植物RNA化學修飾m6A
                                        
                                            鑒定了擬南芥中的	m6A	去甲基酶	ALKBH10B	,發現	ALKBH10B	缺失會導致擬南芥顯著的晚花表型,	ALKBH10B	通過影響	FT	,	SPL3	和	SPL9	的甲基化水平調控擬南芥的成花誘導。不同的識別蛋白通過對	m6A	的結合,對	mRNA	的加工代謝產生不同的調控作用,	進而	影響細胞不同的生理功能。通過開發甲醛交聯-	免疫共沉淀(Formaldehyde-crosslinking and immunoprecipitation, FA-CLIP)	技術,鑒定出全轉錄組水平的ECT2-mRNA	相互作用位點,揭示ECT2	主要結合mRNA	的	3'	非翻譯區(3'UTR),	并且傾向于結合保守序列	URUAY (R=G>A, Y=U>A, 	其中	UGUAY	序列 占	90%	以上	)	。使用植物細胞核裂解液進行的體外酶活實驗和凝膠遷移實驗(	EMSA	)證明	UGUA	序列為	植物特有的m6A	保守序列,且UGUm6A	可以被ECT2	高特異性識別。亞細胞定位實驗表明ECT2	蛋白分布于細胞核和細胞質,結合高通量測序數據分析,推測ECT2	具有雙重功能,ECT2	可能在細胞核中通過結合甲基化的UGUA	調控pre-mRNA	的	3'UTR	加工,在細胞質中ECT2	促進mRNA	的穩定性。進一步機理研究發現影響表皮毛發育的三個基因ITB1, TTG1	及DIS2	的轉錄本可以被m6A	修飾且被ECT2	結合,在	ECT2	的T-DNA	插入突變體中,ITB1, TTG1	及DIS2	的mRNA	穩定性降低,mRNA	表達量水平降低,繼而導致	ect2	突變體中表皮毛分叉數增多。
                                        
                                        
                                            北京大學
                                            2021-04-11