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通過計算機虛擬篩選和建立熒光共振能量轉移的體外高通量篩選體系，篩選得到新型的ATG4B小分子抑制劑S130。通過對自噬信號通路的研究，發現S130不影響自噬體功能及其與溶酶體的融合，而是抑制了LC3-PE的去脂化過程，最終阻斷細胞自噬。這為進一步明確ATG4B在自噬信號通路中的調控作用提供了新的理論基礎。通過抗腫瘤作用的研究，發現S130可有效抑制結腸癌細胞的生長，且營養缺乏能進一步增強S130的抗腫瘤效果，而過表達ATG4B可部分對抗S130引起的腫瘤細胞死亡，提示ATG4B可能是腫瘤治療中的潛在靶點。同時，藥代動力學實驗結果表明，該抑制劑在體內主要分布于腫瘤組織，從而抑制結腸癌細胞的生長。綜上，該研究表明ATG4B可能是腫瘤治療的潛在藥物靶標，而S130作為高效的ATG4B小分子抑制劑具有開發成為腫瘤治療藥物的潛能。

成果簡介：二十二碳六烯酸（DHA）是人體所必需的一種多不飽和脂肪酸，是大 腦細胞膜的重要構成成分，可輔助腦細胞發育，對治療高血脂癥、動脈粥樣硬化 178天津大學科技成果選編 等能起到有效作用。本課題組通過開發破囊壺菌高密度異養發酵生產二十二碳六 烯酸（DHA）關鍵工程化技術，篩選出高產 DHA 的破囊壺菌工業菌株 2 株。同 時優化獲得了破囊壺菌生產 DHA 的工藝條件，批量發酵培養破囊壺菌，獲得 DHA 的提取技術，在分離純化 DHA 的基礎上，能夠進一步優化中式技術，獲得高純 度（90%）DHA，實現商業價值。 成果水平： 國內領先，團隊專有技術 應用范圍：海洋生物能源與生物資源可持續發展利用技術，利用海洋微生物進行 高附加值、高產能的海洋生物能源開發（提取 DHA），主要可應用于海洋微藻產 氫產脂、生物醫藥、生物食品、保健等領域。 市場分析及前景：據統計目前市售食品級低濃度（22％-25％）DHA 價格在 26.9-36.5 萬元/噸；食品級高濃度 DHA（27％-30％）為 73-109.5 萬元/噸，而純 度為99.9％的DHA售價高達16.8萬美元/公斤。當前DHA的生產主要來自魚油， 普遍存在分離成本高、具有魚腥味、有污染物等問題。海洋微生物的不飽和脂肪 酸成分簡單，易于分離純化，用于發酵生產 DHA 可以有效解決利用魚油生產 DHA 的問題，降低 DHA 的生產成本，產業過程污染少，隨著國內消費者健康意 識的不斷提升以及購買力的提高，國內 DHA 的需求必將進一步增加，其開發應 用前景廣闊。 主要技術指標：分離得到 200 多株可培養的破囊壺菌菌株，獲得高產 DHA 和類胡蘿卜素的破囊壺菌工程菌株，如 Aurantiochytrium sp. PKU#SW7 和 Thraustochytriidae sp. PKU#Mn16，其 DHA 占細胞干重達 20%；另已獲得 4 株破 囊壺菌基因組二代測序結果；申請發表專利（破囊壺菌的分離純化培養，破囊壺 菌快速測定方法等）；獲得粗制 DHA 工藝技術。 投資規模：包括設備、資金、場地、人員等。 合作方式：技術轉讓等

