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本項目結合目前先進的生物技術、面膜和抗菌醫用敷料生產技術培育兩類高附加值新型生物技術產品：生物纖維面膜和抗菌性生物醫用敷料。 目標產品生物纖維面膜，基料采用了微生物合成納米纖維素材料，是100%的純天然材料，材質均勻細致，韌性、持水性強，與皮膚相容性、服貼性佳，是生產面膜的理想基料。采用新型清潔發酵生產工藝和后處理技術，大批量提供優質生物纖維面膜原料，獨立研發，推出保濕、美白兩大類生物纖維面膜。 目標產品抗菌促愈醫用生物敷料，是在細菌纖維素基體中均勻植入納米銀粒子后，通

成果描述：本課題采用理性設計的策略，通過基因重組的手段構建雜合抗菌肽LfcinB-P-CB，具有活性高、穩定性強、無毒等優點。通過對抗菌肽工程菌發酵優化，及抗菌肽純化、制劑工藝研究，建立中試規模的抗菌肽制劑的制備體系。抗菌效果達到雜合肽LPCB與Amp（50 μg/mL）抑菌直徑之比大于1.0；耐熱性強，在100 ℃條件下維持3 h活性無明顯降低；有一定的耐酸堿性，在pH 2~10的環境中仍能保持較高的活性；安全性高，對真核細胞幾乎無溶血性；實現雜合抗菌肽LfcinB-P-CB在畜禽生產中的應用，解決抗生素等化學抗菌材料造成了日益嚴重的環境問題，降低某些物質會以原型或代謝物形式排泄造成環境污染使環境中出現耐菌株的可能性，從而給人類生存環境構成危害。市場前景分析：據國外報道，歐洲各國的養牛業、養豬業及養禽場無一例外普遍在配合飼料中添加了上述獸用抗生素作為“動物生長促進劑”。泰洛星已成為當今世界上頭號獸用抗菌劑，去年泰洛星的銷售額高達2.75億美元。我國當前的動物養殖面臨越來越嚴峻的疫病困擾，因此抗菌肽產品在動物保健方面的開發和應用在我國需求巨大。2010年全國動物用抗菌肽類產品年銷售額接近一億元，但抗菌肽的總市場容量至少超過100億。因此本項目開發的抗菌肽具有廣闊的市場前景。與同類成果相比的優勢分析：抗菌效果達到雜合肽LPCB與Amp（50 μg/mL）抑菌直徑之比大于1.0；耐熱性強，在100 ℃條件下維持3 h活性無明顯降低；有一定的耐酸堿性，在pH 2~10的環境中仍能保持較高的活性；安全性高，對真核細胞幾乎無溶血性；

本發明公開了一種地衣芽孢桿菌分泌的抗菌肽及其制備方法和應用。所述的抗菌肽氨基酸序列為序列表SEQIDNO.1所示，分子量為1290.4道爾頓，等電點5.23。其制備方法是：硫酸銨沉淀培養基中地衣芽孢桿菌分泌的的抗菌肽，利用陰離子交換、分子篩層析和反向高效液相色譜法純化抗菌肽。該抗菌肽具有顯著的抗菌活性，且不會對豬的紅細胞產生溶血作用，可用于開發制備飼用抗菌藥物。

現代醫學所謂的疼痛，是一種復雜的生理心理活動，是臨床上最常見的癥狀之一。它包括傷害性刺激作用于機體所引起的痛感覺，以及機體對傷害性刺激的痛反應。長期疼痛給患者帶來痛苦和不安，劇痛還可以引起失眠或其他生物功能紊亂，影響患者的生活質量。因此，疼痛藥物的研發一直是全球性的熱點和難點。阿片類藥物因其止痛作用強，在緩解重度疼痛具有無可取代的地位。然而它們在起到鎮痛作用的同時往往伴隨很多副作用，很大程度上限制了其在鎮痛方面的應用。臨床上鎮痛最常應用的是阿片藥物，除了眾所周知的副作用外，不同的阿片藥物治療還可產生

