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成果描述：酶脫毛是一種公認(rèn)的制革脫毛清潔工藝，在中國的豬皮制革中獲得了成功的應(yīng)用，但一直沒有成功用于牛皮制造。已經(jīng)報道的牛皮的酶脫毛工藝通常是在35℃至42℃的較高溫度下進行，由于組織及纖維結(jié)構(gòu)的差異，較高溫度下牛皮膠原纖維容易受到破壞，容易發(fā)生松面、毛孔擴大等質(zhì)量缺陷，甚至導(dǎo)致爛面等嚴(yán)重質(zhì)量事故，并且在該溫度條件下實施牛皮酶脫毛，工藝操作和控制難度極大。本技術(shù)提供了一種針對牛皮的低溫酶脫毛工藝，并且完全不使用硫化物。該工藝技術(shù)使用與之配套的脫毛酶制劑，能夠在較低溫度下對牛皮進行脫毛處理，解決了長久以來本領(lǐng)域技術(shù)人員一直渴望解決但始終未獲得成功的牛皮酶脫毛制革的技術(shù)難題，并且產(chǎn)生的含蛋白廢水可以替代部分氮肥直接用于農(nóng)業(yè)或城市綠化的灌溉，低溫脫毛同時也節(jié)約了能源的消耗，降低了生產(chǎn)成本，提高了綜合效益。市場前景分析：牛皮制革廠。與同類成果相比的優(yōu)勢分析：國際先進。

可以量產(chǎn)/n針對當(dāng)前工業(yè)發(fā)展對脂肪酶的大量需求與脂肪酶實際表達水平較低 的技術(shù)瓶頸，突破了脂肪酶超高效表達技術(shù)關(guān)鍵，建立了真菌脂肪酶高 效表達技術(shù)平臺，構(gòu)建的米根霉脂肪酶基因工程菌 10L 發(fā)酵酶活力可達 40,000U/ml 以上，為當(dāng)前報道的最高水平，具有極強的國際競爭力。產(chǎn) 品可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油制備，飼料添加 劑，再生紙脫墨等廣泛用途。建設(shè)其發(fā)酵生產(chǎn)線預(yù)計需要 800-1000 萬元，經(jīng)濟效益可觀。米根霉脂肪酶可用于油脂水解、轉(zhuǎn)酯，食品加工、烘焙，生物柴油

油脂精煉過程中，脫膠是非常重要的一步工序，脫膠效果的好壞直接影響到油脂精煉的效率和最終產(chǎn)品的質(zhì)量。傳統(tǒng)的脫膠方法常存在產(chǎn)品質(zhì)量不穩(wěn)定、消耗大、得率低、“三廢”排放量大等問題。酶法脫膠工藝是現(xiàn)代工業(yè)生物催化技術(shù)在傳統(tǒng)油脂行業(yè)中的應(yīng)用，是對現(xiàn)有化學(xué)或物理脫膠工藝的改進，以提高其經(jīng)濟性和環(huán)保性，有著廣泛的發(fā)展前景和重要的經(jīng)濟和社會價值。本技術(shù)以自行篩選所得菌株BIT-18表達的磷脂酶為對象，開發(fā)了該磷脂酶在大豆油、菜籽油等常見油脂酶法脫膠中的應(yīng)用，已完成了實驗室工藝優(yōu)化，建立了適于工廠規(guī)模油脂酶法脫膠工藝

糖化酶是糖化工業(yè)的重要酶制劑，但生產(chǎn)上的主要問題是：酶活力低、沒有常溫條件下的酶產(chǎn)品（使得糖化工藝中需要消耗大量能源）。利用定向進化技術(shù)獲取較低溫度下活力提高數(shù)倍~數(shù)十倍的新的酶分子、并確定新基因序列，轉(zhuǎn)化受體菌。 我們的技術(shù)優(yōu)勢：基因分離技術(shù)是我們的優(yōu)勢，已報道全長基因序列15條，在天津基金資助下最近已克隆了糖化酶基因。定向進化是我們目前的主要研究方向之一，在留學(xué)回國科研啟動基金資助下對谷胱苷肽-S-轉(zhuǎn)移酶脫氯活性進行提高，已有研究進展。

