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對(duì)MxA蛋白進(jìn)行了多種修飾改造，經(jīng)過(guò)不斷探索嘗試后成功獲得了功能基本不受影響的MxA蛋白單體，并利用X射線(xiàn)晶體衍射技術(shù)解析了單體MxA晶體結(jié)構(gòu)。此后，高嵩課題組與中科院生物物理所趙永芳教授課題組合作，根據(jù)結(jié)構(gòu)巧妙設(shè)計(jì)了一系列單分子熒光共振能量轉(zhuǎn)移的實(shí)驗(yàn)，最終通過(guò)這種技術(shù)含量極高的生物物理技術(shù)在單分子水平上揭示了MxA蛋白在GTP水解過(guò)程中實(shí)時(shí)的構(gòu)象變化情況。該研究闡明了MxA蛋白在抗病毒作用過(guò)程中結(jié)構(gòu)改變的動(dòng)態(tài)過(guò)程，有助于全面了解MxA抗病毒的具體分子機(jī)制，并對(duì)人們了解其他dynamin家族成員的具體作用方式有重要的啟發(fā)意義。

產(chǎn)品詳細(xì)介紹蛋白質(zhì)細(xì)胞乳品離心機(jī)性能特點(diǎn)：1、微機(jī)控制，觸摸面板，LCD/LED雙顯示。2、采用交流變頻電機(jī)，全封閉風(fēng)冷谷輪壓縮機(jī)組，無(wú)氟制冷劑。3、可直接設(shè)定轉(zhuǎn)速，自動(dòng)計(jì)算RCF值。可直接設(shè)定RCF值，自動(dòng)轉(zhuǎn)換成轉(zhuǎn)速。4、具有10檔升降速。5、運(yùn)行中可修改參數(shù)，運(yùn)行參數(shù)自動(dòng)記憶。6、具有40種自定義程序存儲(chǔ)功能。7、具有軟剎車(chē)功能。8、具有轉(zhuǎn)子號(hào)識(shí)別功能。9、具有超溫、超速、不平衡和門(mén)蓋安全保護(hù)功能，并在顯示窗口顯示故障信息和聲音報(bào)警。    蛋白質(zhì)細(xì)胞乳品離心機(jī)技術(shù)參數(shù)：型號(hào)名稱(chēng)： Happy-TL21高速大容量冷凍離心機(jī)顯示方式： LCD/LED雙顯示最高轉(zhuǎn)速： 21000rpm轉(zhuǎn)速精度： ±30rpm最大相對(duì)離心力： 30700×g最大容量： 4×750mL控溫范圍： －20～40℃控溫精度： ±1℃定時(shí)范圍： 0～99h59min59s電機(jī)： 交流變頻制冷系統(tǒng)： 全封閉風(fēng)冷谷輪壓縮機(jī)組，無(wú)氟制冷劑門(mén)鎖： 電子門(mén)鎖噪音： ≤60dB電源： AC220V，50Hz，2.5kW，25A內(nèi)膽材質(zhì)： 不銹鋼箱體材質(zhì)： 優(yōu)質(zhì)鋼板外形尺寸： 800×700×400mm重量： 110kg    蛋白質(zhì)細(xì)胞乳品離心機(jī)轉(zhuǎn)子：NO.1角轉(zhuǎn)子： 21000rpm，30700×g，18×0.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.2角轉(zhuǎn)子： 21000rpm，30700×g，12×2.2/1.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.3角轉(zhuǎn)子： 16000rpm，23550×g，48×0.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.4角轉(zhuǎn)子： 16000rpm，23550×g，24×2.2/1.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.5角轉(zhuǎn)子： 16000rpm，17420×g，10×5mL，航空鋁材質(zhì)NO.6角轉(zhuǎn)子： 15000rpm，24300×g，32×2.2/1.5mL，航空鋁材質(zhì)NO.7角轉(zhuǎn)子： 15000rpm，23120×g，12×10mL，航空鋁材質(zhì)NO.8角轉(zhuǎn)子： 14000rpm，20150×g，6×50mL，航空鋁材質(zhì)NO.9角轉(zhuǎn)子： 14000rpm，21940×g，4×100mL，航空鋁材質(zhì)NO.10角轉(zhuǎn)子： 12000rpm，13200×g，12×15mL，航空鋁材質(zhì)NO.11角轉(zhuǎn)子： 9000rpm，10500×g，24×10mL，航空鋁材質(zhì)NO.12水平轉(zhuǎn)子： 5000rpm，4390×g，4×50mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.1管架： 5000rpm，4390×g，4×100mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.2管架： 4000rpm，3500×g，4×8×10mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.3管架： 4000rpm，3500×g，4×8×15mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.4管架： 4000rpm，3500×g，4×2×50mL，不銹鋼材質(zhì)NO.12.5管架： 4000rpm，3500×g，4×2×100mL，不銹鋼材質(zhì)NO.13水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，3500×g，4×250mL，鋼、航空鋁材質(zhì)NO.13.1適配器： 4000rpm，3500×g，4×8×10mL，尼龍材質(zhì)NO.13.2適配器： 4000rpm，3500×g，4×8×15mL，尼龍材質(zhì)NO.13.3適配器： 4000rpm，3500×g，4×2×50mL，尼龍材質(zhì)NO.13.4適配器： 4000rpm，3500×g，4×100mL，尼龍材質(zhì)NO.14水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，3580×g，4×500mL，鋼、航空鋁材質(zhì)NO.14.1適配器： 4000rpm，3580×g，4×12×10mL，尼龍材質(zhì)NO.14.2適配器： 4000rpm，3580×g，4×8×15mL，尼龍材質(zhì)NO.14.3適配器： 4000rpm，3580×g，4×4×50mL，尼龍材質(zhì)NO.14.4適配器： 4000rpm，3580×g，4×2×100mL，尼龍材質(zhì)NO.14.5適配器： 4000rpm，3580×g，4×250mL，尼龍材質(zhì)NO.15水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，3580×g，4×750mL，鋼、航空鋁材質(zhì)NO.16水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2800×g，4×12×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.17水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2800×g，4×18×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.18水平轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2800×g，4×24×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.19水平轉(zhuǎn)子（自動(dòng)脫帽）： 4000rpm，3500×g，4×12×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.20水平轉(zhuǎn)子（自動(dòng)脫帽）： 4000rpm，3500×g，4×18×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.21水平轉(zhuǎn)子（自動(dòng)脫帽）： 4000rpm，3580×g，4×24×7/5mL，鋼、尼龍材質(zhì)NO.22水平酶標(biāo)板轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2300×g，2×2×48孔，鋼、不銹鋼材質(zhì)NO.23水平酶標(biāo)板轉(zhuǎn)子： 4000rpm，2300×g，2×2×96孔，鋼、不銹鋼材質(zhì)    想了解更多信息，請(qǐng)進(jìn)入http://www.fudizao.com    

