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項(xiàng)目簡(jiǎn)介 基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內(nèi)的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來(lái)核酸及基因藥物得到快速發(fā)展，已有多個(gè)核酸藥物經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療。基因治療相對(duì)其它治療方法有著若干優(yōu)勢(shì)，但在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中也面臨著一些挑戰(zhàn)。其中，基因輸送載體對(duì)于基因治療來(lái)說(shuō)是十分關(guān)鍵。目前開(kāi)發(fā)基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導(dǎo)的輸送系統(tǒng)。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長(zhǎng)期表達(dá)，因此是目前臨床上應(yīng)用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過(guò)程中也暴露出了許多缺陷，這些缺陷大大限制了病毒載體的應(yīng)用。為了克服病毒載體的諸多不足，近些年來(lái)非病毒載體得到了迅速發(fā)展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉(zhuǎn)染試劑之一并且已經(jīng)被一些研究工作者當(dāng)成聚合物類(lèi)基因轉(zhuǎn)染試劑的“金標(biāo)準(zhǔn)”。 PEI的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢(shì)和粒徑的影響。隨著分子量的升高，支鏈PEI轉(zhuǎn)染效率升高；然而，細(xì)胞毒性也同時(shí)升高。為了消除或降低與PEI有關(guān)的細(xì)胞毒性，目前已經(jīng)發(fā)展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI，用多糖、親水性聚合物（如PEG）、二硫鍵連接臂、脂質(zhì)基團(tuán)等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場(chǎng)上銷(xiāo)售的PEI分子量范圍非常廣泛，從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物，它包括生育酚和生育三烯酚，其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外，還涉及酶活性的調(diào)節(jié)、基因表達(dá)調(diào)控以及神經(jīng)生物學(xué)功能等。通過(guò)消化道吸收進(jìn)入血漿的維生素E經(jīng)受體介導(dǎo)進(jìn)入肝細(xì)胞，進(jìn)入肝細(xì)胞的維生素E又在維生素E結(jié)合蛋白的運(yùn)輸下進(jìn)入肝外組織。維生素E本身的疏水性質(zhì)、豐富的生物調(diào)節(jié)功能以及其受體介導(dǎo)的肝細(xì)胞攝取方式都預(yù)示著用它來(lái)修飾PEI有助于實(shí)現(xiàn)基因的器官靶向的遞送。 因此，我們開(kāi)發(fā)了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應(yīng)用。維生素E的修飾有利于基因質(zhì)粒的包載、遞送和釋放，其毒性隨著PEI上的維生素E飾數(shù)目的增加而降低，維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質(zhì)粒的細(xì)胞攝取后基因編碼蛋白的表達(dá)。動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明PEI衍生物可成功將pDNA質(zhì)粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中，該復(fù)合物（PEI/pDNA）能進(jìn)入肝臟和肺臟細(xì)胞并進(jìn)一步釋放質(zhì)粒DNA和基因表達(dá)。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高和基因藥物已釋放等優(yōu)點(diǎn)。項(xiàng)目團(tuán)隊(duì) 項(xiàng)目團(tuán)隊(duì)包括北京大學(xué)藥學(xué)院湯新景教授，以及課題博士后和研究生組成。湯新景教授為天然藥物及仿生藥物國(guó)家實(shí)驗(yàn)室PI，國(guó)家自然科學(xué)基金委優(yōu)青、教育部青年長(zhǎng)江學(xué)者和新世紀(jì)人才。應(yīng)用范圍 該項(xiàng)目可用于核酸基因藥物的包載和遞送材料，實(shí)驗(yàn)研究中的基因遞送試劑盒等。項(xiàng)目階段 目前該項(xiàng)目處于臨床前研究（動(dòng)物研究階段）。知識(shí)產(chǎn)權(quán) 已申請(qǐng)專(zhuān)利（201610802130.6），北京大學(xué)為唯一專(zhuān)利權(quán)人。合作方式 技術(shù)轉(zhuǎn)讓、技術(shù)許可、技術(shù)入股、共同開(kāi)發(fā)等。

