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基因治療現(xiàn)已成為攻克腫瘤最具希望，也是研究最為活躍的領(lǐng)域。基因?qū)胂到y(tǒng)是基因治療的核心技術(shù)。現(xiàn)階段面臨的最大難題在于尚未找到理想的基因載體，治療基因的導(dǎo)入仍然是腫瘤基因治療的瓶頸。非病毒載體近年來發(fā)展迅速，其中聚乙烯亞胺(polyethylenimine PEI)是近年來研究最為廣泛的陽離子多聚物非病毒基因載體。 本項目針對聚乙烯亞胺（PEI）轉(zhuǎn)基因載體使用中存在的轉(zhuǎn)染效率與細(xì)胞毒性相矛盾及靶向性差等問題，采用生物可降解技術(shù)、金屬離子配位技術(shù)等連接低分子量聚乙烯亞胺(LMW PEI)，得到多分枝狀或網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的高分子量PEI衍生物，進(jìn)而選擇腫瘤主動靶向多肽RGD、tLype-1等，與細(xì)胞穿膜肽TAT(49-57)、核定位信號肽NLS連接，合成具有多功能的數(shù)種功能肽RGDC-TAT、RGDC-TAT-NLS、tLype-1-NLS等，利用交聯(lián)技術(shù)將多功能與PEI衍生物偶聯(lián)，從而構(gòu)建新型非病毒基因載體系統(tǒng)，旨在保證較高轉(zhuǎn)染效率情況下，降低PEI細(xì)胞毒性，增加其對腫瘤的靶向性，克服當(dāng)前非病毒基因載體的瓶頸問題，為基因治療探索一條有效途徑。 本項目受國家自然科學(xué)基金、上海市科委國際學(xué)術(shù)合作項目及上海市教委科研創(chuàng)新項目資助，發(fā)表學(xué)術(shù)論文數(shù)十篇，申請發(fā)明專利10項，其中授權(quán)7項。

溶瘤痘苗病毒在體內(nèi)有四種形式，其中EEV外包裹細(xì)胞膜，能逃避機(jī)體免疫反應(yīng)，使其特別適合靜脈注射（圖A）。表達(dá)治療基因A的溶瘤痘苗病毒有非常好的治療效果（圖B），VV-A與和PD-1抗體很好的協(xié)同作用（圖C）。

本發(fā)明的目的是提供一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗，即篩選獲得鴨坦布蘇病毒E蛋白具有優(yōu)勢抗原表位的DomainIII結(jié)構(gòu)域，并通過Lingker與腸毒素LTB組成新型融合蛋白LTB-Es，并以該融合蛋白作為抗原來制備鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗。本發(fā)明中鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白LTB-Es，其編碼蛋白的氨基酸序列為SEQIDNO:1；其中一種核苷酸序列為SEQIDNO:2。本發(fā)明利用原核表達(dá)載體構(gòu)建了能表達(dá)鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白LTB-Es的大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌。將重組表達(dá)的蛋白純化后制備成基因工程亞單位疫苗，可使免疫后鴨群獲得免疫保護(hù)。

本成果是將人工合成的表達(dá)豬圓環(huán)病毒 2 型 Cap 蛋白的核苷酸 序列克隆到桿狀病毒表達(dá)載體中，構(gòu)建重組桿狀病毒，接種 Sf9 昆蟲細(xì)胞，經(jīng) 過懸浮培養(yǎng)、收獲、過濾，二乙烯亞胺 BEI 滅活病毒液后，加入適宜的佐劑混 合乳化制成。并利用自主分離鑒定副豬嗜血桿菌病多價流行菌株，通過優(yōu)化培 養(yǎng)工藝，提高副豬嗜血桿菌培養(yǎng)密度，成功研制了豬圓環(huán)病毒 2 型-副豬嗜血桿 菌多聯(lián)多價滅活疫苗。 

已有樣品/n成功將全長的西妥昔單抗基因分別克隆至腺病毒載體AdC68和Hu5，構(gòu)建重組腺病毒AdC68-CEb和Hu5-CEb，通過WesternBlot4證明成功表達(dá)了西妥昔單抗；我們進(jìn)一步通過夾心ELISA對表達(dá)的西妥昔單抗進(jìn)行了定量，產(chǎn)量分別為639g/L和522g/L；同時，我們通過間接免疫熒光證明了所表達(dá)的西妥昔單抗與EGFR結(jié)合的特異性；并通過MTT實驗證明了AdC68-CEb和Hu5-CEb顯著抑制結(jié)直腸癌細(xì)胞的生長，而對正常細(xì)胞沒有抑制作用；動物實驗顯示，用AdC68-CEb和Hu5

