5～50ml液相樣本中微生物濃縮至50～200µl樣本中，在磁性環(huán)境下可以輕松實(shí)現(xiàn)臨床標(biāo)本中細(xì)菌、真菌或病毒的濃縮，無(wú)需離心，減少了由于離心產(chǎn)生的氣溶膠所帶來(lái)的潛在生物安全隱患。本方法操作簡(jiǎn)單、無(wú)需復(fù)雜儀器、耗時(shí)短、在源頭顯著提升臨床液相樣本中病原微生物檢測(cè)的靈敏性。

本實(shí)用新型公開(kāi)了一種便攜式動(dòng)物病原微生物快速檢測(cè)箱，包括上蓋、箱體和工具盒，所述箱體上端設(shè)有上蓋，所述上蓋頂端設(shè)有提手，所述上蓋頂端表面設(shè)有光伏組件，所述箱體后端設(shè)有拉桿，所述拉桿頂端設(shè)有拉手，所述箱體左端外側(cè)設(shè)有工具盒，所述箱體內(nèi)設(shè)有冷藏區(qū)和保溫區(qū)，所述冷藏區(qū)內(nèi)側(cè)四周均設(shè)有多個(gè)制冷塊和紫外線(xiàn)燈珠，所述保溫層底端設(shè)有儲(chǔ)水腔，所述儲(chǔ)水腔內(nèi)設(shè)有電加熱裝置，所述冷藏區(qū)和保溫區(qū)內(nèi)均設(shè)有試管架，所述上蓋底端設(shè)有密封層，所述箱體底端四角均設(shè)有滾輪，所述光伏組件與蓄電池電連接。本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單，節(jié)能環(huán)保，操作簡(jiǎn)單、便攜性好，大大提高了樣品的存儲(chǔ)效果，可在現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)，確保檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性。

 乙肝病毒是我國(guó)肝炎、肝硬化與肝癌的主要原因。本項(xiàng)目率先提出利用納米粒子的特殊效應(yīng)來(lái)解決病原體偵檢的靈敏度、特異性與通量的關(guān)鍵技術(shù)問(wèn)題，對(duì)實(shí)現(xiàn)這些病原微生物早診斷與療效監(jiān)測(cè)具有十分重大的意義。 通過(guò)本項(xiàng)目實(shí)施，取得了如下創(chuàng)新成果：1. 研發(fā)了磁性納米粒子與量子點(diǎn)標(biāo)記的層析芯片，研制了對(duì)磁信號(hào)與光信號(hào)進(jìn)行定量檢測(cè)的層析芯片閱讀儀，實(shí)現(xiàn)了抗原或抗體的定性、定量多指標(biāo)同步檢測(cè)；2. 建立了量子點(diǎn)標(biāo)記熒光偏振技術(shù)，篩選出3 個(gè)HBV sAgB 細(xì)胞表位；篩選出一對(duì)前S1 區(qū)小鼠源單克隆抗體HB1 與HB3，研發(fā)前S1 區(qū)的酶聯(lián)試劑盒；建立了唾液診斷乙肝的方法；3.研發(fā)了巨磁阻抗效應(yīng)結(jié)合微流控芯片基礎(chǔ)上HPV 病毒快速分型方法；利用巨磁阻效應(yīng)結(jié)合微流控芯片與等溫PCR 擴(kuò)增技術(shù)，研制出便攜式肝炎病毒快速基因分型系統(tǒng)；4. 研發(fā)了組合式毛細(xì)管基因芯片，實(shí)現(xiàn)了多群耐藥突變與基因分型檢測(cè)。獲發(fā)明專(zhuān)利授權(quán)25項(xiàng)，計(jì)算機(jī)軟件著作權(quán)3 項(xiàng)，醫(yī)療器械證書(shū)3項(xiàng)；教育部成果鑒定結(jié)論為“總體達(dá)到國(guó)際先進(jìn)水平，基于納米技術(shù)的乙型肝炎診斷新技術(shù)方法與傳感器件達(dá)到國(guó)際領(lǐng)先水平”。獲中國(guó)電子學(xué)會(huì)技術(shù)發(fā)明二等獎(jiǎng)。 應(yīng)用情況：產(chǎn)品在全國(guó)數(shù)百家醫(yī)院獲得應(yīng)用。成果對(duì)于提高我國(guó)病原微生物診療水平、推動(dòng)納米醫(yī)療器械產(chǎn)業(yè)具有重大意義。