自養型富油微藻具有光合作用效率高、環境適應能力強、生長周期短、生物產量高的特點，是理想的生物質能源材料。利用藻類生物質生產液體燃料對緩解人類面臨的糧食、能源、環境三大危機，有著巨大的潛力。本項目開發的富油舟形藻屬硅藻類，是富油潛力藻種之一。對原始藻種馴化和篩選后，在不補充CO2的情況下，以自養方式培養藻細胞，干重可達3.66g/L，生長周期15天，油含量達到40%以上，達到了國際先進水平。現完成實驗室3L規模的小試階段，500L規模的中試培養正在進行中，10噸級規模的光生物反應器正在建設投產，可年產960kg的干藻粉。更大規模的光生物反應器正在籌備之中。富油小球藻是本實驗室開發的第二個品種。以BG11為培養基，在100L光生物反應器中，優化后的藻細胞自養培養，干重可達5.5g/L培養基，總油脂含量可達藻細胞干重的50%左右，達到國內外先進水平。已達到500L的中試培養規模，10噸級規模的光生物反應器正在建設投產。以年產10 M gallons生物柴油的投資成本計，約10年即可完全收回投資成本。自養型微藻的無機鹽占到總成本的60%以上。本項目已成功把沼氣發酵和小球藻的培養兩個體系進行偶聯，即利用沼氣發酵的沼液作為小球藻的培養基，同時把沼氣中的CO2作為微藻培養的CO2來源。偶聯后小球藻的各項指標和無機鹽培養相近。這樣既解決了微藻培養的培養基成本問題，又提高了沼氣的純度與質量，還減少了沼液的環境污染。已申請專利一項。

本發明屬于水體污染控制領域，提供了一種黃酮緩釋抑藻制劑的制備方法。所述黃酮緩釋抑藻制劑中含有質量分數為30?50%的5,4’?二羥基黃酮，質量分數為50?70%的海藻酸鈉等包埋劑，包封率為50?70%。所述黃酮緩釋抑藻制劑的采用5,4’?二羥基黃酮二甲亞砜溶液與海藻酸鈉溶液混合與殼聚糖和無水氯化鈣的混合溶液混合；然后反應一段時間后過濾，得到沉淀的黃酮緩釋抑藻制劑。本發明使用的材料生態安全性好，制得的黃酮緩釋抑藻制劑可以顯著抑制水華藻類生長活性，特別是抑制銅綠微囊藻生長活性，可控制或治理湖泊藻類水華的暴發。本發明與現有技術相比，作用時間持久，特別適用于頻繁暴發的藍藻水華預防與治理。

中試階段/n該項目公開了一種改性藻絮凝劑的制備方法及其在治理藍藻水華中的應用，用化學絡合以及物理吸附的方法，把硝酸鐵固定到陰性聚丙烯酰胺上去。改性后的絮凝劑表面具有比較多的離子性質。從而改良后的絮凝劑可以快速的去除微囊藻。改性絮凝劑不但具有良好的吸附效果，而且這類高分子聚合物為商品化產品、廉價、易得，且改性后絮凝劑的穩定性很高。改性后的絮凝劑對環境、人畜無毒無害、無殘留，能夠顯著地改良及凈化養殖水體環境，有效避免藍藻水華的爆發且不會造成二次污染。

