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一種鋅配體修飾的聚合物基高效基因轉染載體
基因治療通過糾正患病細胞基因缺陷或者調控細胞內特定蛋白 因子的表達，在攻克威脅人類健康的重大疾病（如癌癥，帕金森等） 方面展現出廣闊的應用前景。但核酸分子在遞送過程中非常容易被酶 降解，因此缺乏高效的基因載體材料已成為基因治療的最大障礙。本 工作通過將廉價低分子量陽離子聚合物（如，聚乙烯亞胺和聚賴氨酸 等）修飾上一種生物體內可還原的金屬配位單元，得到一種高效安全 的鋅配體修飾陽離子聚合物基核酸載體材料。 項目特色: 本項目具有制備簡單，生產成本低，基于該材料的基因載體復合 物對多種細胞系具有極高的轉染效率，且細胞毒性小，具有很強的抗血清能力。該產品對多種細胞系在轉染性能上顯著優于目前市場上商 品化主流轉染試劑。該項目技術已申請國家發明專利。
南開大學
2021-04-13
一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗
本發明的目的是提供一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗，即采用生物技術對鴨坦布蘇病毒E蛋白進行抗原表位分析、拼接，獲得一種鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，并以該融合蛋白作為抗原來制備鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗。本發明中鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，其編碼蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO:1；其中一種核苷酸序列為SEQ ID NO:2。本發明利用pET28a（+）表達性載體構建了能表達鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE的大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌。將重組表達的蛋白純化后制備成基因工程亞單位疫苗，可使免疫后鴨群獲得免疫保護。
青島農業大學
2021-04-13
磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法
一種磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法,其特征在于：這種磁性殼聚糖復合微球制備固定化葡萄糖異構酶的方法為：一、向0.4～0.6mol/L的FeCl230～100ml和FeCl350～100ml中,加入分子量為4000的聚乙二醇6.0～10.0g,在磁力攪拌器下充分溶解,再用氨水調節溶液至pH8～10,繼續攪拌30min～50min,用重蒸水洗滌抽濾后真空冷凍干燥即得Fe3O4磁核；二、將殼聚糖粉末在3％～6％乙酸中超聲分散10min,制0.02～0.08g/ml殼聚糖溶液,通過乳化劑與Fe3O4磁核超聲分散并電動攪拌10min進行混合,使之形成微乳體系,并與1％～5％戊二醛交聯在2000r/min下繼續攪拌2～4h,然后用石油醚、丙酮和重蒸水洗滌,抽濾真空冷凍干燥后即得磁性殼聚糖復合微球；三、將制備好的磁性殼聚糖復合微球先用磷酸緩沖液pH7.0～7.8浸泡,抽濾后加入用緩沖液稀釋后的濃度為4mg/ml～16mg/ml的葡萄糖異構酶15～20ml,在室溫搖床上振蕩4～10h,取出放入4℃靜置過夜,傾出上清液,沉淀用蒸餾水洗滌再用上述磷酸緩沖液洗滌,直至洗滌液檢測不到戊二醛和游離酶,無紫外吸收,抽濾得固定化葡萄糖異構酶
黑龍江八一農墾大學
2021-05-04
重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應用
本發明涉及重組野生型雞半胱氨酸蛋白酶抑制劑及其應用。獲得重組野生型 cC 的方法是：利用 pGAPZ α A 載體構建野生型 cC 的表達系統；重組野生型 cC 在畢赤酵母 X-33 中表達；重組野生型 cC 的分離純化。對重組野生型 cC 對鰱魚魚糜凝膠劣化抑制作用的檢測方法是：魚糜樣品的制作；對所取魚糜樣品進行溫浴處理，加重組野生型 cC 和未加 cC 成為對照組；處理樣品進行 SDS-PAGE ，觀察結果。本發明驗證了重組野生型 cC 可以直接加入魚糜制品中，能明顯抑制魚糜制品的凝膠劣化，在加工過程中能較好的保持其彈性，且其安全、無毒，有著良好的應用前景
遼寧大學
2021-04-11
?酶催化可控釋放一氧化氮生物材料制備方法
該材料具有良好的加工性，能制備成可注射溶液、薄膜、多孔支架、以及靜電紡絲纖維膜等多種產品。由于一氧化氮能夠可控按需釋放，CS-NO及其復合材料可用于治療糖尿病下肢缺血、皮膚損傷和心梗疾病。