本課題研發(fā)用于海洋環(huán)境（海水及水產(chǎn)品）中病毒、致病菌等病 原微生物、重點(diǎn)針對(duì)可能引起人類(lèi)疾病的細(xì)菌和病毒（如總桿菌數(shù)、 大腸桿菌、糞鏈球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球 菌、腺病毒、腸道病毒、甲肝病毒、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌、沙門(mén)氏 菌及李斯特菌）快速檢測(cè)的分子生物技術(shù)，為研制用于這些微生物的 現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)手段和設(shè)備奠定理論和技術(shù)基礎(chǔ)。檢測(cè)方法采用基因芯片檢 測(cè)、蛋白質(zhì)檢測(cè)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)三種

本課題研發(fā)用于海洋環(huán)境（海水及水產(chǎn)品）中病毒、致病菌等病原微生物、重點(diǎn)針對(duì)可能引起人類(lèi)疾病的細(xì)菌和病毒（如總桿菌數(shù)、大腸桿菌、糞鏈球菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、銅綠假單孢菌、金黃色葡萄球菌、腺病毒、腸道病毒、甲肝病毒、副溶血弧菌、創(chuàng)傷弧菌、沙門(mén)氏菌及李斯特菌）快速檢測(cè)的分子生物技術(shù)，為研制用于這些微生物的現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)測(cè)手段和設(shè)備奠定理論和技術(shù)基礎(chǔ)。檢測(cè)方法采用基因芯片檢測(cè)、蛋白質(zhì)檢測(cè)和聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）檢測(cè)三種。

水是生命得以存在的必要條件，它使我們?nèi)祟?lèi)得以繁衍生息，人 類(lèi)的生活、生產(chǎn)、娛樂(lè)都離不開(kāi)水。它同時(shí)也是許多病原微生物滋生、 傳播的場(chǎng)所和載體，這些病原微生物一旦進(jìn)入人體則將可能使人患病、 甚至導(dǎo)致死亡，嚴(yán)重威脅著人類(lèi)健康。隨著社會(huì)的發(fā)展和生活水平的 提高，人們?cè)絹?lái)越關(guān)心自身的健康問(wèn)題，而各種水體（包括生活飲用水，江河湖泊，游泳場(chǎng)館等）的安全問(wèn)題也日益成為人們關(guān)注的熱點(diǎn)。 因此，為了保護(hù)人們的身體健康，對(duì)各種水體尤其是飲用水中病原微 生物的檢測(cè)是十分必要和亟需的。本項(xiàng)目旨在建立水體中主要病原微 生物特異分子標(biāo)識(shí)庫(kù)，并以此為基礎(chǔ)建立快速檢測(cè)技術(shù)，以實(shí)現(xiàn)對(duì)包 括生活飲用水在內(nèi)的各種水體中主要病原微生物（致病性細(xì)菌和原生 動(dòng)物等）的迅速、準(zhǔn)確的檢測(cè)，為人們的用水安全和水質(zhì)狀況的評(píng)估 提供依據(jù)。 應(yīng)用價(jià)值： 根據(jù)我國(guó)現(xiàn)行飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)及 WHO、USEPA 和歐盟的相關(guān)規(guī) 定，確定芯片的檢測(cè)范圍為 12 種細(xì)菌、1 種鉤端螺旋體和 2 種原生 蟲(chóng)：金黃色葡萄球菌，嗜肺軍團(tuán)菌，糞腸球菌，屎腸球菌，肺炎克雷 伯氏菌，銅綠假單胞菌，親水氣單胞，大腸桿菌/志賀氏菌，小腸結(jié)腸 炎耶爾森氏菌，霍亂弧菌，副溶血弧菌，沙門(mén)氏菌，鉤端螺旋體，賈 第鞭毛蟲(chóng)，隱孢子蟲(chóng)。

課題進(jìn)展按計(jì)劃進(jìn)行，完成了240株檢測(cè)范圍內(nèi)和檢測(cè)范圍外近緣菌株的收集；對(duì)29株軍團(tuán)菌、17株鉤端螺旋體和32株克雷伯的靶基因序列破譯和序列分析；完成了探針篩選及終型芯片點(diǎn)制；進(jìn)行了105份模擬樣品的檢測(cè)實(shí)驗(yàn)；進(jìn)行了芯片判讀系統(tǒng)Bactarray軟件的初步開(kāi)發(fā)；初步建立了芯片生產(chǎn)質(zhì)量控制體系；課題組額外進(jìn)行了嗜肺軍團(tuán)菌3，6，13型的O抗原破譯，并完成了其序列分析；申請(qǐng)發(fā)明專(zhuān)利2項(xiàng)，發(fā)表SCI 論文2篇。