基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內(nèi)的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來(lái)核酸及基因藥物得到快速發(fā)展，已有多個(gè)核酸藥物經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療。基因治療相對(duì)其它治療方法有著若干優(yōu)勢(shì)，但在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中也面臨著一些挑戰(zhàn)。其中，基因輸送載體對(duì)于基因治療來(lái)說(shuō)是十分關(guān)鍵。目前開(kāi)發(fā)基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導(dǎo)的輸送系統(tǒng)。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長(zhǎng)期表達(dá)，因此是目前臨床上應(yīng)用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過(guò)程中也暴露出了許多缺陷，這些缺陷大大限制了病毒載體的應(yīng)用。為了克服病毒載體的諸多不足，近些年來(lái)非病毒載體得到了迅速發(fā)展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉(zhuǎn)染試劑之一并且已經(jīng)被一些研究工作者當(dāng)成聚合物類(lèi)基因轉(zhuǎn)染試劑的“金標(biāo)準(zhǔn)”。 PEI的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢(shì)和粒徑的影響。隨著分子量的升高，支鏈PEI轉(zhuǎn)染效率升高；然而，細(xì)胞毒性也同時(shí)升高。為了消除或降低與PEI有關(guān)的細(xì)胞毒性，目前已經(jīng)發(fā)展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI，用多糖、親水性聚合物（如PEG）、二硫鍵連接臂、脂質(zhì)基團(tuán)等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場(chǎng)上銷(xiāo)售的PEI分子量范圍非常廣泛，從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物，它包括生育酚和生育三烯酚，其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外，還涉及酶活性的調(diào)節(jié)、基因表達(dá)調(diào)控以及神經(jīng)生物學(xué)功能等。通過(guò)消化道吸收進(jìn)入血漿的維生素E經(jīng)受體介導(dǎo)進(jìn)入肝細(xì)胞，進(jìn)入肝細(xì)胞的維生素E又在維生素E結(jié)合蛋白的運(yùn)輸下進(jìn)入肝外組織。維生素E本身的疏水性質(zhì)、豐富的生物調(diào)節(jié)功能以及其受體介導(dǎo)的肝細(xì)胞攝取方式都預(yù)示著用它來(lái)修飾PEI有助于實(shí)現(xiàn)基因的器官靶向的遞送。 因此，我們開(kāi)發(fā)了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應(yīng)用。維生素E的修飾有利于基因質(zhì)粒的包載、遞送和釋放，其毒性隨著PEI上的維生素E飾數(shù)目的增加而降低，維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質(zhì)粒的細(xì)胞攝取后基因編碼蛋白的表達(dá)。動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明PEI衍生物可成功將pDNA質(zhì)粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中，該復(fù)合物（PEI/pDNA）能進(jìn)入肝臟和肺臟細(xì)胞并進(jìn)一步釋放質(zhì)粒DNA和基因表達(dá)。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高和基因藥物已釋放等優(yōu)點(diǎn)。

真核細(xì)胞具有復(fù)雜而高度有序的空間結(jié)構(gòu)，研究生物大分子的亞細(xì)胞定位，對(duì)于闡明其生物學(xué)功能有著重要意義。核酸分子在細(xì)胞中的特異性分布直接影響基因表達(dá)的效率，在蛋白質(zhì)翻譯調(diào)控、學(xué)習(xí)與記憶形成等一系列生物學(xué)過(guò)程中扮演了重要角色。針對(duì)亞細(xì)胞區(qū)域中RNA組份的研究，傳統(tǒng)手段依賴(lài)于化學(xué)交聯(lián)、免疫沉淀、離心分離等技術(shù)，不但需要預(yù)先破壞細(xì)胞的天然結(jié)構(gòu)，而且還局限于少數(shù)能夠被機(jī)械分離的亞細(xì)胞區(qū)域，缺乏普適性。 本研究提出“鄰近核酸標(biāo)記”的策略。該策略的核心是在活細(xì)胞中利用酶促反應(yīng)形成大量高活性的自由基，與酶鄰近的核酸分子發(fā)生共價(jià)加成反應(yīng)，從而實(shí)現(xiàn)空間特異性標(biāo)記。從工程改造的過(guò)氧化物酶APEX2出發(fā)，鄒鵬課題組首先設(shè)計(jì)并合成了十余種與生物素偶聯(lián)的酶底物，并從中發(fā)現(xiàn)生物素-苯胺探針的核酸標(biāo)記活性最高。他們進(jìn)一步以線粒體、核纖層和核仁等亞細(xì)胞結(jié)構(gòu)為例，建立了在活細(xì)胞中開(kāi)展鄰近核酸標(biāo)記的方法，并通過(guò)定量PCR與高通量測(cè)序分析證實(shí)了標(biāo)記方法具有良好的空間特異性。鄰近核酸標(biāo)記技術(shù)操作簡(jiǎn)單、具有普適性，為日后研究核酸的亞細(xì)胞定位與功能關(guān)系提供了必要的工具。