RNA病毒一直給人類(lèi)健康帶來(lái)巨大威脅。分節(jié)段負(fù)鏈RNA病毒（sNSV）通過(guò)自身攜帶的RNA聚合酶搶奪宿主細(xì)胞mRNA的5’端帽子結(jié)構(gòu)，轉(zhuǎn)錄為病毒mRNA，合成的病毒mRNA是由宿主基因和病毒基因組成的嵌合mRNA。此過(guò)程被稱(chēng)為“Cap-snatching”，是sNSV復(fù)制周期中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。 一直以來(lái)，人們認(rèn)為：病毒mRNA翻譯的蛋白只包含病毒基因的開(kāi)放閱讀框（ORF），宿主來(lái)源的mRNA序列的作用是其5’端帽子結(jié)構(gòu)可供宿主細(xì)胞翻譯體系識(shí)別，其他宿主源遺傳信息沒(méi)有合成病毒蛋白的功能。 該研究揭示了病毒編碼蛋白的新機(jī)制。 研究發(fā)現(xiàn)，病毒搶奪過(guò)來(lái)的宿主源mRNA片段，不僅起到5’端帽子結(jié)構(gòu)的作用，而且這些宿主源mRNA片段包括起始密碼子（AUG），宿主細(xì)胞可以從宿主的AUG開(kāi)始翻譯，編碼兩類(lèi)宿主與病毒的嵌合蛋白。若宿主源AUG與原有病毒蛋白ORF在同一讀碼框中（in-frame），產(chǎn)生的蛋白為 N 端延長(zhǎng)的宿主與病毒嵌合蛋白； 若宿主源AUG與原有病毒蛋白ORF不在同一讀碼框中（off-frame），產(chǎn)生的蛋白為新型的嵌合蛋白（Novel host-virus encoded proteins）。 進(jìn)一步研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)：流感病毒感染細(xì)胞后可以產(chǎn)生上述兩類(lèi)嵌合蛋白，這些嵌合蛋白可以誘導(dǎo)T細(xì)胞反應(yīng)，并且與病毒的毒力相關(guān)。該研究提示，這種新的病毒蛋白編碼機(jī)制可能不僅僅局限于流感病毒，在其他人類(lèi)病毒、動(dòng)物病毒和植物病毒中也廣泛存在這種宿主與病毒嵌合蛋白的編碼機(jī)制。 本研究是由美國(guó)紐約西奈山伊坎醫(yī)學(xué)院（Icahn School of Medicine at Mount Sinai）牽頭，多國(guó)科研工作者共同合作完成。

