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本課題發明一種針對臨床液相標本中的微生物進行快速濃縮富集的方法和試劑，可以明顯地提高臨床標本中微生物檢測的陽性率。 本方法首先通過磁珠吸附的方式，將臨床液體樣本（尿液、胸腹水、腦脊液、肺泡灌洗液等）中細菌、真菌或病毒特異性結合于磁珠上，無需高速離心，從而實現病原體的富集；再通過對細菌進行培養、染色、分子生物學或質譜檢測，或者對病毒進行免疫熒光或分子生物檢測，最終對細菌、真菌或病毒進行鑒定。對臨床標本中的細菌、真菌或病毒進行富集，提高了后續鑒定時病原體的初始量，從而極大地提高了鑒定的陽性率。 本產品可以迅速將5～50ml液相樣本中微生物濃縮至50～200µl樣本中，在磁性環境下可以輕松實現臨床標本中細菌、真菌或病毒的濃縮，無需離心，減少了由于離心產生的氣溶膠所帶來的潛在生物安全隱患。本方法操作簡單、無需復雜儀器、耗時短、在源頭顯著提升臨床液相樣本中病原微生物檢測的靈敏性。

本發明公開了一種檢測十種主要柑桔病害病原的基因芯片，包括固相載體和固定在該固相載體上的特異 性寡核苷酸探針，其特征在于：固定在所述固相載體上的特異性寡核苷酸探針具有SEQIDNO:1-SEQIDNOIO所示的寡核苷酸序列或者與SEQIDNO:1-SEQIDNO:10^示的寡核苷酸序列互補的DNA或 RNA。本發明方法設計合理，能夠提高檢測柑桔主要病害病原的敏感性、特異性及準確性；高通量，一次檢 測即能檢出十種柑桔病害，十種病毒基本概括了柑桔主要病害病原；能夠發現各種柑桔病原物的混合感染。

中試階段/n該項目公開了柑桔接穗預處理促使復合感染病原脫除的技術，采集柑桔枝條，將柑桔枝條修剪去掉葉片和葉柄，用次氯酸鈉(NaClO)水溶液表面消毒；對表面消毒后的柑桔枝條接穗進行分子檢測；當檢測過的柑桔枝條感染HLB和CTV病毒時，對接穗材料進行藥劑脫毒處理，獲得無病毒芽，完成柑桔接穗預處理脫毒的步驟。本發明的有益效果是通過小分子殺細菌三氯生（TCL）及幾種抗生素處理，獲得脫除柑桔衰退病（CTV）和柑桔黃龍病（HLB）病原的無病毒莖尖材料。脫毒效率高，效果好。為進一步莖尖微芽嫁接或嫩芽嫁接提供了無

中國是食用菌生產大國，據2009年的統計數據表明，2008年全國食用菌產量約為1730萬噸，占全世界總產量的70%以上。絕大多數菌糠仍然是廢棄或進行就地燃燒，這樣既浪費了資源又污染了環境。銅山縣是食用菌生產大縣，縣域內的三堡鎮徐村被評為“中國金針菇之鄉”，菌糠資源豐富。江蘇東寶糧油集團有限公司和江蘇省藥用植物生物技術重點實驗室聯合開發利用菌糠替代部分糧食原料生產生物飼料項目。菌糠的合理利用延長了食用菌種植的生物循環鏈條，菌糠的再利用不僅能綜合利用資源，而且可以消除環境污染，節省開支，提高經濟效益、社會效益和生態效益。合作單位：江蘇省藥用植物生物技術重點實驗室、東寶糧油有限公司

依托山東省食用菌體系崗位專家程顯好教授團隊，采用細胞工程育種、核輻射技術育種和分子標記技術育種等先進育種技術，培育了牛樟芝、桑黃、白鮑菇、黑鮑菇、杏鮑菇、姬松茸、舞茸菇、榆黃菇、雞腿菇、黃傘、羊肚菌等多種優良菌株，篩選高產高效栽培模式16個。其中通過原生質體融合、紫外誘導、交配型基因檢測及田間實驗篩選，培育出3株高耐鹽耐堿的羊肚菌品種，分別為Mel-2、Mel-7、Mel-22，在全省開展示范推廣300多畝，畝產量均在350kg左右，取得了較好的經濟效益和社會效益。 同時，本團隊首次從臺灣引進珍稀藥用菌牛樟芝，省內利用蘋果木栽培牛樟芝獲得了成功，其主要藥用成分與牛樟木栽培相同，這對牛樟芝的開發及牛樟樹的保護起到積極作用。 近三年，團隊服務大型食用菌企業12家，服務煙臺--巫山東西協作扶貧工作，服務萊山區院格莊街道鄭家莊村農民合作社等新型農業經濟體30余家，累計實現產值1.5億元以上，解決就業崗位500個以上，經濟效益和社會效益顯著。