研究表明冠狀病毒表面S蛋白結(jié)構(gòu)中與ACE2直接結(jié)合的S1亞結(jié)構(gòu)易發(fā)生變異，而S2結(jié)構(gòu)在病毒對細(xì)胞進(jìn)行融合的過程中，可形成高度保守的疏水溝狀構(gòu)型，幫助病毒的RNA進(jìn)入人體細(xì)胞。只要抑制了S2結(jié)構(gòu)，即可抑制病毒對人體細(xì)胞的融合。因此發(fā)現(xiàn)與設(shè)計可以在S2蛋白結(jié)合的多肽成為關(guān)鍵技術(shù)點。項目依托Reymond教授已發(fā)展成熟的Chemical Sp

在我國，膀胱癌在泌尿系統(tǒng)腫瘤中占第一位，在經(jīng)濟(jì)、社會發(fā)展 中造成了嚴(yán)重的損失，危害十分嚴(yán)重。傳統(tǒng)的放、化療存在抗腫瘤能 力低、殺傷指數(shù)過小、副作用大等缺點。治療效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不能令人滿意。 因此，探索新的治療理念、策略和途徑，提高膀胱腫瘤的治療效果， 顯得十分迫切。 腺病毒是理想的腫瘤基因治療和生物治療載體。腺病毒載體由于 具有易于制備高滴度病毒、可感染分裂期和非分裂期細(xì)胞以及不整合 到宿主基因組等優(yōu)點而成為

本發(fā)明的目的是提供一種鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗，即采用生物技術(shù)對鴨坦布蘇病毒E蛋白進(jìn)行抗原表位分析、拼接，獲得一種鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，并以該融合蛋白作為抗原來制備鴨坦布蘇病毒基因工程亞單位疫苗。本發(fā)明中鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE，其編碼蛋白的氨基酸序列為SEQ ID NO:1；其中一種核苷酸序列為SEQ ID NO:2。本發(fā)明利用pET28a（+）表達(dá)性載體構(gòu)建了能表達(dá)鴨坦布蘇病毒新型融合蛋白DE的大腸桿菌BL21(DE3)宿主菌。將重組表達(dá)的蛋白純化后制備成基因工程亞單位疫苗，可使免疫后鴨群獲得免疫保護(hù)。

【發(fā) 明 人】張軍峰；董偉；孟玉芬；詹瑧；何立巍；馬宏躍；馬肖兵 【摘要】 本發(fā)明公開了鮮澤漆汁在制備治療單純皰疹病毒藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明通過大量實驗篩選，實驗結(jié)果表明鮮澤漆汁體外對單純皰疹病毒致細(xì)胞病變效應(yīng)具有明顯的抑制作用，并且毒性低，不良反應(yīng)小，且澤漆資源廣泛，易得，成本較低，可持續(xù)開發(fā)，應(yīng)用前景廣泛，有望開發(fā)成新的抗單純皰疹病毒藥物。