本發(fā)明提供了一種單鏈片段抗體-多肽融合蛋白及其應(yīng)用,該蛋白是一種具有結(jié)合 Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物雙向功能的融合蛋白,可以作為抗癌siRNA的藥物 載體。其中,單鏈片段抗體為Her2-ScFv,多肽為魚(yú)精蛋白片段多肽。該單鏈片段抗 體-多肽融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示的序列。本發(fā)明構(gòu)建的Her2單鏈片段抗 體與魚(yú)精多肽的融合蛋白具有結(jié)合Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物的雙向功能。本 發(fā)明的融合蛋白能把抗癌siRNA藥物定向?qū)肽繕?biāo)癌細(xì)胞中,開(kāi)發(fā)了非病毒載體工 具,加速RNAi技術(shù)應(yīng)用于臨床。

項(xiàng)目成果/簡(jiǎn)介:本發(fā)明提供了一種單鏈片段抗體-多肽融合蛋白及其應(yīng)用,該蛋白是一種具有結(jié)合 Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物雙向功能的融合蛋白,可以作為抗癌siRNA的藥物 載體。其中,單鏈片段抗體為Her2-ScFv,多肽為魚(yú)精蛋白片段多肽。該單鏈片段抗 體-多肽融合蛋白的序列如SEQ ID NO.1所示的序列。本發(fā)明構(gòu)建的Her2單鏈片段抗 體與魚(yú)精多肽的融合蛋白具有結(jié)合Her2受體和攜帶抗癌siRNA藥物的雙向功能。本 發(fā)明的融合蛋白能把抗癌siRNA藥物定向?qū)肽繕?biāo)癌細(xì)胞中,開(kāi)發(fā)了非病毒載體工 具,加速RNAi技術(shù)應(yīng)用于臨床。項(xiàng)目階段:成果已轉(zhuǎn)化

本發(fā)明涉及一種TNFSF15可溶性蛋白的純化方法，包括如下步驟：(1).IPTG誘導(dǎo)、(2).菌體裂解、(3).上柱洗脫、(4).除鹽分裝。本發(fā)明純化方案通過(guò)低溫誘導(dǎo)的方式，并且以很低的IPTG誘導(dǎo)濃度，降低蛋白在包涵體中的表達(dá)，提升可溶性蛋白的含量，并用較為溫和的裂解純化方式，提高蛋白的穩(wěn)定性和活性。并且操作簡(jiǎn)便，制作周期短，消耗資源少，方便放大生產(chǎn)。