需求名稱(chēng)：病原體核酸檢測(cè)POCT系統(tǒng) 懸賞金額：50萬(wàn)元 發(fā)榜企業(yè)：廣東華銀醫(yī)藥科技有限公司 需求領(lǐng)域：生物工程與檢測(cè)技術(shù)、生物技術(shù)、生物醫(yī)藥、醫(yī)療器械及設(shè)備及醫(yī)學(xué)專(zhuān)用軟件 產(chǎn)業(yè)集群：生物醫(yī)藥與健康產(chǎn)業(yè)集群 技術(shù)關(guān)鍵詞：核酸檢測(cè)、POCT

基因治療可用于包括癌癥、艾滋病、心血管病、傳染性疾病等在內(nèi)的各種獲得性和遺傳性疾病。近幾年來(lái)核酸及基因藥物得到快速發(fā)展，已有多個(gè)核酸藥物經(jīng)FDA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床治療。基因治療相對(duì)其它治療方法有著若干優(yōu)勢(shì)，但在實(shí)際應(yīng)用過(guò)程中也面臨著一些挑戰(zhàn)。其中，基因輸送載體對(duì)于基因治療來(lái)說(shuō)是十分關(guān)鍵。目前開(kāi)發(fā)基因輸送載體的策略主要分為病毒和非病毒介導(dǎo)的輸送系統(tǒng)。病毒載體具有非常高的輸送效率并且可以保證基因的長(zhǎng)期表達(dá)，因此是目前臨床上應(yīng)用最多的載體。但病毒載體在臨床使用過(guò)程中也暴露出了許多缺陷，這些缺陷大大限制了病毒載體的應(yīng)用。為了克服病毒載體的諸多不足，近些年來(lái)非病毒載體得到了迅速發(fā)展。這其中就包括研究最廣泛的非病毒載體聚乙烯亞胺。PEI是最好的體外轉(zhuǎn)染試劑之一并且已經(jīng)被一些研究工作者當(dāng)成聚合物類(lèi)基因轉(zhuǎn)染試劑的“金標(biāo)準(zhǔn)”。 PEI的轉(zhuǎn)染效率和細(xì)胞毒性主要受其分子量、支化程度、表面電勢(shì)和粒徑的影響。隨著分子量的升高，支鏈PEI轉(zhuǎn)染效率升高；然而，細(xì)胞毒性也同時(shí)升高。為了消除或降低與PEI有關(guān)的細(xì)胞毒性，目前已經(jīng)發(fā)展出了多種不同的策略。這些策略主要包括使用直鏈高分子量PEI，用多糖、親水性聚合物（如PEG）、二硫鍵連接臂、脂質(zhì)基團(tuán)等取代或連接高分子量和低分子量的支鏈PEI市場(chǎng)上銷(xiāo)售的PEI分子量范圍非常廣泛，從1000 Da以下到1.6 × 103 kDa都有。 維生素E是一種脂溶性化合物，它包括生育酚和生育三烯酚，其中α-生育酚是自然界中分布最廣泛、含量最豐富并且活性最高的維生素E形式。維生素E的生物功能除了最熟知的抗氧化功能之外，還涉及酶活性的調(diào)節(jié)、基因表達(dá)調(diào)控以及神經(jīng)生物學(xué)功能等。通過(guò)消化道吸收進(jìn)入血漿的維生素E經(jīng)受體介導(dǎo)進(jìn)入肝細(xì)胞，進(jìn)入肝細(xì)胞的維生素E又在維生素E結(jié)合蛋白的運(yùn)輸下進(jìn)入肝外組織。維生素E本身的疏水性質(zhì)、豐富的生物調(diào)節(jié)功能以及其受體介導(dǎo)的肝細(xì)胞攝取方式都預(yù)示著用它來(lái)修飾PEI有助于實(shí)現(xiàn)基因的器官靶向的遞送。 因此，我們開(kāi)發(fā)了維生素E修飾的聚乙烯亞胺衍生物及其合成方法和應(yīng)用。維生素E的修飾有利于基因質(zhì)粒的包載、遞送和釋放，其毒性隨著PEI上的維生素E飾數(shù)目的增加而降低，維生素E的修飾能夠大大增加pDNA質(zhì)粒的細(xì)胞攝取后基因編碼蛋白的表達(dá)。動(dòng)物體內(nèi)實(shí)驗(yàn)表明PEI衍生物可成功將pDNA質(zhì)粒輸送到小鼠的肝臟和肺臟中，該復(fù)合物（PEI/pDNA）能進(jìn)入肝臟和肺臟細(xì)胞并進(jìn)一步釋放質(zhì)粒DNA和基因表達(dá)。本成果具有聚乙烯亞胺衍生物作為基因輸送載體具有毒性低、轉(zhuǎn)染效率高和基因藥物已釋放等優(yōu)點(diǎn)。