南開大學
2021-04-10
無酶的葡萄糖電化學傳感器及其檢測方法
本發明公開了一種無酶的葡萄糖電化學傳感器及其檢測方法，該無酶的葡萄糖電化學傳感器包括由參比電極、對電極和工作電極組成的三電極體系，所述工作電極由對葡萄糖具有電催化氧化性能的材料制成；使用該無酶的葡萄糖電化學傳感器檢測葡萄糖的方法，包括如下步驟：(1)電化學預處理工作電極：施加高負電位；(2)電化學氧化葡萄糖：施加葡萄糖氧化所需電位；(3)電化學清洗工作電極：施加正電位。本發明可去除樣品pH對檢測結果的影響，使原本需要在堿性條件下進行無酶的葡萄糖檢測，可在中性及酸性樣品中的進行，并且具有電極穩定性好、靈敏度高、重復性好等優點，具有非常廣闊的應用前景。
東南大學
2021-04-11
一種通過內源芥子酶調控芥菜產品風味和貯藏性的方法
該專利技術可應用于芥菜等蔬菜的腌制加工。通過調節芥菜機械處理程度、脫水程度以及加工溫度等，調節芥菜內源芥子酶活性，進而調控芥菜產品的風味和貯藏性。目前芥菜等腌制蔬菜在加工中存在色澤、風味等方面的不足，與消費者需求有一定差距，市場需求改進的加工技術。該技術已在河南一家企業成熟應 用。該技術具有較好的應用前景，在應用過程中也將產生明顯的經濟效益和社會 效益。 專利的技術水平： 先將芥菜切成長度為 4-6 厘米、寬度為 1.5-2.5 厘米的細絲，然后用 4-5%食鹽進行腌制 1-2 個小時；將腌制后的芥菜絲在沸水中漂燙 20-40 秒，然后快速冷卻；冷卻后的芥菜絲在真空包裝后，進行巴士殺菌。該產品具有芥菜特色的風味，控制了褐變，在常溫下貯存期可達到 6 個月。該技術達到國際先進水平。
江南大學
2021-04-11
關于軍團菌來源的新型O-糖基轉移酶機理
糖基化修飾是一種廣泛存在且重要的蛋白質翻譯后修飾，由糖基轉移酶催化形成。抗體、疫苗等許多臨床治療性蛋白質都具有特異性糖基化修飾，且對蛋白活性至關重要。基于糖基轉移酶的化學酶法合成方法，是獲得均一糖蛋白的有效手段之一。因此，找尋性質優良的各種糖基轉移酶十分關鍵。對比真核細胞，細菌來源的糖基轉移酶具有易表達純化和催化產率高等優良性質，常被改造為人工合成糖蛋白的工具酶。然而，蛋白O-連接糖基化修飾在原核生物與真核生物之間并不保守，這成為了利用細菌糖基化系統生產真核生物O-糖蛋白的一大瓶頸。為了解決這個問題，陳興教授課題組對病原菌-宿主相互作用中的蛋白質糖基化進行了探索。 某些病原菌入侵宿主細胞后，會分泌具有糖基轉移酶活性的效應蛋白。這些效應蛋白往往利用宿主的糖供體，并且修飾宿主的靶蛋白。因此，對這類糖基轉移酶的工程化，可為實現真核生物O-糖蛋白的合成提供新的有效策略。嗜肺軍團菌效應蛋白SetA具有O-葡萄糖轉移酶活性，然而其底物蛋白尚未被鑒定。 本研究首先開發了能夠實現特異性標記和選擇性富集的化學酶法策略。他們設計被SetA利用的生物正交基團修飾的糖供體（尿苷二磷酸-6-疊氮-葡萄糖，UDP-6AzGlc），將疊氮葡萄糖6AzGlc轉移至底物蛋白。通過點擊化學反應，與可切割生物素探針連接，實現對底物蛋白的選擇性富集和位點特異性質譜鑒定(下圖)。質譜分析鑒定到分布于276個蛋白的317個O-glucose修飾位點。天然糖供體標記及軍團菌侵染實驗，驗證了SetA可以修飾眾多的底物蛋白。
北京大學
2021-04-11
一種產角蛋白酶的粘金黃桿菌及其分離方法
本發明公開了一種產角蛋白酶的粘金黃桿菌及其分離方法。所述粘金黃桿菌拉丁名為Chryseobac？terium？L99，保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏號為CGMCC？No.2295。本發明公開了該菌的形態學特征為：菌體桿狀，不產孢子，無運動性，革蘭氏染色呈陰性。本發明公開了該菌的全細胞脂肪酸主要成份為：十三甲基十四酸47.59％，二羥基-13-甲基十四酸和(或)Ω-7-順式-13甲基-十五酸15.72％，三羥基-15-甲基十六酸13.91％，Ω-9-順式-14甲基棕櫚酸9.48％。本發明還公開了該菌的16S核糖體DNA(16S？rDNA)全序列。本發明公開的分離方法包括三個步驟：普通營養培養基富集培養，以角蛋白為唯一碳氮源固體培養基初篩，以角蛋白為唯一碳氮源液體培養基的復篩。該方法快捷有效，所得菌種產酶能力強。
浙江大學
2021-04-13
尿激酶、激肽釋放酶、抑肽酶和高純度尿多酸肽聯產工藝
本項目的特點是尿綜合利用聯產工藝，可將尿激酶、激肽釋放酶，抑肽酶和高純度尿多酸肽四種成分分別提取分離出來，能大大降低成本。高純度高分子尿激酶新工藝曾與中國藥品檢定所共同舉辦了學習班，轉讓給了四家藥廠還承擔制作了國家標準品和亞太地區國際標準品，MW54，000達100%，而英國制作的樣品只有60%。尿多酸肽是國際上唯一的尿制劑抗癌藥物，但含75%尿素、銨鹽、類黑精、雜醇油等大量雜質，副作用大，穩定性差。本工藝排雜徹底，提取分離純化手段先進，成本低，收率高，純度高，活性高，無副作用。
北京航空航天大學
2021-04-13