南京農(nóng)業(yè)大學(xué)植物保護(hù)學(xué)院吳益東教授團(tuán)隊(duì)在Bt殺蟲(chóng)機(jī)制研究方面取得重要進(jìn)展，發(fā)現(xiàn)了Bt殺蟲(chóng)蛋白對(duì)棉鈴蟲(chóng)的一種新型“雙通道”殺蟲(chóng)機(jī)制。 吳益東教授團(tuán)隊(duì)的最新研究發(fā)現(xiàn)，棉鈴蟲(chóng)ABC轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白ABCC2和ABCC3均為Bt受體，用CRISPR基因編輯技術(shù)分別敲除這兩個(gè)基因，不能獲得Bt抗性；而同時(shí)敲除這兩個(gè)基因后獲得了超過(guò)1.5萬(wàn)倍的極高水平抗性。這意味著，同時(shí)敲除這兩個(gè)基因會(huì)使Bt毒素對(duì)棉鈴蟲(chóng)的進(jìn)攻完全失效。 吳益東解釋?zhuān)珹BCC2和ABCC3是一對(duì)結(jié)構(gòu)高度相似、功能相互重疊的Bt受體，Bt毒素在尋找受體發(fā)起攻勢(shì)時(shí)，相當(dāng)于獲取了深入敵營(yíng)的“雙重通道”。因此，棉鈴蟲(chóng)缺失ABCC2和ABCC3中的任何一個(gè)受體均不影響B(tài)t的殺蟲(chóng)效果，從而限制了棉鈴蟲(chóng)在ABCC2和ABCC3通路上的抗性進(jìn)化能力。 棉鈴蟲(chóng)和Bt毒素的攻防之間，存在著相互適應(yīng)、協(xié)同進(jìn)化的復(fù)雜關(guān)系。在Bt毒素對(duì)棉鈴蟲(chóng)“雙通道”殺蟲(chóng)機(jī)制的壓制下，棉鈴蟲(chóng)可以避其鋒芒，在Bt毒素進(jìn)攻薄弱環(huán)節(jié)進(jìn)化出新的抗性機(jī)制。在吳益東教授團(tuán)隊(duì)的前期研究中，發(fā)現(xiàn)了棉鈴蟲(chóng)為削弱Bt殺蟲(chóng)能力進(jìn)化出的2種抗性機(jī)制：一種是棉鈴蟲(chóng)Bt受體HaCad（一種鈣粘蛋白）通過(guò)基因缺失突變，另一種是四跨膜蛋白TSPAN1通過(guò)L31S點(diǎn)突變，在這兩種情況下，棉鈴蟲(chóng)通過(guò)喪失HaCad的受體功能或增強(qiáng)腸道修復(fù)能力，使Bt抗性顯著增強(qiáng)。 團(tuán)隊(duì)的研究還發(fā)現(xiàn)，我國(guó)棉鈴蟲(chóng)田間抗性個(gè)體攜帶的抗性基因在2010年前以HaCad突變?yōu)橹鳎?013年后以TSPAN1點(diǎn)突變?yōu)橹鳎形丛谔镩g檢測(cè)到ABCC2和ABCC3突變，其中原因，可能正是這次的研究所揭示的，是ABCC2和ABCC3這一對(duì)功能冗余的受體為Bt毒素的進(jìn)攻提供了相互并聯(lián)的“雙通道”，因此捆住了棉鈴蟲(chóng)利用這一對(duì)受體發(fā)生變異而逃逸攻擊的“手腳”。

我校萬(wàn)建民院士團(tuán)隊(duì)在植物學(xué)權(quán)威刊物《The Plant Cell》在線(xiàn)出版了題為“GPA5encodes a Rab5a effector required for post-Golgi trafficking of rice storageproteins”的研究成果。 萬(wàn)建民院士團(tuán)隊(duì)發(fā)現(xiàn)了一個(gè)新的谷蛋白后高爾基體分選缺陷突變體gpa5，通過(guò)圖位克隆的方法證實(shí)GPA5編碼一個(gè)具有磷脂結(jié)合能力的植物特有調(diào)控因子。在胚乳細(xì)胞中，GPA5特異分布在致密囊泡外圍。亞細(xì)胞定位分析證實(shí)GPA5的膜定位依賴(lài)于前期鑒定的GPA1/Rab5a和GPA2/VPS9a。生化分析進(jìn)一步證實(shí)GPA5可特異與GPA1/Rab5a的激活態(tài)形式互作，表明GPA5可能是GPA1/Rab5a的效應(yīng)子（effector）。后續(xù)的功能研究發(fā)現(xiàn)，GPA5可與栓系復(fù)合體CORVET和含有VAMP727的膜融合復(fù)合體SNARE互作，介導(dǎo)致密囊泡與蛋白貯藏液泡的膜融合，以完成谷蛋白的轉(zhuǎn)運(yùn)。 萬(wàn)建民院士團(tuán)隊(duì)以解析水稻谷蛋白合成、轉(zhuǎn)運(yùn)和沉積的分子網(wǎng)絡(luò)途徑為目標(biāo)，長(zhǎng)期致力于稻米蛋白品質(zhì)改良的分子遺傳基礎(chǔ)研究。本研究是該團(tuán)隊(duì)在《植物細(xì)胞（The Plant Cell）》和《分子植物（Molecular Plant）》等雜志相繼報(bào)道GPA1/Rab5a, GPA2/VPS9a,GPA3和GPA4/Got1B調(diào)控谷蛋白分選后，在稻米蛋白品質(zhì)形成的分子機(jī)理研究中取得的又一重要進(jìn)展，進(jìn)一步豐富了人們對(duì)谷蛋白轉(zhuǎn)運(yùn)分子網(wǎng)絡(luò)途徑的認(rèn)識(shí)，為稻米蛋白品質(zhì)的改良奠定了理論基礎(chǔ)。