AH48全自動(dòng)核酸提取工作站，基于上吸磁珠法提取純化核酸原理，整合振蕩式核酸提取純化與移液臂組合，實(shí)現(xiàn)大量樣本核酸的快速高效制備純化。工作站集試劑樣本自動(dòng)加載，核酸提取，PCR體系構(gòu)建等諸多功能于一體，實(shí)現(xiàn)了全流程的自動(dòng)化操作。整個(gè)工作過(guò)程無(wú)需人工干預(yù)。配合相應(yīng)的核酸提取試劑，可處理血清，血漿，全血，拭子，羊水，糞便，組織灌洗液，組織，石蠟切片，細(xì)菌，真菌等多種樣品類(lèi)型，廣泛應(yīng)用于檢驗(yàn)，疾病防控，動(dòng)物檢疫，出入境檢驗(yàn)檢疫，食品安全，法醫(yī)痕跡檢驗(yàn)，科學(xué)教研等領(lǐng)域。 所提取出的高質(zhì)量核酸（DNA和RNA）可用于高靈敏的下游分析，如定量PCR、臨床分子診斷、基因表達(dá)分析、基因分析、法醫(yī)及傳染性疾病研究等；純化后的核酸可直接應(yīng)用于下一步的酶切、鑒定以及疾病診斷、治療等。

能控制交流五線制轉(zhuǎn)轍機(jī)（如S700K、ZDJ9、ZYJ系列等轉(zhuǎn)轍機(jī)）和四/六線直流轉(zhuǎn)轍機(jī)，實(shí)現(xiàn)對(duì)轉(zhuǎn)轍機(jī)及室內(nèi)外電纜配線的試驗(yàn)校核。可廣泛應(yīng)用于既有站信號(hào)改造、換道岔等施工過(guò)程中，也可應(yīng)用于新建線信號(hào)施工中的配合調(diào)試，通過(guò)對(duì)轉(zhuǎn)轍機(jī)及室內(nèi)外電纜配線進(jìn)行智能、全面、充分的測(cè)試，能有效減少施工調(diào)試要點(diǎn)及開(kāi)通延點(diǎn)的風(fēng)險(xiǎn)。該測(cè)試儀是電務(wù)維護(hù)人員或施工人員對(duì)轉(zhuǎn)轍機(jī)配線進(jìn)行檢測(cè)的專(zhuān)用工具。已在鐵路局和工程局推廣40余套。

本項(xiàng)目首次實(shí)現(xiàn)了將核酸提取、核酸擴(kuò)增以及核酸檢測(cè)集成到同一試紙上，并最終實(shí)現(xiàn)了核酸從提取到檢測(cè)的集成化和小型化，成本低廉、操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)周期短，開(kāi)發(fā)裝置已經(jīng)完成實(shí)驗(yàn)室小試階段，產(chǎn)品原型已經(jīng)開(kāi)發(fā)完成。填補(bǔ)紙的核酸檢測(cè)市場(chǎng)空白，用于真菌檢測(cè)的LAMP集成試紙的研發(fā)及產(chǎn)業(yè)化將具有非常巨大的市場(chǎng)前景。

目前適配體廣泛應(yīng)用的瓶頸為篩選技術(shù)效率低下，現(xiàn)有的篩選技術(shù)無(wú)法滿足科研以及產(chǎn)品對(duì)識(shí)別靶標(biāo)高親和、高特異性的需求。適配體篩選技術(shù)已成為適配體應(yīng)用發(fā)展的關(guān)鍵。

產(chǎn)品說(shuō)明 NP-1096是一款在NP-2032基礎(chǔ)上進(jìn)行通量、性能全面升級(jí)的一臺(tái)全自動(dòng)核酸提取儀，一次最高可處理96個(gè)樣本，同時(shí)能滿足大體積樣本的處理需 求。在配套不同種類(lèi)試劑盒條件下，可從全血、病毒、組織、植物、細(xì)菌和培養(yǎng)細(xì)胞等多源性樣本中純化核酸。利用高通量處理模塊和快速優(yōu)質(zhì)試劑盒的優(yōu) 勢(shì)，可為客戶提供高效、自動(dòng)化和高品質(zhì)的核酸純化處理解決方案，是大規(guī)模臨床基因分析需求的心儀設(shè)備。