全自動酶標(biāo)儀318C+廣泛用于各大高校科研機構(gòu)、技術(shù)質(zhì)量監(jiān)督局、動植物檢疫及食品飼料行業(yè)等，除開展血液學(xué)、免疫學(xué)、腫瘤免疫學(xué)、傳染病免疫學(xué)、TORCH感染免疫學(xué)、基因檢驗項目外、還可以對食品安全三聚氰胺、黃曲霉素、農(nóng)藥殘留、獸藥殘留等所有采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（Elisa）進行項目檢驗，并且有相應(yīng)版本的軟件支持。   產(chǎn)品特點： 1、內(nèi)置嵌入式系統(tǒng)，無需外接電腦即可操作、存儲、打印; 2、測量模式：單波長檢測，雙波長檢測，兩點法，動力學(xué)法，酶抑制率，終點法、速率法。 3、*可選擇吸光度、Cut-Off定性計算、單點定標(biāo)、折線回歸、線性回歸、指數(shù)回歸、對數(shù)回歸、雙對數(shù)回歸、log-logit、冪回歸、四參數(shù)回歸、酶抑制率等計算方法；  4、在同一板上可進行多至12個不同項目的測試，并可同一板檢測定性和定量項目。 5、*全面完善的質(zhì)控功能，包含westguard多規(guī)則質(zhì)控，即刻法質(zhì)控等多種質(zhì)控圖及質(zhì)控參數(shù)計算，具有質(zhì)控報警功能。   技術(shù)參數(shù)： 1、*波長范圍： 400-800nm 2、*濾光片配置：10個濾光片位置，標(biāo)配405nm、450nm、492nm、630nm,選配6定制波長 3、吸光度范圍：0.000―4.000A 4、*光通道數(shù)：8通道光路檢測，另設(shè)一個獨立參比通道（選配） 5、示值穩(wěn)定性：≤±0.002A或≤0.5%T/10min。 6、示值誤差（準(zhǔn)確性）：≤±0.005A或±0.2%T。 7、重復(fù)性：≤0.2%或≤0.2%T。 8、靈敏度：≥0.01（L/mg）。 9、通道差異：≤0.01A。 10、波長示值誤差：±1nm 11、半寬度：≤8nm 12、分辨率：0.001A（顯示），0.0001A（內(nèi)部計算） 13、*讀板速度：單波長≤3秒/96孔，雙波長≤6秒/96孔 14、振板功能：速度和時間可調(diào) 15、光源類型：進口鹵鎢燈 16、板條類型：標(biāo)準(zhǔn)96孔或其他型酶標(biāo)板、條 17、適用孔型：平底、U型和V型 18、顯示方式：7寸彩色液晶顯示屏顯示 19、輸入方式：觸摸屏輸入，可選配鼠標(biāo)和鍵盤 20、打印：內(nèi)置熱敏打印機，可外接打印機 21、數(shù)據(jù)儲存：200,000個測試數(shù)據(jù)，500個以上測試項目（可擴展） 22、接    口： USB(A)口、USB(B)口、串口、并口 23、使用環(huán)境：溫度5-40℃；濕度15%-80% 24、電源電壓：220V±10%，50/60Hz 25、體積：475mm×350mm×210mm（長×寬×高） 27、重量：11.5Kg

報道了pre-tRNA結(jié)合人源tRNA剪接內(nèi)切酶 (tRNA splicing endonuclease, TSEN) 復(fù)合物處于“預(yù)催化”和“催化后”兩種狀態(tài)的高分辨率結(jié)構(gòu)，結(jié)合體外生化，揭示了TSEN復(fù)合物識別和剪切pre-tRNA內(nèi)含子的分子機理。

