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牛傳染性鼻氣管炎ΔTK/ΔgE基因缺失標(biāo)志活疫苗及制備技術(shù)
牛傳染性鼻氣管炎俗稱紅鼻子病，是由牛皰疹病毒1型（BHV-1）引起的一種牛的急性、熱性、接觸性傳染病，主要引起呼吸道和生殖道疾病。該病的發(fā)生極大地降低了奶牛的產(chǎn)奶量、公牛的繁殖力及役用牛的使役力，并產(chǎn)生呼吸道感染還容易繼發(fā)牛的細菌性肺炎，疫苗是防制該病的關(guān)鍵。
該項目所用的材料是牛皰疹病毒1型BHV-1臨床分離株，具有全部的毒力因子和其他免疫原性很好的抗原。因此，以該病毒為基礎(chǔ)構(gòu)建的牛傳染性鼻氣管炎ΔTK/ΔgE基因缺失標(biāo)志菌株所制備的基因工程疫苗對牛免疫具有很強的針對性，具有廣闊的市場應(yīng)用前景。
α皰疹病毒成員的主要毒力基因TK基因和牛皰疹病毒1型的十個囊膜糖蛋白之一gE基因的缺失疫苗相較只缺失TK或gE基因的缺失的疫苗更安全可靠，更方便實際操作。
目前國內(nèi)尚無商品化的IBR疫苗和試劑盒上市。該項目通過開展診斷方法研究與疫苗免疫效果評價，制定相對應(yīng)的綜合防控技術(shù)措施，其實用性和可操作性強，有望獲得具有自主知識產(chǎn)權(quán)的基因缺失標(biāo)記疫苗和快速診斷試劑盒，可以保障肉牛業(yè)和奶牛業(yè)的健康發(fā)展，增加農(nóng)民收入，保障畜禽產(chǎn)業(yè)鏈的運行，穩(wěn)定牛肉牛奶供應(yīng)，產(chǎn)生較大的社會經(jīng)濟發(fā)展作用，具有在全國推廣應(yīng)用的價值，推廣前景看好。
轉(zhuǎn)化條件：具有GMP車間，實現(xiàn)規(guī)模化生產(chǎn)。
成果完成時間：2016年
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-01-12
缺失gG和TK基因的重組牛傳染性鼻氣管炎病毒和應(yīng)用
1、 主要解決的技術(shù)問題
該研究通過定向基因缺失技術(shù)將牛傳染性鼻氣管炎病毒的毒力基因TK和必需基因gG缺失，得到了牛傳染性鼻氣管炎的gG和TK雙基因缺失突變株。疫苗免疫是防制牛傳染性鼻氣管炎的根本措施，滅活疫苗不能區(qū)分野毒感染和疫苗免疫牛，弱毒疫苗有殘余毒力和返強風(fēng)險，本研究獲得的牛傳染性鼻氣管炎的gG和TK雙基因缺失突變株，可區(qū)分野毒感染牛和疫苗免疫牛，是血清學(xué)“標(biāo)志”疫苗，為我國牛傳染性鼻氣管炎根除計劃提供了技術(shù)支撐。
2、先進性及主要技術(shù)指標(biāo)
（1）先進性該研究是由我國自主研發(fā)，具有完全知識產(chǎn)權(quán)的牛傳染性鼻氣管炎的gG和TK雙基因缺失突變株。
（2）主要技術(shù)指標(biāo)gG基因缺失，TK基因缺失，接種MDBK細胞24-48小時可產(chǎn)生細胞病變，4×105PFU/頭份接種試驗牛即可產(chǎn)生良好的免疫反應(yīng)。
1、市場前景：目前我國尚無自主研發(fā)的、獲批的牛傳染性鼻氣管炎基因標(biāo)記疫苗用于牛傳染性鼻氣管炎的預(yù)防，牛傳染性鼻氣管炎每年給我國的養(yǎng)牛產(chǎn)業(yè)造成巨大的經(jīng)濟損失，市場上急需可以有效防控牛傳染性鼻氣管炎并區(qū)分野毒感染牛和疫苗免疫牛的的疫苗產(chǎn)品，牛鼻氣管炎病毒gG和TK雙基因缺失疫苗的市場前景廣闊。
2、預(yù)期經(jīng)濟效益：銷售成本：18/頭份 銷售價格：30元/頭份 年產(chǎn)值：3000萬元 年利稅：600萬元。
轉(zhuǎn)化條件：
按年產(chǎn)100萬頭份計算，投資總額：1000萬，所需廠房:800-1000平方米，所需人員：15人，主要設(shè)備：GMP車間、懸浮培養(yǎng)生產(chǎn)線、脈動真空高壓滅菌鍋、洗烘聯(lián)動機、分裝扎蓋機、貼簽機等。
成果完成時間：2012年7月
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-01-12