目前，沙門菌的檢測主要還是采用傳統的細菌學方法，通過前增菌、選擇性增菌、分離培養、生化試驗以及血清學鑒定的步驟一步一步進行檢測，工作量大且耗時長。PCR及Real Time PCR等分子生物學技術雖然具有快速、簡便等大量優點，卻較少應用，主要原因是以DNA為模版的PCR及Real Time PCR技術并不能區分細菌的死活細胞，樣品中存在的死細胞可能導致假陽性結果。本課題將EMA對死活細胞的鑒別作用與Real Time PCR的靈敏度、特異性相結合，有效克服了DNA分子檢測手段不能鑒別死活細胞的弊端，在實現檢測的快速、簡便的同時大大提高了結果的準確性。確證了EMA-Real Time PCR可實現實際樣品中沙門菌活細胞的快速測定，可將EMA-Real Time PCR推廣到實際檢測工作中，如此便可大大縮短檢測所需的時間，節省大量的人力、物力。研究成果具有重大的應用前景。 社會效益：EMA-Real Time PCR可用于實際樣品中沙門菌活細胞的快速檢測，建立一種快速檢測病原菌的新方法體系，用于實際的檢測工作中，如此不僅可以減少食品安全日常監測的工作量，更重要的是，在突發性食物中毒事件中，大大縮短了病原菌檢測所需時間，提高了反應效率，為突發性公共衛生事件的解決提供更好的技術平臺。

我公司曾先后聯合山東省農科院、魯東大學等共同研究開發“野生雞油菌馴化養殖關鍵技術”，每年都進行野生雞油菌的采集、分離提純等工作，但至今未馴化養殖成功。尋求產學研合作伙伴，共同研發野生雞油菌分離提純方法和防止雜菌感染的關鍵技術，實現野生雞油菌工廠化規模養殖

本發明涉及一種利用噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因轉化制備鴨疫里默氏菌前菌影疫苗的方法與應用方法。該方案首先將噬菌體PhiX174的E基因和葡萄球菌核酸酶A基因通過柔性連接臂(Gly4Ser)3連接成串聯基因，并進一步構建溫控表達載體pBV-E-SN。將pBV-E-SN電擊轉化進入鴨疫里默氏菌原生質體，篩選陽性克隆28℃增菌培養。分離菌體加保護劑后分裝、冷凍干燥。本發明所制備的活菌疫苗經飲水免疫，既可以刺激呼吸道和消化道黏膜的局部免疫，也可以激發體液免疫。

茶葉是我國重要的農產品之一， 也是傳統的大宗出口商品。在茶葉種植中，以氯氝菊酣為主

成果與項目的背景及主要用途： 菌糠是指以棉籽殼、木屑、稻草、玉米芯、甘蔗渣及多種農作物秸稈、工業 廢料（如酒糟、醋糟、造紙廠廢液及制藥廠黃漿廢液等）為主要原料栽培食用菌 后的廢棄培養基。菌糠主要含有物質是纖維素、半纖維素、木質素、抗營養因子 和少量的蛋白質，這些原料作為培養基栽培食用菌后，通過食用菌菌體的生物固 氮作用、酶解作用等一系列生物轉化過程，粗蛋白質、粗脂肪含量均比不經過食 用菌發酵前提高二倍以上，纖維素、半纖維素、木質素等均已被不同程度的降解， 其中粗纖維素降低了 50%以上，木質素降低 30%以上，棉酚降低 60%以上，同 時還產生了多種糖類、有機酸類和生物活性物質。據報道，我國菌糠年產量在 200 萬噸以上大部分當作廢料而被浪費掉，給環境造成了很大的污染，一些菌糠 可以被用作畜禽飼料，并且用廢棄菌糠來改良土壤可以做到廢物利用、改善環境， 實現農業的可持續發展。 我國土壤絕大部分嚴重缺磷、缺鉀，化學肥料中的磷元素和鉀元素在施肥后 很快被固化，不再能夠被植物使用。解磷菌、解鉀菌及固氮菌是生物益生菌肥中 的主要菌株，使用這些土壤益生菌可以提高土壤中植物可利用氮磷鉀的利用率。 如果能夠利用廢棄菌糠大規模培養這三種菌，制備成為生物菌肥，將會極大的增 211天津大學科技成果選編 加菌糠做為肥料的優勢。本項目利用菌糠培養解磷菌、解鉀菌、固氮菌，制備成 為生物菌肥，預期產生極大的經濟效益和社會效益。 技術原理與工藝流程簡介： 本項目擬利用處理后的廢棄菌糠殘渣培養酵母、解磷菌、解鉀菌、固氮菌， 優化發酵條件，提高菌體量，獲得制備微生物菌肥的最佳工藝路線。 天津大學從農業廢棄物堆肥中篩選出 7 株解磷能力較強的菌株，其中菌株 FL7 表現出較好的解磷效果，FL7 解磷量為 436.63mg/L。該菌株已經于 2010 年 7 月 13 日在中國微生物菌種保藏中心進行保藏（保藏號：CGMCC NO.4008）。 本課題組還從農業廢棄物堆肥中篩選得到解鉀菌 K3、固氮菌 N1。解鉀菌 K3 解 鉀量達 4.10mg/L、固氮菌 N1 固氮量為 1.81×10—2mol/L。 另外，天津大學已經建立了以菌糠為基質培養解磷、解鉀、固氮菌的發酵條 件，經過發酵條件優化，制備的菌肥中三種菌的含量達到 48.62×108CFU/g，其 中解磷菌 2.4×108cfu/g，解鉀菌 25.22×108cfu/g，固氮菌 21×108cfu/g，均遠高于 國標。 應用領域：生物、農業領域 合作方式及條件：具體面議