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將β-環糊精和偶氮苯基團分別修飾于紫杉醇分子上，利用紫杉醇分子骨架與微管蛋白的特異性結合能力，以及在紫外和可見光照射下偶氮苯分子與β-環糊精空腔可逆鍵合的性質，來調控微管蛋白的聚集狀態，進而影響細胞活性。光譜實驗表明，含有紫杉醇的偶氮苯分子在溶液中具有優異的光致異構性質、掃描電鏡實驗發現，只有在反式偶氮苯修飾紫杉醇和β-環糊精修飾紫杉醇共同存在下，微管蛋白間才能發生明顯的聚合現象，同時微管蛋白的形貌由絲狀聚合物轉變成了粒徑較大的球狀納米粒子。通過對細胞染色進一步發現，聚集后的微管廣泛分布在細胞中，能夠強烈改變細胞的形態并最終導致細胞死亡。該工作為調控生物大分子的聚集行為提供了一種新的策略。

1.簡介 簡單介紹項目/成果背景，解決的行業瓶頸問題或行業共性關鍵問題。 目前核桃加工主要是通過冷榨法制取核桃油，同時獲得富含蛋白的核桃粕。由于核桃壓榨時，一般都不脫除核桃衣，導致了核桃粕的食用性能差，一般只用做飼料。本項目將核桃進行脫衣，再通過水提和分離，實現油脂體和蛋白的高效分離。在不使用有機溶劑和酶制劑的條件下，將油脂體加工成核桃油和蛋白-磷脂濃縮物，并同時制取高純度核桃蛋白。 2.創新要點 介紹本項目的主要創新點，總體水平（處于國內/國際先進/領先水平等）。 （1）除了制取核桃油，還可同步制取蛋白-磷脂濃縮物，可作為天然乳化劑； （2）除了制取上述兩種核桃油脂產品，還可同步制取貯藏性能佳的高純度核桃蛋白粉。 通過與現有核桃加工技術的對比，本項目處于國際領先水平。 3.關鍵指標 （1）每千克核桃仁，可制取580g左右的核桃油，30g左右的蛋白-磷脂濃縮物，100g左右的核桃蛋白粉（蛋白含量80%以上）； （2）蛋白-磷脂濃縮物成分含量：67%中性脂質、10%具有極佳乳化性能的膜蛋白、9%核桃蛋白、7%磷脂、7%其它成分（包含鞘氨醇等）； （3）核桃蛋白粉中的精氨酸含量高達13%，是精氨酸的良好來源。

蛋白質之間的相互作用對生命活動至關重要。盡管已有不少體內研究蛋白互作的方法，但由于許多蛋白互作是高度動態的，因此用傳統的方法難以捕獲。本研究基于“招募”和“聚集”的原理，即將“誘餌”蛋白A錨定在線粒體的外膜上，如B蛋白能與A蛋白互作，則將被“捕獲”到線粒體外膜，發生富集；如C蛋白不與A蛋互作，則不會發生定位變化（圖1）。文章首先用線粒體錨定（Mito-docking）的方法有效驗證了G蛋白亞基γ2和β1間的互作，并進一步運用該方法研究了核轉運受體（importinαisoforms）與貨物蛋白（經典的核定位信號cNLS）之間的互作，揭示了核轉運受體-貨物蛋白的識別特異性

一種類轉錄激活因子(TranscriptionActivatorLikeEffectors，TALE)，其特征在于所述類轉錄激活因子(TALE)能夠與人類CCR5基因活性區域或者CXCR4基因活性區域中的DNA片段識別并結合，所述人類CCR5基因活性區域一共有3個，所述CXCR4基因活性區域一共有2個。TALE與核酸內切酶連接形成融合蛋白TALEN，利用該TALEN對CCR5基因或者CXCR4基因的特定位點進行剪切，可以使得進行基因調控后的細胞具備抵御HIV病毒的能力。

研發階段/n一種牛奶中人乳鐵蛋白篩查試紙條及制備方法，該專利技術可在30分鐘內檢測牛奶中是否有轉入的外源人乳鐵蛋白。

本發明公開了一種魚類NKEF-A重組蛋白對適應性體液免疫的活化效應及其應用，所述的應用為用于制備能夠促進魚類體液免疫能力的免疫增強劑，所述魚類NKEF-A重組蛋白的氨基酸序列為SEQID?NO:1所示；本發明提供的NKEF-A重組蛋白作為適應性體液免疫增強劑，其優點在于：(1)使用劑量小，效率高；以1:100(NKEF-A蛋白:抗原)的NKEF-A重組蛋白劑量即可發揮顯著的免疫促進作用；(2)易于制備免疫混合液：NKEF-A重組蛋白是可溶性蛋白，容易與抗原混合，克服了傳統礦物油乳劑類制劑不易乳化抗原的缺點；(3)安全性高；與細菌毒素或化合物制劑不同，NKEF-A是宿主自身的蛋白，不存在外源物質導入產生的潛在毒副作用。

本研究成果是立足我國蛋白質飼料資源短缺、人畜爭糧、畜禽對飼料蛋白質利用率低以及動物糞便中含氮物質排放污染環境等現實問題，開展的以提高飼料蛋白質消化率、減少糞尿氮排放，和提高飼料蛋白質資源利用率為主要目標的系列研究，獲 2012 年江蘇省科學技術三等獎。該成果提高反芻動物生產率 5-10%、 N 素減排 5-7%。