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目的基因轉(zhuǎn)化甜櫻桃的方法及其在甜櫻桃原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用
本發(fā)明公開了目的基因轉(zhuǎn)化甜櫻桃的方法及其在甜櫻桃原生質(zhì)體瞬時轉(zhuǎn)化中的應(yīng)用。本發(fā)明公開的甜櫻桃轉(zhuǎn)化方法包括：將甜櫻桃果肉愈傷組織進行懸浮繼代培養(yǎng)，得到懸浮細胞；將懸浮細胞用CPW13M進行處理，得到CPW13M處理的懸浮細胞，CPW13M為向細胞?原生質(zhì)體清洗液中加入甘露醇得到的甘露醇質(zhì)量百分比濃度為11％?15％的溶液；用纖維素酶和果膠酶酶解CPW13M處理的懸浮細胞得到甜櫻桃原生質(zhì)體；以甜櫻桃原生質(zhì)體為受體進行甜櫻桃轉(zhuǎn)化。實驗證明，本發(fā)明的甜櫻桃轉(zhuǎn)化方法可以將目的基因在甜櫻桃原生質(zhì)體中進行瞬時表達，可以用來進行目的基因的功能驗證及蛋白質(zhì)和細胞器的定位，還可用來檢測蛋白質(zhì)互作及細胞代謝。
中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
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一對轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶及其編碼基因與應(yīng)用
本發(fā)明公開了一對轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶及其編碼基因與應(yīng)用。這對轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶(TALEN)由一對DNA識別蛋白分別與Fok1？DNA內(nèi)切酶的兩個異源亞基融合得到，可以特異性地識別山羊或綿羊朊蛋白基因(PRNP)exon2上的兩個相鄰位點。將這對轉(zhuǎn)錄激活子樣效應(yīng)因子核酸酶同時轉(zhuǎn)入宿主細胞時，其能對宿主細胞PRNP基因的exon2位點打靶，并使打靶位點發(fā)生基因突變，從而實現(xiàn)對山羊或綿羊PRNP基因的靶向修飾，具有特異性強、打靶效率高、準(zhǔn)確度高等優(yōu)點。
浙江大學(xué)
2021-04-11
與玉米雄性核不育相關(guān)的基因MS33及其在雜交育種中的應(yīng)用
本發(fā)明公開了一種與玉米雄性核不育相關(guān)的基因MS33及其在雜交育種中的應(yīng)用。本發(fā)明提供了一種與玉米雄性核不育相關(guān)的MS33蛋白，是如下(a)或(b)：(a)由序列表中序列1所示的氨基酸序列組成的蛋白質(zhì)；(b)將序列1的氨基酸序列經(jīng)過一個或幾個氨基酸殘基的取代和/或缺失和/或添加，且與植物雄性育性相關(guān)的由序列1衍生的蛋白質(zhì)。MS33基因突變導(dǎo)致玉米完全雄性不育，性狀徹底，不受環(huán)境影響。該基因具有在玉米雜交種子生產(chǎn)上的應(yīng)用潛力。
中國農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-04-11
一種豬藍耳病基因重組豬霍亂沙門氏菌疫苗及應(yīng)用
研發(fā)階段/n一種豬藍耳病基因重組豬霍亂沙門氏菌疫苗及應(yīng)用。 成果簡介：沙門氏菌是一種胞內(nèi)寄生的革蘭氏陰性腸道桿菌，具有侵襲性。減毒沙門氏菌為載體的基因工程疫苗具有無法比擬的優(yōu)越性，口服該種基因工程疫苗可以在激發(fā)產(chǎn)生抗沙門氏菌免疫應(yīng)答的同時誘發(fā)特異性針對外源蛋白的體液和細胞免疫。豬藍耳病是由豬繁殖與呼吸綜合征病毒（PRRSV）引起的一種以妊娠母豬繁殖障礙以及仔豬呼吸道疾病的高度接觸傳染病，可對豬場造成巨大的損失。本發(fā)明涉及一種豬藍耳病基因重組豬霍亂沙門氏菌疫苗及應(yīng)用，屬于動物細菌基因工程技術(shù)領(lǐng)域，具