“NMT界喬布斯”許越先生推薦創(chuàng)新平臺 中關(guān)村NMT產(chǎn)業(yè)聯(lián)盟推介成員單位創(chuàng)新產(chǎn)品 “生物安全，人人有責(zé)” 推出背景： 在國際競爭白熱化，戰(zhàn)爭形態(tài)多樣化的今天，生物安全已成為國家安全的重要組成部分，為積極應(yīng)對這一挑戰(zhàn)，2019年10月，生物安全法草案于首次提請十三屆全國人大常委會第十四次會議審議。本次新冠肺炎疫情的爆發(fā)，讓各界更加意識到，生物安全對于確保國家安全、保障社會穩(wěn)定、人民群眾生命安全和身體健康的重要性。 國家安全就是國家競爭，歸根結(jié)底又是科技實力的競爭！因此，作為中國的高新技術(shù)企業(yè)，中關(guān)村NMT聯(lián)盟的會員單位，旭月（北京）科技有限公司利用20多年的技術(shù)積累，以NMT：非損傷微測技術(shù)為底層核心技術(shù)，迅速推出了與國家生物安全相關(guān)多種檢驗，監(jiān)測儀器設(shè)備，以及適用于多個學(xué)科及領(lǐng)域的研發(fā)平臺： 《NMT生物安全創(chuàng)新平臺》特制系列產(chǎn)品！ ? 應(yīng)對挑戰(zhàn)： 1）安全性：NMT是用于研究活體材料的生理環(huán)境，其所檢測的Na+、H+、K+、Cl-等與細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞形態(tài)維持等生理過程直接相關(guān)。 2）有效性：NMT可實現(xiàn)活體組織層面研究，結(jié)果更貼近體內(nèi)的真實藥效結(jié)果。 3）耐藥性：耐藥性的重要機(jī)制之一，是病毒改變了其所處的微環(huán)境，影響藥物發(fā)揮作用，而組成微環(huán)境的pH（H+）及相關(guān)Ca2+信號，正是非損傷微測技術(shù)研究的對象。 分類及用途： 1）《高通量抗菌藥NMT篩選儀》（型號：NMT-HABS-100） 基于底層核心NMT技術(shù)，以及成熟的技術(shù)解決方案，讓科研人員可以馬上投入相關(guān)科研創(chuàng)新工作。 ? 2）《高通量抗菌藥NMT篩選儀》（型號：NMT-HABS-200） 基于底層核心NMT技術(shù)，結(jié)合自身科研興趣，以及其它相關(guān)技術(shù)參數(shù)，在我方技術(shù)人員協(xié)助下形成技術(shù)解決方案，讓科研人員建立更具獨有創(chuàng)新特色的實驗平臺。 ? 《高通量抗菌藥NMT篩選儀》（型號：NMT-HABS-100） 應(yīng)對挑戰(zhàn)： 1）安全性：NMT是用于研究活體材料的生理環(huán)境，其所檢測的Na+、H+、K+、Cl-等與細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞形態(tài)維持等生理過程直接相關(guān)。 2）有效性：NMT可實現(xiàn)活體組織層面研究，結(jié)果更貼近體內(nèi)的真實藥效結(jié)果。 3）耐藥性：耐藥性的重要機(jī)制之一，是病毒改變了其所處的微環(huán)境，影響藥物發(fā)揮作用,而組成微環(huán)境的pH（H+）及相關(guān)Ca2+信號，正是非損傷微測技術(shù)研究對象。 用途： 基于底層核心NMT技術(shù)，以及成熟的技術(shù)解決方案，讓科研人員可以馬上投入相關(guān)科研創(chuàng)新工作。 ? 參數(shù)： 1.基本功能： 1.1針對抗菌藥物快速篩選設(shè)計 1.2活體、原位、非損傷檢測 1.3可檢測指標(biāo)：H+、K+、Na+、Ca2+、Cl-、O2、H2O2 1.4 可支持96孔板檢測 2.性能： 2.1自動化操作 2.2長時間實時和動態(tài)監(jiān)測 2.3無需標(biāo)記 2.4立體3D流速檢測 3.軟件： 3.1imFluxes智能軟件，可直接檢測、輸出離子分子的濃度與流速 《高通量抗菌藥NMT篩選儀》（型號：NMT-HABS-200） 應(yīng)對挑戰(zhàn)： 1）安全性：NMT是用于研究活體材料的生理環(huán)境，其所檢測的Na+、H+、K+、Cl-等與細(xì)胞能量代謝、細(xì)胞凋亡、細(xì)胞形態(tài)維持等生理過程直接相關(guān)。 2）有效性：NMT可實現(xiàn)活體組織層面研究，結(jié)果更貼近體內(nèi)的真實藥效結(jié)果。 3）耐藥性：耐藥性的重要機(jī)制之一，是病毒改變了其所處的微環(huán)境，影響藥物發(fā)揮作用,而組成微環(huán)境的pH（H+）及相關(guān)Ca2+信號，正是非損傷微測技術(shù)研究對象。 用途： 基于底層核心NMT技術(shù)，結(jié)合自身科研興趣，以及其它相關(guān)技術(shù)參數(shù)，在我方技術(shù)人員協(xié)助下形成技術(shù)解決方案，讓科研人員建立更具獨有創(chuàng)新特色的實驗平臺。 ? 參數(shù)： 1.基本功能： 1.1針對抗菌藥物快速篩選設(shè)計 1.2活體、原位、非損傷檢測 1.3可檢測指標(biāo)：H+、K+、Na+、Ca2+、Cl-、O2、H2O2 1.4可支持96孔板檢測 1.5可實時監(jiān)測和記錄檢測時的環(huán)境參數(shù)：溫度、濕度、大氣壓、海拔、經(jīng)緯度 1.6配備新指標(biāo)拓展功能 2.性能： 2.1自動化操作 2.2長時間實時和動態(tài)監(jiān)測 2.3無需標(biāo)記 2.4立體3D流速檢測 3.軟件： 3.1imFluxes智能軟件，可直接檢測、輸出離子分子的濃度與流速，以及檢測時的環(huán)境參數(shù)