現有問題：現有的血紅蛋白類攜氧載體（HBOCs）主要為小分子修飾血紅蛋白、交聯劑聚合血紅蛋白以及包裹血紅蛋白。這些HBOCs制品的毒副作用在動物實驗和I, II, III期臨床試驗均有報道。正是基于臨床試驗中發現的HBOCs引起高血壓反應及增加病人心肌梗死的風險，2009年美國FDA拒絕了Northfield公司HBOCs產品（PolyHeme）的上市請求。現有HBOCs制品輸注后的毒副反應，主要是由于HBOC中游離或未聚合的血紅蛋白，包括氧合或非氧合狀態，透過內皮屏障，消耗內皮舒張因子一氧化氮（NO）；同時，血紅蛋白本身的氧化還原反應，生成的氧自由基造成機體氧化應激反應。 項目的創新性和優越性：? 本項目制備的新型攜氧納米粒子，完全不同于現有HBOCs制品，首先在納米粒子中包裹一定劑量的抗氧化劑，有效減少輸注血紅蛋白氧載體后可能產生的氧自由基。然后，通過結合珠蛋白將血紅蛋白穩定連接到納米粒子外膜。結合珠蛋白能與游離血紅蛋白結合成穩定的復合物，一方面避免了體內過量的游離血紅蛋白出現，減少輸注后縮血管效應引起的高血壓現象和胃腸道反應；另一方面，結合珠蛋白本身也可作為還原劑，減少血紅蛋白引起的氧化應激反應。?該新型攜氧納米粒子體內的代謝方式為納米粒子崩解后，結合珠蛋白/血紅蛋白復合物經網狀內皮系統清除，可大大減輕經腎臟排泄可能造成的腎損傷。?現有HBOCs類制品，特別是聚合血紅蛋白和包裹血紅蛋白，往往包含數量不等的血紅蛋白，分子量處于一定范圍，而且，還有部分游離血紅蛋白或未反應血紅蛋白并不能完全清除，這也是產生毒副作用的一大誘因。而本項目的攜氧納米粒子表面帶有數量可控的活性官能團，因此，可實現血紅蛋白的定點定量結合，得到分子量穩定的終產物。?現有的第三代HBOCs制品，大多用高分子材料將血紅蛋白包裹，輸注入人體后很難避免“突釋”效應，出現大量游離血紅蛋白，有可能對機體造成很大的傷害。而本項目所述的新型攜氧納米粒子，血紅蛋白與結合珠蛋白形成了穩定的復合物或者血紅蛋白與高分子材料牢固結合，即使納米粒子分解之后，也不會產生大量游離血紅蛋白，因此可大大減少相關風險。該新型攜氧納米粒子可以凍干粉末的形式保存，保存期長，穩定性高，運輸方便，可滿足各種環境下的應急使用和臨床常規應用。?使用的高分子載體為聚乙二醇-聚酯類共聚物。聚乙二醇（PEG）由于其本身不帶電荷、水溶性、無免疫原性、可以防止材料表面生物污染、減少蛋白質吸附和細菌貼附、并且不易被免疫體系識別等、且它在體內能溶于組織液中，能被機體迅速排出體外而不產生任何毒副作用的特點，是修飾納米粒子的理想材料。聚乙二醇的存在還可以有效屏蔽人體網狀內皮系統對納米粒子的吞噬和排異，延長粒子在血液中的循環時間。可生物降解且生物相容性良好的聚酯（聚己內酯/聚乳酸，PCL/PLA），無毒無刺激性，已經得到美國食品藥品監督管理局（FDA）的認證用于人體治療。

生物大分子藥物是21世紀藥物研究開發中最有前景的領域之一。運用生物信息學和計算機輔助藥物設計方法開展蛋白質工程藥物的分子設計是當今生物藥物的研究熱點。現在生物大分子藥物已被全球公認為21世紀藥物研究開發中最具尖端性及前沿性的研究領域，世界上所開展的所有最尖端、最先進的重大疾病治療方法均與生物大分子藥物有關，近年來蛋白質工程技術為藥物的研究提供的有效的技術平臺，加快了開發理想蛋白質工程藥物的進程. 當前心腦血管疾病已成為對人類健康的最大威脅之一，研究開發高效的溶栓藥已成為臨床的迫切要求，盡管現有的溶栓藥物療效肯定，但其中大多數藥物用藥劑量大,治療成本高, 還由于缺乏組織特異性和病變部位的靶向性，在體內極易降解，半衰期短或難以進入細胞內，并有潛在的出血性以及服藥后血栓再生等缺點，如何提高溶栓藥物的靶向性，使藥物選擇性地作用于血栓部位，以減少不良反應，是當前治療心血管疾病的一個亟待解決的問題，運用基因組、蛋白組研究的最新成果以及采用現代生物技術開發新型高效靶向的溶血栓新藥具有創新的學術價值和重大的社會意義及顯著經濟效益。近年來蛋白質工程技術將溶栓藥物與抗凝劑等連接成既具溶栓活性,又具抗凝雙重功能融合蛋白是目前國內外第三代溶栓藥物研究的方向，新型溶栓劑的要求是具有多種功能綜合在一起的理想的溶栓制劑,既具有較高的溶栓活性,又具抑制血栓的功能,從而使溶栓劑具有較高的纖維蛋白的專一性,降低溶栓藥物使用后再栓塞形成的可能性。采用蛋白質工程技術設計具有抗凝溶栓雙功能的新藥已經成為現代藥學的研究重點。同時隨著基礎研究血栓形成機制的進一步闡明,血栓疾病的發生非單一靶點引發而是一種多靶點疾病，針對血栓形成的特點和不同靶點進行更有效的抗血栓形成的新藥研究是國內外該領域的前沿。 本項目是一種具有成為新一代溶栓新藥的良好潛景的全新抗凝和溶栓雙重功效水蛭素12肽-瑞普替酶融合蛋白(HV12p-rPA) 。

青白散對慢性軟組織損傷大鼠骨骼肌Ⅰ、Ⅲ型膠原蛋白表達的影響