1 成果簡介原料油脂費用占生物柴油生產成本的 80％以上，目前原料油脂價格高居不下并不斷上漲，制約了生物柴油產業化和商業化。國內外生產生物柴油的主要原料是大豆油、菜籽油、花生油、棕櫚油、地溝油等。它們與農業爭地，與食品及飼料爭原料，單位生物量的產油率低，生產周期長，消耗大量的水資源、化肥和能源。 清華大學發明了微藻異養發酵生產生物柴油的新技術，其技術特征在于：通過對一種特別藻株特殊品系的篩選和代謝途徑的改變， Chlorella protothecoides 0710 strain 由光合自養轉變為化能異養，細胞由綠變黃，生長繁殖更快，油脂含量提高 3~4 倍，達細胞干重的 61％以上。又將工業界成熟的發酵技術應用于高油脂異養微藻的生產，進一步提高發酵規模和細胞密度，現細胞發酵密度超過了 100 g/L，獲取了大量異養干藻粉后提取油脂，經轉酯化反應生成了高質量的生物柴油。 該技術的創新點： （ 1）發明了微藻異養發酵生產生物柴油新技術，打通了以糖、淀粉、有機廢水、二氧化碳等為原料、工業自動化條件下高效生產生物柴油的新途徑； （ 2）異養藻細胞發酵產量和油脂含量不斷創造新高（ 細胞干重 100 g/L，含油量 60％），提高了該技術工業化生產的經濟性； （ 3）在發酵前引入利用 CO2和光合作用來減少糖或淀粉的消耗，降低成本同時減少溫室氣體的排放。 該技術獲 3 項國家發明專利和 2007 年全國發明大會獎。2 應用說明與有實力的企業界合作，在工業化規模上進一步降低微藻發酵過程的成本，實現該技術的商業化運作。 主要生產原料為二氧化碳及以下 3 類之一：（ 1） 甜高粱、甘蔗等糖質原料；（ 2） 木薯、玉米等淀粉質原料；（ 3） 含糖有機廢水。 生產設備：微藻培養池、光生物反應器、工業發酵設備及廠房為主。 生產消耗：電能、蒸汽等（無污染等環境問題）。 產品應用：微藻生物柴油質量好，應用范圍與目前市場上銷售的柴油完全相同。 投資風險：本技術創新性強，沒有前人的實踐、范例和經驗；通過工業化和規模化來實現進一步降低成本的目標；高技術、高投入、預期高回報的同時也存在投資風險。3 應用范圍中國境內的生物柴油能源市場等。4 效益分析全世界油脂價格和液體燃料價格瘋狂上漲，對世界經濟、政治和國家安全等產生重大影響。5 合作方式（ 1） 合作研究開發：清華大學方投入前期的專利技術、成果、儀器、實驗室和研究人員，政府或企業方投入研發資金（至少若干百萬元起步）、設備和工程技術人員，雙方共同合作，在工業化規模上進一步降低微藻發酵過程的成本，實現該技術的商業化運作。雙方風險共擔，成果共享。 （ 2） 技術轉讓：清華大學方將前期的專利、技術、成果獨家轉讓給企業方，同時協助企業方完成進一步的研發、生產和商業化運作。企業方首先投入技術轉讓費用，享有對該技術的壟斷權。

可以量產/n本技術體系中的藻、菌聯合處理養殖廢水和養殖廢水循環利用技術可與現行集約化養殖工藝對接。適用范圍廣，處理效率高。收獲的藻菌物質可作為功能性飼料使用，能大大降低處理成本，起到變廢為寶的效果。該技術體系實現畜禽廢水處理成本較現行處理成本降低15%以上。將養殖廢水的COD日均排放降低到150mg/L以下，總氮（TN）降低到20mg/L以下，總磷（TP）降低到5mg/L以下。水質達到《農田灌溉水質標準》GB5084-2005），同時能生產微藻功能性動物和水產飼料。該技術體系適用于全國集約化畜禽養殖

該研究發現RNA病毒感染宿主細胞可誘導表達一種新型自噬受體CCDC50，該自噬受體通過識別K63型泛素化修飾的RNA病毒模式識別受體RIG-I/MDA5（RLR）并介導后者的自噬途徑依賴的降解，從而抑制病毒感染誘導的I型干擾素的產生，幫助機體恢復到靜息狀態，避免過度免疫反應造成的組織損傷和自身炎癥。我校博士后侯盼盼為論文第一作者，郭德銀教授為通訊作者，我校醫學院、附屬第七醫院為第一作者單位。       天然免疫是一種非特異性的宿主抵抗病原微生物入侵的免疫反應,它廣泛存在于機體的絕大部分細胞，被認為是機體抵抗病原體感染的第一道防線。隨著近幾十年的研究，人們對天然免疫系統愈發了解，已經發現并鑒定出天然免疫反應的關鍵調控因子和信號轉導因子，然而某些重要調控因子的結構和功能機制依然不清楚，且這些調控因子的生理和病理作用尚有待于研究。郭德銀教授課題組利用CRISPR/Cas9第二代文庫在免疫細胞中進行了全基因組水平的大規模無偏差篩選，發現了一系列參與天然免疫反應調控的新型基因。進一步的驗證過程中發現CCDC50蛋白在RNA病毒感染下表達量顯著增加且其表達模式和RLR的表達模式一致，提示著CCDC50可能參與調控RLR介導的信號通路活性。為了進一步驗證該觀察結果，該課題組構建了CCDC50條件缺失的小鼠模型，攻毒實驗結果證明缺失CCDC50后，病毒感染條件下，I型干擾素表達上調，其下游的ISGs表達水平也隨之升高，小鼠清除病毒能力增強，肺部組織損傷和炎性浸潤減少，且小鼠存活率增加，從而證明CCDC50在機體水平具有生理學功能。       進一步的機制探究中，該課題組發現CCDC50特異性識別K63泛素化修飾的RLR，并促進激活的RLR的自噬途徑依賴的降解，此機制不同于以往了解較多的K48泛素化依賴的降解調控。該過程的發生并不依賴于常見的自噬受體p62， 因p62缺失后，CCDC50依然可以促進RLR的降解，但CCDC50可與p62協同作用。劉迎芳教授團隊解析了CCDC50分子LIR結構域和LC3復合體的晶體結構，結構分析證明CCDC50中存在一段非典型的LIR基序，該基序可以結合位于LC3的LDS結合位點，將K63泛素化修飾的RLR拉進自噬小體。有趣的是，緊鄰LIR基序，CCDC50有一段MIU基序，該基序可稱為反向UIM基序，體外生化實驗證實CCDC50-MIU可以結合在LC3的UDS位點，進而證明CCDC50是一種新型自噬貨物受體，可以以兩段不同的疏水基序結合在LC3的不同位點。這類自噬貨物受體是首次在生物體內被發現