低聚異麥芽糖作為一種健康糖源和功能性食品添加劑廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、食品和飼料添加劑行業(yè)中。在低聚異麥芽糖的制備過程中，α-葡萄糖苷酶的轉(zhuǎn)糖苷作用是關(guān)鍵步驟。目前國內(nèi)用于低聚異麥芽糖生產(chǎn)的α-葡萄糖苷酶大多為進口品。本項目獲得的?-葡萄糖苷酶生產(chǎn)菌株發(fā)酵液酶活達到 11 U/mL，為國內(nèi)外現(xiàn) 有報道中的最高水平，發(fā)酵工藝簡單易控。重組菌發(fā)酵液經(jīng)過濾除菌并濃縮后可以直接作為酶液進行轉(zhuǎn)化。酶轉(zhuǎn)化生產(chǎn)低聚異麥芽糖轉(zhuǎn)化率與進口酶相似，可以替代進口品。 

本項目針對上述問題，從分子、細(xì)胞和個體水平三個層面上研究人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)生物學(xué)行為及相關(guān)技術(shù)的臨床應(yīng)用，旨在提高兒童腫瘤療效。 1、主要科技內(nèi)容和技術(shù)特點： 1） 率先在國內(nèi)外建立RT-PCR和實時定量RT-PCR檢測hTERT法，該法簡便、快速、經(jīng)濟、安全，適用于臨床推廣應(yīng)用。該項技術(shù)已經(jīng)應(yīng)用于兒童惡性腫瘤診斷、監(jiān)測和指導(dǎo)個體化治療，提高了兒童腫瘤的診療水平。 2）首次在國內(nèi)外研究體內(nèi)造血干細(xì)胞hTERT的生物學(xué)行為，證明了hTERT與促紅細(xì)胞生成素的關(guān)系，并系統(tǒng)研究了惡性腫瘤細(xì)胞hTERT的生物學(xué)行為， 探討腫瘤細(xì)胞中Aurora A與hTERT及端粒酶表達的相關(guān)性，提出hTERT與細(xì)胞因子網(wǎng)絡(luò)紊亂相互作用促進腫瘤發(fā)生和發(fā)展的新觀點，為惡性腫瘤在分子水平上的監(jiān)測和以hTERT為靶點的生物工程治療提供了依據(jù)。 3） 在國內(nèi)外首次闡明端粒酶重建對成纖維細(xì)胞遷移能力和生物節(jié)律的調(diào)控，把端粒酶、hTERT生物學(xué)行為和生物節(jié)律與腫瘤擇時治療有機結(jié)合，為腫瘤治療提供了一條新路徑。實踐證明，在該理論指導(dǎo)下進行化療，可明顯提高腫瘤化療效果，且毒副作用明顯減少。

在 S.pombe 中發(fā)現(xiàn)的一個全新pre-RC組分Sap1，它是pre-RC的裝配過程中不可或缺的一個蛋白: 與ORC一樣，Sap1在細(xì)胞生長周期中與DNA復(fù)制源結(jié)合，通過一系列的功能研究及X射線晶體學(xué)與NMR聯(lián)合的結(jié)構(gòu)功能研究表明，Sap1與通過其九個AT-鉤狀基序結(jié)合不對稱AT富序列的ORC不同，Sap1優(yōu)先結(jié)合5’-（A / T）nC / G（A / T）9-10G / C（A / T）n-3’，對于DNA起始復(fù)制源有一定的序列傾向性。 通過進一步的功能研究證明Sap1和ORC存在相互作用，ORC在招募Cdc18至DNA復(fù)制源時需要Sap1來完成pre-RC組裝，充分表明Sap1是直接參與pre-RC組裝的復(fù)制起始因子，本研究論文表明在S.pombe的DNA復(fù)制過程中，首先需要Sap1與ORC共同結(jié)合到DNA復(fù)制源上從而開啟DNA的起始復(fù)制過程。進一步的研究表明在人類的DNA復(fù)制過程中同樣存在Sap1功能類似的蛋白質(zhì)元件，相關(guān)工作正在進行中。