西湖大學(xué)周強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室利用冷凍電鏡技術(shù)成功解析此次新冠病毒的受體——ACE2的全長(zhǎng)結(jié)構(gòu)。這是世界上首次解析出ACE2的全長(zhǎng)結(jié)構(gòu)。相關(guān)研究?jī)?nèi)容于北京時(shí)間2月19日凌晨3點(diǎn)左右在預(yù)印版平臺(tái)bioRxiv上線(xiàn)。這也是西湖大學(xué)承擔(dān)的浙江省新型冠狀病毒肺炎防治應(yīng)急科研攻關(guān)任務(wù)的重要成果。 新型冠狀病毒感染引發(fā)的肺炎疫情爆發(fā)后，武漢病毒研究所的科學(xué)家發(fā)現(xiàn)，新型冠狀病毒和2003年的SARS病毒一樣，也是通過(guò)識(shí)別ACE2蛋白進(jìn)入人體細(xì)胞的，ACE2是“新冠病毒”侵入人體的關(guān)鍵。研究發(fā)現(xiàn)，在SARS病毒和“新冠病毒”侵入人體的過(guò)程中，ACE2就像是“門(mén)把手”，病毒抓住它，從而打開(kāi)了進(jìn)入細(xì)胞的大門(mén)。 周強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室針對(duì)這個(gè)問(wèn)題進(jìn)行了攻堅(jiān)。第一步，他們要獲取ACE2蛋白全長(zhǎng)蛋白，但作為膜蛋白的ACE2本身很難在體外穩(wěn)定獲得。周強(qiáng)及博士后鄢仁鴻在文獻(xiàn)中發(fā)現(xiàn)ACE2與腸道內(nèi)的一個(gè)氨基酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白B0AT1能夠形成復(fù)合物。根據(jù)他們過(guò)去的研究經(jīng)驗(yàn)，這個(gè)復(fù)合物極有可能穩(wěn)定住ACE2。果然，他們通過(guò)共表達(dá)的方法獲得了ACE2與B0AT1優(yōu)質(zhì)穩(wěn)定的復(fù)合物，并利用西湖大學(xué)的冷凍電鏡平臺(tái)成功解析了其三維結(jié)構(gòu)，分辨率達(dá)到2.9埃，對(duì)于病毒識(shí)別至關(guān)重要的胞外結(jié)構(gòu)域分辨率為2.7埃。通過(guò)分析ACE2的全長(zhǎng)蛋白結(jié)構(gòu)，周強(qiáng)實(shí)驗(yàn)室發(fā)現(xiàn)ACE2以二聚體形式存在，同時(shí)具有開(kāi)放和關(guān)閉兩種構(gòu)象變化，但兩種構(gòu)象均含有與冠狀病毒的相互識(shí)別界面。一研究發(fā)現(xiàn)為進(jìn)一步解析全長(zhǎng)ACE2和新冠病毒的S蛋白復(fù)合物的三維結(jié)構(gòu)奠定了基礎(chǔ)。

本發(fā)明公開(kāi)了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3編碼的核酸序列，所分離出的DNA分子包括：編碼具有蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3活性的多肽核苷酸序列，該核苷酸序列與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第767-871位的核苷酸序列有至少70％的同源性；或者該核苷酸序列能在40-55℃條件下與SEQ？ID？NO：1中從核苷酸第767-871位的核苷酸序列雜交。本發(fā)明還同時(shí)公開(kāi)了一種蝶蛹金小蜂抗菌蛋白多肽Pp-AP3，其具有SEQ？ID？NO：2所示的氨基酸序列。本發(fā)明的蝶蛹金小蜂抗菌蛋白Pp-AP3具有抗菌性能。