-5,8,11,14-二十碳四烯酸，是屬于ω-6系列的一種人體必需的多不飽和脂肪酸(Polyunsaturated fatty acids，PUFAs)，具有廣泛的生物活性和重要的營養作用。ARA不僅是機體組織細胞膜的結構成分，同時, 它也是內循環系統和中樞神經系統中起重要作用的前列腺素、環前列腺素和白三烯類等二十碳衍生物的直接前體。另外，ARA也是成熟母乳成分之一，它對嬰兒的視力和智力發育是必需的。因此，英國營養基金會和FAO/WHO推薦在嬰兒奶粉中添加DHA和ARA。ARA及其代謝產物的生理功效還包括：在細胞內可發揮第二信使作用，參與造血和免疫調節，引起血管舒張，參與肝、膽多種功能的調節，引起炎癥反應及參與神經內分泌和促進細胞分裂等。在水產動物營養方面，ARA是許多魚類幼體、對蝦幼體的必需脂肪酸，關系到幼體的生長發育和存活。餌料中添加ARA，可提高投喂動物的生長速度和存活率。藻膽蛋白是某些藻類特有的重要捕光色蛋白,早在上個世紀初,就曾報道在藍藻和紅藻中存在強烈熒光性的紅色、紫羅藍色和藍色蛋白質。科學研究表明，藻膽蛋白是一種既可以作為天然色素用于食品、化妝品、染料等工業上，也可制成熒光試劑，用于臨床醫學診斷和免疫化學及生物工程等研究領域中。另外，還可以制成食品和藥品用于醫療保健上，應用范圍廣闊，具有很高的開發、利用價值。藻膽蛋白主要存在于藍藻、紅藻、隱藻和少數一些甲藻中 ,其主要功能是作為光合作用的捕光色素復合體 ,在一些藻類中藻膽蛋白也可以作為儲藏蛋白 ,以使藻類在氮源缺乏的季節得以生存。已知的藻膽蛋白主要可以分為以下4大類：藻紅蛋白(Phycoerythrin,PE)、藻藍蛋白(Phycocyanin,PC)、藻紅藍蛋白(Phycoerythrocyanin,PEC)、別藻藍蛋白(Allophyxoxyanin,APC)。

為了探索行之有效的抑制藻類水華暴發的途徑，更好的了解藻類水華爆發的自然條件，就需要進行大量的實驗室模擬培養。但是作為水華爆發的主要藻類，微囊藻的實驗室純培養比較困難，特別是現有的培養基及培養條件很難達到實驗室純培養銅綠微囊藻的要求。為解決銅綠微囊藻實驗室純培養較困難的問題，本發明提供一種利于銅綠微囊藻生長的培養基及培養條件