疼痛是一種與實際上或潛在的組織損傷相關聯的，或基于這種損傷的，可敘述的不愉快的感覺和情緒經驗。然而，疼痛特別是長期疼痛給患者帶來痛苦和不安，劇痛還可以引起失眠或其他生物功能紊亂，影響患者的生活質量。阿片類鎮痛藥是最古老的鎮痛藥，也是迄今為止最有效的鎮痛藥物，因其止痛作用強，在緩解重度疼痛具有無可取代的地位。但是，由于其諸如呼吸抑制、心搏過緩、耐受、成癮等方面的副作用，對病人產生了很大的危害，很大程度上限制了其在鎮痛方面的應用。從而，另辟蹊徑，發現新型的低副作用的阿片類鎮痛藥物是目前科學研究的熱點。&

本發明公開了一種MMP14雙靶點高效結合肽及多肽結構序列的獲取方法和目標物的用途。從MMP14蛋白誘導表達的人成骨肉瘤MG63細胞中篩選和獲得一組新型的雙靶點MMP14和Zn2+的多肽，包括：基于MG63細胞靶向誘導表達MMP14的噬菌體隨機十二肽庫體外消減篩選，經3-5輪篩選，獲得富集的雙靶向MMP14和Zn2+的結合肽噬菌體和多肽結構序列。目標物作為先導分子用于疾病治療藥物研發和用于腫瘤診斷，還可用于蛋白質分離純化、分子標簽以及重金屬污染生物修復、采礦等。

本發明提供了一種新型魚源抗菌肽moronecidin突變體及其制備方法和應用。本發明通過生物軟件對魚源抗菌肽moronecidin的氨基酸序列進行空間結構分析，將其22個氨基酸中的2處氨基酸進行突變(K7R和V20K)，同時為了保證抗菌肽C末端的酰胺化，在C末端添加了天冬酰胺N，獲得一種新型魚源抗菌肽突變體，使其抗菌效力獲得顯著提高。在此基礎上，選用畢赤酵母偏愛密碼子，人工合成新型魚源抗菌肽moronecidin突變體基因，克隆于畢赤酵母中表達，獲得新型抗菌肽重組酵母菌株，并將發酵規模放大到發酵罐水平，實現抗菌肽產品的高密度發酵和高效表達。發酵液進一步純化后可制成粉劑、液體等抗菌肽制劑用于水產動物飼料添加劑或水產動物疾病的預防和治療制劑。

本發明提供了一種新型豬源抗菌肽突變體及其制備方法和應用。本發明通過生物軟件對豬源抗菌肽PMAP37的氨基酸序列進行空間結構分析，將其37個氨基酸中的3處氨基酸進行突變（L6K、K20L和L31K），獲得一種新型豬源抗菌肽突變體，使其抗菌效力獲得顯著提高。在此基礎上，選用畢赤酵母偏愛密碼子，人工合成新型豬源抗菌肽突變體基因，克隆于畢赤酵母中表達，獲得新型抗菌肽重組酵母菌株，并將發酵規模放大到發酵罐水平，實現抗菌肽產品的高密度發酵和高效表達。發酵液進一步純化后可制成粉劑、液體等抗菌肽制劑用于畜禽疾病的預防和治療。

活性炭是現代化學工業，石油工業，食品工業，醫藥工業，飲用水處理等行業不可缺少的處理吸附，脫色，凈化劑，應用范圍十分廣泛，尤以粒狀活性炭最為重要，世界上許多國家和地區都十分重視它。在日本，丹麥，瑞典，美國等發達國家研究，生產應用活性炭的歷史近百年；在中國雖然起步較晚，但在應用硬果殼制備活性炭的生產工藝方面有較大的成功，先后有采用核桃殼，椰子殼，棕櫚殼，桃核，杏仁殼及木屑等為原料來制備粒狀或粉狀活性炭，由硬果殼制備的活性炭均為粒狀，可再生重復使用，應用價值大；由木屑制備的粒狀活性炭，生產成本較低，一般為一次性使用，不便于再生。活性炭生產方法可分為物理活化法和化學活化法兩大類，各有優缺點，但化學活化法由于活化劑種類及濃度的不同而使活性炭的孔徑大小，長短等主要技術指標有較大的差異，人們通過控制選擇活化劑，活化劑濃度，PH值大小；活化溫度高低等條件來達到制備出不同規格型號的粒狀活性炭，以供不同用途選用。