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-01-12
一種適用于轉(zhuǎn)人α-乳清蛋白基因牛的快速簡便檢測方法
研發(fā)階段/n是用于轉(zhuǎn)α-乳清蛋白基因牛的快速簡便檢測方法，該專利可在2小時內(nèi)快速檢測牛基因組中是否有轉(zhuǎn)入的外源α-乳清蛋白基因牛。
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-01-12
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檢測基因P53的比率電化學(xué)DNA傳感器修飾電極及其制備方法
本發(fā)明涉及電化學(xué)檢測技術(shù)領(lǐng)域，具體公開了一種用于檢測腫瘤抑制基因p53的修飾電極及其制備方法。用于檢測P53基因的探針，由一條單鏈DNA輔助探針S1和一條單鏈DNA捕獲探針S2組成，所述S1的DNA鏈序列為：5’-Fc-CTC TCA GTG ATT TTT TTA GTG AGA GAG-(CH2)6-SH-3’，所述S2的DNA鏈序列為：5’-MB-TCA CTG AGT CTT CCA GTG TGA TGA TCA CT-3’。 本發(fā)明所提供的方法制備簡單，操控方便，使用成本低，與毛細管電泳、變性高效液相色譜、變性梯度凝膠電泳以及酵母中分離的等位基因功能分析技術(shù)等方法相比較，電化學(xué)生物傳感器的方式具有樣品無需前處理，易操控，反應(yīng)條件簡單、成本低等優(yōu)點。腫瘤抑制基因P53是一種被稱為“基因組的守護者”的抑癌基因，是一系列同工型蛋白質(zhì)（P53蛋白）的同源基因。由該基因編碼的一系列蛋白質(zhì)具有調(diào)控細胞分裂、修復(fù)和凋亡的作用。國際癌癥基因組協(xié)會已經(jīng)證明，P53基因是在人類癌癥有關(guān)的基因中突變最為頻繁的基因。在人類已知的所有惡性腫瘤組織中，該基因出現(xiàn)突變的概率在50%以上，是迄今為止人類發(fā)現(xiàn)的與癌癥相關(guān)性最高的基因。因此檢測P53基因?qū)εR床上預(yù)防和治療癌癥有著非常重要的作用，本方法制備簡單，操控方便，使用成本低，在醫(yī)學(xué)上有廣闊的應(yīng)用前景。
青島大學(xué)
2021-04-13
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與蘋果抗炭疽菌葉枯病基因位點緊密連鎖的分子標(biāo)記及應(yīng)用
本發(fā)明提出一種與蘋果抗炭疽菌葉枯病基因位點緊密連鎖的分子標(biāo)記及其應(yīng)用，分子標(biāo)記包括6個SNP標(biāo)記以及5個InDel標(biāo)記，分別為SNP3955，SNP4236，SNP4257，SNP4299，SNP4336，SNP4432，InDel4199，InDel4227，InDel4254，InDel4305及InDel4334。此外，本發(fā)明還提出篩選該標(biāo)記的方法，以及上述標(biāo)記的應(yīng)用。本發(fā)明利用全基因組重測
青島農(nóng)業(yè)大學(xué)
2021-01-12
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西南大學(xué)家蠶超級泛基因組圖譜繪就 ——創(chuàng)建“數(shù)字家蠶”，賦能設(shè)計育種
家蠶基因組生物學(xué)國家重點實驗室主任、國家蠶桑產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系首席科學(xué)家代方銀教授團隊完成家蠶大規(guī)模種質(zhì)資源基因組解析（“千蠶基因組”），繪就家蠶超級泛基因組。
西南大學(xué)
2022-10-14