已有樣品/n研究發(fā)現(xiàn)SRB在厭氧條件下大量繁殖，產(chǎn)生粘液物質(zhì)，加速垢的形成，造成注水管道的堵塞，且管道設(shè)施在SRB菌落下發(fā)生局部腐蝕，以致出現(xiàn)穿孔，造成巨大的經(jīng)濟(jì)損失。微生物腐蝕并非是其本身對(duì)金屬的侵蝕作用，而是微生物生命活動(dòng)的結(jié)果間接地對(duì)金屬腐蝕的電化學(xué)過(guò)程產(chǎn)生影響,其關(guān)鍵在于生物膜內(nèi)及其與金屬基體間的相互作用。生物膜是環(huán)境中的微生物附著在物體表面, 并以非常復(fù)雜的方式相互作用而形成的, 從而在生物膜/金屬界面上產(chǎn)生一個(gè)不同于本體溶液的特殊環(huán)境。市場(chǎng)預(yù)期：目前主要采用化學(xué)試劑抑制微生物引起的金屬腐

本品是一種超濃縮、高活性、多菌種、多功能復(fù)合微生物制劑。它是有生命的活體肥料，它的作用主要靠它含有的大量有益微生物的生命活動(dòng)來(lái)完成。公司采用國(guó)際尖端科技，使復(fù)合微生物有益菌在土壤及作物根表、根際以及體內(nèi)定植、繁殖。在生產(chǎn)應(yīng)用中具有以下顯著特點(diǎn)：1.減少化肥用量高達(dá)30%--60%微生物經(jīng)再增植后含有大量的固氮菌，可以大大提高土壤中的中微量元素含量，減少氮磷鉀和其它中微量元素的施用量；同時(shí)含有多種高效活性有益微生物菌，增加土壤有機(jī)質(zhì)，加速有機(jī)質(zhì)降解轉(zhuǎn)化為作物能吸收的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，大大提高土壤肥力，減少化肥用量。 2.增產(chǎn)效果明顯配方科學(xué)、營(yíng)養(yǎng)全面，有機(jī)無(wú)機(jī)微生物三元相互促進(jìn)，以肥養(yǎng)菌、以菌促肥，強(qiáng)根壯根、有效解決根系衰弱造成的養(yǎng)分吸收障礙，有效解決土壤養(yǎng)分不均衡問(wèn)題，由于菌劑的代謝過(guò)程中釋放出大量的無(wú)機(jī)有機(jī)酸性物質(zhì)，促進(jìn)土壤中微量元素硅、鈣、鐵、鎂、鉬等的釋放及螯合，從而使作物增產(chǎn)高達(dá)20%—60%。改善作物和農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)，使農(nóng)民增收。

通過(guò)高通量測(cè)序及共現(xiàn)網(wǎng)絡(luò)分析預(yù)測(cè)熱泉菌席微生物的互作模式的思路，實(shí)現(xiàn)了綠彎菌的定向分離（圖1）。通過(guò)對(duì)潛在互作的微生物驗(yàn)證，確定了一株具有廣泛促生活性的菌株Tepidimonas sp. SYSU G00190W；基于此，團(tuán)隊(duì)建立了基于物種互作的“SCM-定向分離”策略，成功分離到大量之前難以培養(yǎng)的微生物類(lèi)群；最后作者還對(duì)其基因組和代謝組做了進(jìn)一步機(jī)理解析和實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。? 本研究首次應(yīng)用網(wǎng)絡(luò)預(yù)測(cè)的方法實(shí)現(xiàn)了熱泉菌席生境中未培養(yǎng)綠彎菌的定向培養(yǎng)。基于兩株代表性菌株的互作研究，初步闡明了熱泉菌席中綠彎菌（自養(yǎng)微生物，優(yōu)勢(shì)類(lèi)群）和溫單胞菌（異養(yǎng)微生物，稀有類(lèi)群）之間的互作關(guān)系，并為理解貧營(yíng)養(yǎng)生境中優(yōu)勢(shì)類(lèi)群與稀有類(lèi)群的相互作用奠定了一定的基礎(chǔ)，提出的分離策略為其它環(huán)境中難培養(yǎng)微生物的可培養(yǎng)化提供了思路。