傳統的提取物質中有效成份的方法，如水蒸汽蒸餾法、減壓蒸餾法、溶劑萃取法等，其工藝復雜、產品純度不高，而且易殘留有害物質。超臨界流體萃取是一種新型的分離技術, 它是利用流體在超臨界狀態時具有密度大、粘度小、擴散系數大等優良的傳質特性而成功開發的。它具有提取率高、產品純度好、流程簡單、能耗低等優點。CO2- SFE技術由于溫度低, 且系統密閉, 可大量保存對熱不穩定及易氧化的揮發性成分, 為中藥揮發性成分的提取分離提供了目前最先進的方法。用超臨界CO2萃取法可以從許多種植物中提取其有效成分，而這些成分過去用化學方法是提取不出來的。這項技術除了用在化工、醫藥等行業外，還可用在煙草、香料、食品等方面。如食品中，可以用來去除咖啡、茶葉中的咖啡因，可提取大蒜素、胚芽油、沙棘油、植物油以及醫藥用的鴉片、阿托品、人參素及銀杏葉、紫杉中的有價值成分。可見這項技術在未來具有廣闊的發展前景。 超臨界流體萃取的特點　1．萃取和分離合二為一，當飽含溶解物的二氧化碳超臨界流體流經分離器時，由于壓力下降使得CO2與萃取物迅速成為兩相（氣液分離）而立即分開，不存在物料的相變過程，不需回收溶劑, 操作方便；不僅萃取效率高，而且能耗較少，節約成本。 　2．壓力和溫度都可以成為調節萃取過程的參數。臨界點附近，溫度壓力的微小變化，都會引起CO2密度顯著變化，從而引起待萃物的溶解度發生變化，可通過控制溫度或壓力的方法達到萃取目的。壓力固定，改變溫度可將物質分離；反之溫度固定，降低壓力使萃取物分離；因此工藝流程短、耗時少。對環境無污染，萃取流體可循環使用，真正實現生產過程綠色化。　　3．萃取溫度低, CO2的臨界溫度為31.265℃ ,臨界壓力為 7.18MPa, 可以有效地防止熱敏性成分的氧化和逸散，完整保留生物活性，而且能把高沸點，低揮發渡、易熱解的物質在其沸點溫度以下萃取出來。　　4. 臨界CO2 流體常態下是氣體, 無毒, 與萃取成分分離后, 完全沒有溶劑的殘留, 有效地避免了傳統提取條件下溶劑毒性的殘留。同時也防止了提取過程對人體的毒害和對環境的污染, 100%的純天然。　5．超臨界流體的極性可以改變, 一定溫度條件下, 只要改變壓力或加入適宜的夾帶劑即可提取不同極性的物質, 可選擇范圍廣。超臨界流體萃取技術的應用 本課題組現已完成：（1）從甜橙皮中萃取甜橙油（2）從銀杏浸膏中萃取銀杏內酯（3）發酵液制得乳酸鈣中萃取還原糖、蛋白質（4）發酵液制得乳酸鈣中萃取重金屬離子 本課題組可承接： 紫杉、黃芪、人參葉、大麻、香獐、青蒿草、川貝草、桉葉、玫瑰花、樟樹葉、茉莉花、花椒、八角、桂花、生姜、大蒜、辣椒、桔柚皮、啤酒花、芒草、香茅草、鼠尾草、迷迭香、丁子香、豆蔻、沙棘、小麥、玉米、米糠、魚、煙草、茶葉、煤、廢油等有價值組分的提純或回收。 在超臨界流體技術中，超臨界流體萃取技術與天然藥物現代化關系密切。SFE對非極性和中等極性成分的萃取，可克服傳統的萃取方法中因回收溶劑而致樣品損失和對環境的污染，尤其適用于對溫熱不穩定的揮發性化合物提取；對于極性偏大的化合物，可采用加入極性的夾帶劑如乙醇、甲醇等，改變其萃取范圍提高抽提率。